颜丕熙
- 作品数：16 被引量：215H指数：6
- 供职机构：中国农业科学院上海兽医研究所更多>>
- 发文基金：上海市浦江人才计划项目中央级公益性科研院所基本科研业务费专项资金项目国际科技合作与交流专项项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 一种鸭黄病毒及其疫苗、试剂盒
- 本发明属于生物工程领域，公开了一种鸭黄病毒，其囊膜蛋白E的氨基酸序列如SEQ ID NO：4所示或者与SEQ ID NO：4所示的氨基酸序列的同源性在98％以上。本发明还公开了一种用于预防上述的鸭黄病毒的疫苗，还公开了一...
- 李泽君颜丕熙闫丽萍滕巧泱
- 文献传递
- 鸭坦布苏病毒分离鉴定及其生物学特性的研究
- 2010年以来，中国大陆爆发了一种由未知病原引起的以雏鸭生长迟缓和死亡、蛋鸭产蛋下降为特征的传染性疫病。该病首先发现于江浙沪地区，之后迅速蔓延至中国东南部各省市，其中包括山东、北京、河北、福建、安徽、广东和广西等。即便在...
- 颜丕熙
- 关键词：生物学特性
- 一种新的黄病毒导致蛋鸭产蛋下降及死亡被引量：134
- 2010年
- 为探求2010年在上海、浙江和江苏等地鸭群出现产蛋下降甚至停止的发病原因,对浙江省4个发病鸭场发病鸭进行病理剖检以及病毒的PCR鉴定。解剖病鸭发现其脾脏肿大明显,肝脏有针尖状白色点状坏死。进一步的病理学变化分析发现病鸭的肝脏呈现程度不一的脂肪变性和空泡变性,肝细胞呈现局灶性溶解,脾细胞坏死。采集临床发病鸭的脾脏,提取总RNA,用随机引物进行反转录,然后用多种病毒的特异性引物进行PCR鉴定。结果显示,4个鸭场的病料呈鸭黄病毒PCR阳性,其他病毒呈阴性,说明这些鸭场均感染了鸭黄病毒,此病毒在浙江省已广泛流行。
- 滕巧泱颜丕熙张旭闫丽萍李泽君
- 关键词：蛋鸭产蛋下降黄病毒PCR病理
- 表达3个外源基因真核表达载体的构建被引量：5
- 2011年
- 为构建可以同时表达3个外源基因的真核表达载体,本实验以pCAGGs载体为骨架,引入SV40启动子及单疱疹病毒(HSV)TK基因的polyA序列,并且在β-actin启动子下游插入内部核糖体进入位点序列(IRES),构建了能够同时表达3个外源基因的真核表达质粒pCAGGs-IRES。本研究将PR8流感病毒的M基因、绿色荧光蛋白基因EGFP及H1N1猪流感病毒的HA基因,分别克隆于pCAGGs-IRES载体的3个启动子下游,转染细胞后,通过间接免疫荧光和western blot表明本实验构建的pCAGGs-IRES载体能同时表达3个外源基因。该载体有望为基因疫苗、基因操作及蛋白质相互作用等研究提供新的真核表达载体。
- 张树梅黄海碧滕巧泱闫丽萍颜丕熙徐大伟戴晓光张旭呼和巴特尔李泽君
- 关键词：基因表达
- 鸭坦布苏病毒E蛋白的原核表达被引量：9
- 2012年
- 本研究利用RT-PCR方法扩增鸭坦布苏病毒(Duck tembusu virus,DTMUV)奉贤株(FX2010)的结构蛋白E基因,并将其克隆至原核表达载体pET32a(+),构建重组表达质粒pET32a-E。将其转化受体菌E.coli BL21(DE3)感受态细胞,经IPTG诱导进行表达。SDS-PAGE和Western blot试验检测结果表明,E基因在大肠杆菌中得到了表达,并且可与抗DTMUV的多克隆抗体发生特异性反应。E基因的成功表达为DTMUV的诊断试剂盒、疫苗等的研制奠定基础。
- 姬希文李雪松边延峰李国新颜丕熙张七斤李泽君
- 关键词：E基因克隆
- 鸭坦布苏病毒E蛋白中和性单克隆杭体的制备被引量：9
- 2012年
- 本试验利用纯化的鸭坦布苏病毒(Duck Tembusu virus , DTMUV)奉贤株(FX2010)免疫BALB/c小鼠,通过淋巴细胞杂交瘤技术,筛选获得3株能够稳定分泌杭DTMUV的杂交瘤细胞,分别命名为:J1-E5-E4, 7B5和1E5-B6,3株杂交瘤细胞诱导同品系刁、鼠的杭体效价为1:12 800,1:6 400和1:25 600。间接ELISA和IFA结果显示,3株单杭均可以与DTMUV发生特异性反应。进一步研究发现,J1-E5-E4可以与DTMUV-E蛋白结合,使得表达E蛋白的293T细胞显现出特异性的绿色荧光;在病毒中和试验中,J1-E5-E4可以中和DTMUV,使其失去致死鸡胚的能力。这些结果表明,J1-E5-E4是一株针对DTMUV-E蛋白中和表位的单杭,该单杭将在DTMUV诊断和杭原分析中发挥重要作用。
- 姬希文李雪松李国新肖亚莉颜丕熙徐大伟范钊张七斤李泽君
- 关键词：E蛋白单克隆抗体
- 鸭坦布苏病毒在鸡胚成纤维细胞上的传代致弱研究
- 自2010年鸭坦布苏病毒病在中国发生以来,该病给我国的养鸭产业造成了巨大的经济损失.目前,仍没有有效的措施预防和控制该病的发生和流行.为了获得鸭坦布苏病毒的弱毒株,我们把鸭坦布苏病毒强毒株FX2010在鸡胚成纤维细胞(C...
- 李国新吴晓刚颜丕熙闫丽萍滕巧泱童光志李泽君高旭元肖亚莉刘绍琼彭珊李雪松石迎张月娥余磊
- 一种新兴黄病毒导致蛋鸭产蛋下降及死亡
- 蛋鸭产蛋下降是2010年出现的一种由黄病毒引起的传染性非常强的疾病。对浙江省四个鸭场发病鸭进行调查发现，均出现产蛋下降甚至停止，且有5-10％的死亡。解剖结果发现，脾脏肿大明显;肝脏有针尖状白色点状坏死。微显病理学变化分...
- 滕巧泱颜丕熙张旭闫丽萍李泽君
- 关键词：蛋鸭产蛋下降黄病毒
- 应用套式RT-PCR快速检测鸭坦布苏病毒被引量：52
- 2011年
- 鸭坦布苏病毒是新发现的一种可引起鸭产蛋下降、生长迟缓和死亡的黄病毒。目前尚无可靠的快速诊断方法用于该病毒的检测。本研究根据鸭坦布苏病毒E基因序列,设计了2对重叠引物P1、P2和P3、P4,建立了检测鸭坦布苏病毒的套式RT-PCR方法,该套式RT-PCR比一般PCR敏感性高10倍。采用该方法对安徽省、河北省、山东省、浙江省、上海市等地发病鸭场的63份样品进行了检测,阳性检出率为48/63(76.2%),而病毒分离率仅为13/63(20.6%)。由此表明,与其他方法相比较,本试验所建立的套式RT-PCR方法具有快速、敏感、特异优点,可用于鸭坦布苏病毒的流行病学调查及病毒的检测。
- 颜丕熙李国新吴晓刚闫丽萍滕巧泱李泽君
- 关键词：套式RT-PCR
- 一种鸭黄病毒及其疫苗、试剂盒
- 本发明属于生物工程领域，公开了一种鸭黄病毒，其囊膜蛋白E的氨基酸序列如SEQ ID NO：4所示或者与SEQ ID NO：4所示的氨基酸序列的同源性在98％以上。本发明还公开了一种用于预防上述的鸭黄病毒的疫苗，还公开了一...
- 李泽君颜丕熙闫丽萍滕巧泱
- 文献传递
