陈佳玉
- 作品数：33 被引量：76H指数：5
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- 发文基金：台州市科技局资助项目浙江省自然科学基金浙江省科技厅项目更多>>
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- 丙型肝炎治疗性DNA疫苗的实验研究
- 陈佳玉
- 关键词：丙型肝炎治疗性疫苗乙肝核心抗原T细胞表位细胞免疫反应
- 文献传递
- 中药紫草素对鼻咽癌CNE-2细胞增殖和凋亡的影响被引量：3
- 2014年
- 目的探讨紫草素(shikonin)对体外鼻咽癌细胞增殖及凋亡的影响。方法经紫草素处理后的人鼻咽癌细胞株CNE-2和永生化非癌性人鼻咽上皮细胞株NP-69,采用CCK-8试剂盒检测细胞增殖抑制情况;在荧光显微镜下利用Hoechst33258荧光染色法观察药物处理后细胞的凋亡现象;应用流式细胞仪(FCM)分析细胞凋亡率的变化。结果不同浓度紫草素对CNE-2细胞的增殖均有抑制作用,与无药物处理对照组相比差异具有统计学意义(P<0.05或P<0.01),并呈时间和浓度依赖性,其中10μg/ml紫草素处理CNE-2细胞72 h后的抑制率高达84.64%;Hoechst33258染色检测发现典型的凋亡细胞核形态学变化;流式细胞仪检测显示,CNE-2细胞实验组的凋亡率高于对照组(P<0.05)。结论紫草素能明显抑制体外鼻咽癌CNE-2细胞的生长,呈浓度与时间依赖性,并诱导其凋亡。
- 陈武兵蔡志毅金巧智陈佳玉孙栋勋
- 关键词：紫草素鼻咽癌细胞增殖细胞凋亡
- 以HBc颗粒为载体的真核表达载体pcDNA3.1-HBc^(NheⅠSpeⅠ)的构建被引量：1
- 2006年
- 目的构建含乙肝核心C基因的真核表达载体pcDNA3.1-HBc^(NheⅠSpeⅠ),为预防性及治疗性表位疫苗的研制打下基础。方法采用分子克隆技术在原核表达质粒pTrc-core的HBcAge1-loop及e2-loop内分别添加NheⅠ及SpeⅠ酶切位点,双酶切此重组载体pTrc-coreNheⅠSpeⅠ及真核表达载体pcDNA3.1,产物经纯化、连接,构建成真核表达质粒pcDNA3.1-HBcNheⅠSpeⅠ,并通过酶切、PCR及测序对该质粒加以鉴定。为了证实质粒pcDNA3.1-HBcNheⅠSpeⅠ作为表达载体的可行性,实验中以GFP为报告基因,利用基因重组技术在该质粒的基础上构建了真核表达质粒pcDNA3.1-HBc-GFP,并将其转染HeLa细胞,共聚焦显微镜观察HeLa细胞内绿色荧光蛋白的表达情况。同时将质粒pcDNA3.1-HBc-GFP转化大肠杆菌JM109,密度梯度离心回收并纯化其表达产物HBcAg-GFP,电镜下观察其成颗粒性。结果酶切、PCR及测序结果均与预期结果相符,共聚焦显微镜下观察到HeLa细胞内绿色荧光蛋白的成功表达。电镜下观察到重组蛋白HBcAg-GFP为颗粒性蛋白。结论成功构建了真核表达载体pcDNA3.1-HBcNheⅠSpeⅠ,该载体可作为治疗性及预防性DNA疫苗的候选载体,为深入研究预防性及治疗性表位疫苗提供了资料。
- 陈佳玉李景利李凡
- 关键词：免疫反应表位疫苗
- 乙肝核心抗原为载体进行HCV治疗性疫苗的实验研究
- 2007年
- 目的以乙肝核心抗原为载体进行HCVT表位的表达,并对表达产物进行免疫原性分析。方法利用DNA重组技术将HCVT表位(131-140aa)插入HBcAgel-loop处,构建病毒颗粒样抗原表达载体pTrc-core-HCV(T),并在JM109中进行表达,蔗糖密度梯度离心提取纯化表达产物HBcAg-T,该蛋白经免疫原性检测、纯度分析及定量后,以pTrc-core表达产物HBcAg作对照免疫Balb/C鼠。适时进行抑瘤实验、HBcAb检测、流式细胞仪进行T细胞分类,以观察HBcAg-T的免疫原性。结果抑瘤实验中HBcAg-T免疫组小鼠仅形成一个瘤块,数量和大小均低于对照组,ELISA结果显示HBcAg-T免疫组HBcAb滴度相似于HBcAg免疫组,流式散点图显示HBcAg-T免疫组CD8+T细胞所占比例明显增高。结论HBcAg-T诱导出高水平的细胞免疫应答,可作为HCV治疗性疫苗的候选。该实验为HCV治疗性疫苗的成功研制奠定了基础。
- 陈佳玉李景利李凡
- 关键词：丙型肝炎T细胞表位免疫反应
- 阴沟肠杆菌ESBLs、AmpC酶和AmpC酶基因型的检测及耐药性分析被引量：3
- 2010年
- 目的探讨阴沟肠杆菌ESBLs和AmpC酶的产生情况、AmpC酶的耐药基因型及对常用抗菌药物的耐药特征,为临床治疗提供选药参考。方法采用VITEK-60型全自动细菌鉴定仪鉴定细菌,按美国临床实验室标准化委员会(CLSI)推荐的确证试验检测超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)和K-B纸片法测定药敏结果;采用头孢西丁纸片扩散法筛选疑产AmpC酶阳性菌株,并通过酶粗提物头孢西丁三维试验、接合试验、PCR测序等实验分析该菌株的基因型。结果 157株阴沟肠杆菌ESBLs和AmpC酶总检出率分别为31.21%和32.48%,其中,单产AmpC酶、同产AmpC酶+ESBLs、单产ESBLs检出率分别为17.20%、7.64%和23.57%;AmpC酶阳性菌株的耐药基因型:30株为DHA型,9株为CIT型。产酶株的耐药性明显高于非产酶株,耐药现象在同产AmpC酶和ESBLs菌株中更为严重,产与非产AmpC酶(和)ESBLs菌株对亚胺培南的敏感率几乎达100%。结论台州地区阴沟肠杆菌产ESBLs和AmpC酶菌株检出率较高,AmpC酶以DHA-1基因型为主。产AmpC酶和ESBLs的菌株呈高度耐药,限制β-内酰胺类抗菌药物的应用是减少产酶株流行的重要措施。
- 林平陈佳玉
- 关键词：阴沟肠杆菌AMPC酶ESBLS基因型耐药性
- 细胞周期素G在鼻咽癌细胞中的表达及其意义被引量：2
- 2010年
- 目的:探讨鼻咽癌细胞中细胞周期蛋白G1(cyclin G1)、细胞周期蛋白G2(cyclin G2)基因的表达及其意义。方法:利用细胞培养技术、免疫荧光技术检测并分析不同分化程度的鼻咽癌细胞株HNE2(B010)、CNE1(B003)中cyclinG1、cyclin G2的表达情况,逆转录聚合酶链反应技术(RT-RCR)检测HNE2、CNE1中cyclin G1-mRNA、cyclin G2-mR-NA的表达水平。结果:cyclin G1蛋白在HNE2、CNE1呈现弱阳性表达,染色较弱,cyclin G2蛋白在HNE2、CNE1呈现强阳性表达,在靠近细胞膜的细胞质中染色较强,连续且均匀一致。HNE2中cyclin G1mRNA的表达水平(2.097±0.262)明显高于CNE1(0.997±0.286,P<0.01),HNE2中cyclin G2mRNA的表达水平(0.708±0.107)明显低于CNE1(1.216±0.037,P<0.01)。结论:细胞周期素G表达水平与鼻咽癌分化程度密切相关,可作为鼻咽癌恶性程度及发生、发展的指标之一。
- 叶星星蔡志毅陈佳玉刘池波陶宝鸿
- 关键词：鼻咽癌细胞培养免疫荧光逆转录聚合酶链反应
- 高等医学院校医学检验实验系列教材编写的尝试与思考被引量：2
- 2010年
- 赵传昌陈佳玉周军
- 关键词：实验教材实验教学质量高等医学院校
- 乙型肝炎核心抗原为载体进行丙型肝炎混合性治疗疫苗的实验被引量：3
- 2007年
- 目的以HBcAg为载体进行丙型肝炎混合性治疗疫苗的实验研究。方法利用DNA重组技术将HCV T表位(131～140位氨基酸)和(1 445～1 453位氨基酸)分别插入HBcAg el-loop处,构建病毒颗粒样抗原表达载体pTrc-core-T1和pTrc-core-T2,并在大肠埃希菌DH5α中表达,蔗糖密度梯度离心提取纯化表达产物HBcAg-T1和HBcAg-T2。以T1和T2表位肽混合物、HBcAg- T1和HBcAg-T2混合蛋白免疫Balb/C小鼠,并设空白对照,适时行抑瘤实验;流式细胞仪检测CD4^+、CD8^+、IL-4及IFN-γ、IL-5,ELISA法检测IL-12;并行细胞杀伤实验,以观察混合蛋白的免疫原性。结果PCR法鉴定质粒pTrc-core-T1和pTrc-core-T2正确。抑瘤实验中HBcAg-T1和HBcAg-T2混合蛋白免疫组仅1只小鼠形成瘤块,直径0.1 cm,低于对照组的平均直径1.3 cm、T1T2混合肽免疫组的0.9 cm;混合蛋白免疫组脾细胞内CD8^+T细胞占(20.21±2.01)%,高于混合肽免疫组的(15.33±1.45)%和空白对照组的(5.09±1.66)%(P<0.01);3组内脾细胞内IFN-γ阳性细胞百分比分别为(1.58±0.05)%、(0.88±0.02)%和(0.53±0.03)%(P<0.01);血清中IL-5较混合表位肽组有所下降(P<0.01);而ELISA检测混合蛋白组IL-12高于T1T2混合表位肽免疫组;混合蛋白免疫组小鼠HCV特异细胞毒性T淋巴细胞(CTL)活性明显高于T1T2混合表位肽免疫组(P<0.01)。结论HBcAg-T1和HBcAg-T2混合蛋白诱导出高水平的细胞免疫应答,可作为HCV治疗性疫苗的候选。
- 陈佳玉李凡
- 关键词：肝炎丙型肝炎核心抗原乙型
- 医学实验动物学开放式实验教学模式的探索与实践被引量：3
- 2014年
- 开放式实验教学可以充分调动学生的学习兴趣,激发学生勇于开拓创新的能动性,发掘不同层次学生的潜质,提高了学生的综合实验素质。采用开放式实验教学方法为临床培养应用型人才是完全可行的。
- 陈佳玉
- 关键词：实验动物学教学模式开放式实验教学
- Polysaccharide from celery inhibits lung cancer growth by increasing immune response and ECRG4 expression
- Celery is plant of Apiaceae family that has been shown to play anti-tumor properties in several tumor models.H...
- 刘池波陈佳玉金晓燕杨林军
- 文献传递
