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黄秀芬: 作品数：23 被引量：59H指数：4; 供职机构：北京市农林科学院畜牧兽医研究所更多>>; 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划国家现代农业产业技术体系建设项目更多>>; 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>

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沙门氏菌鞭毛佐剂禽流感灭活疫苗可诱导良好免疫保护: 本研究利用物理纯化的沙门氏菌鞭毛作为黏膜疫苗佐剂，包裹经灭活的禽流感病毒(H9N2亚型)抗原，以此制备禽流感(H9N2亚型)灭活疫苗，然后通过免疫保护试验测定了此疫苗的保护效果。攻毒保护试验结果表明，经肌肉注射免疫的鞭毛...; 黄秀芬章振华孙惠铃孙盈陈小铃李永清; 关键词：禽流感病毒灭活疫苗免疫保护; 文献传递

抗牛传染性鼻气管炎病毒囊膜gD糖蛋白的单链抗体在昆虫细胞中表达及活性检测被引量：4: 2017年; 为了获得具有生物学活性的牛传染性鼻气管炎病毒(infectious bovine rhinotracheitis virus,IBRV)gD蛋白特异性单链抗体,试验采用PCR方法扩增杂交瘤细胞的cDNA单链抗体重链可变区(VH)和轻链可变区(VL)基因,通过重叠延伸PCR及Linker序列获得完整的单链抗体基因,将单链抗体基因克隆至杆状病毒载体pFB-LICBse中,构建重组转移载体pFB-VH-VL,将其转化至大肠杆菌DH10Bac感受态细胞中制备重组杆粒rBacmid-VHVL,将重组杆粒rBacmid-VH-VL转染至Sf9细胞中获得携带单链抗体基因的重组杆状病毒。该重组杆状病毒在Sf9细胞中表达了分子质量约为30ku的单链抗体蛋白。Western blotting结果显示,重组单链抗体蛋白能被His标签抗体特异性结合,也能特异性结合gD蛋白。间接免疫荧光试验结果显示,该单链抗体蛋白能够识别感染牛肾细胞MDBK中的IBRV。本研究在昆虫细胞中成功表达了具有识别IBRV的gD蛋白特异性单链抗体,为牛传染性鼻气管炎的诊断与治疗奠定了基础。; 吴靖许健黄秀芬沈俊俊何后军李永清; 关键词：牛传染性鼻气管炎病毒单链抗体杆状病毒表达系统

表达鸡补体因子C3d基因多克隆抗体的制备及应用: 引言C3d分子是补体活化过程中C3的一个最小裂解片段,可以与B细胞表面受体CR2/CD21结合,各项研究已经证实其免疫佐剂的功能[1,3],但对于鸡C3d蛋白结构及其单体对机体免疫系统的影响仍缺少研究。本研究通过构建原核...; 闫敏鑫刘杉杉黄秀芬陈小玲李永清

奶牛场爆发冬痢的诊治报告被引量：1: 2016年; 针对奶牛场大规模爆发水样腹泻的情况,选择发病牛的直肠粪便进行细菌的分离培养、运动力试验,并以扩增弯曲菌属的多重PCR进行检测和鉴定。结果表明:该疫情是以弯曲菌属细菌为主要病原的奶牛冬痢,然后在药敏试验结果的基础上采取了针对性的治疗,使疫情迅速得到了控制。; 徐福洲王天坤孙宝山姚学军黄秀芬李永清; 关键词：奶牛冬痢弯曲菌多重PCR检测

牛疱疹病毒1型gE基因在杆状病毒表达系统pFB-LIC-Bse内的表达: 为获得具有生物活性的牛疱疹病毒1型(BHV-1)病毒囊膜糖蛋白gE,采用PCR方法从BHV-1感染的牛肾细胞全基因组中扩增出约1.5 kb的gE基因片段,再将gE基因克隆到新型杆状病毒载体pFastBac-L1C-Bse...; 黄秀芬姜良王天坤张林波李永清; 关键词：囊膜糖蛋白杆状病毒表达系统基因表达; 文献传递

表达鸡补体因子C3d基因重组杆状病毒的构建及初步应用被引量：2: 2015年; 为研制鸡体内补体因子C3d抗体的检测方法,采用RT-PCR方法从鸡肝脏组织细胞的总RNA中扩增出1 002bp的鸡补体因子C3d基因全长,然后将其克隆到杆状病毒载体pFB-LIC-Bse中获得重组质粒pFB-C3d。将pFB-C3d转化到带有杆状病毒基因组的DH10Bac感受态细胞中,制备重组杆粒rBacmid-C3d。再将该重组杆粒转染到昆虫细胞sf9中,通过病毒拯救技术构建携带C3d基因的重组杆状病毒。Western blot试验结果表明,重组杆状病毒能在昆虫细胞sf9中表达出大小约为35 000的C3d-his融合蛋白。以该融合蛋白作为抗原建立的Western blot和间接免疫荧光试验(IFA)显示,经C3d-M2-GST融合蛋白免疫的鸡血清能够与杆状病毒表达的C3d结合,说明本研究构建的重组杆状病毒可以用来检测C3d作为分子佐剂及其融合蛋白免疫鸡后产生针对C3d自身的抗体,为今后建立体内C3d水平监测的指示系统奠定基础。; 孙盈闫敏鑫黄秀芬孔瑞丽黄金海李永清; 关键词：重组杆状病毒蛋白表达

鸡补体C3d抗血清的制备与应用: 2015年; 为探讨补体因子C3d在家禽健康诊断中的意义,将鸡补体因子C3d全长基因克隆到原核表达载体pET28a中构建重组表达质粒pET28a-C3d,然后将pET28a-C3d转化到大肠埃希菌BL21(DE3)并以IPTG诱导表达。表达产物采用氯化钾染色切胶法进行纯化,获得分子质量约35ku的C3d目的蛋白。将所得蛋白与弗氏佐剂制备疫苗免疫小鼠,制备抗鸡补体因子C3d血清。用制备的血清与重组杆状病毒表达的C3d蛋白进行Western blot和间接免疫荧光(IFA)鉴定血清的特异性。进一步应用该血清对不同健康状态的鸡血清进行C3d相关补体成份相对含量的检测。结果鸡补体因子C3d在大肠埃希菌中成功表达,纯化的C3d蛋白免疫小鼠后制备的抗血清经ELISA检测抗体效价达1∶256 000。Western blot和IFA结果显示,该血清能与重组杆状病毒表达的C3d蛋白发生特异性反应。临床应用试验表明,该血清不仅能用于检测不同健康状态鸡血浆中C3d的表达状况,还能用于ELISA检测不同鸡血清中C3d相关补体成分的相对含量差异。研究还证实鸡血浆中C3d相关补体成分的表达因机体免疫状态不同而存在差异,结果为了解C3d与鸡体健康状况之间的关系提供了依据。; 闫敏鑫黄秀芬任慧英刘杉杉姜良李永清; 关键词：原核表达蛋白纯化抗血清免疫学指标

沙门氏菌鞭毛佐剂禽流感灭活疫苗可诱导良好免疫保护: <正>禽流感病毒是一种广泛存在于禽类中的呼吸道病毒,尤其是H9N2亚型禽流感病毒,几乎所有的家禽、水禽及飞鸟均能感染。当前,为了防控该病的暴发,各地均使用了疫苗对受威胁的家禽进行免疫接种。然而,由于该病毒表面抗原(血凝素...; 黄秀芬章振华孙惠铃孙盈陈小铃李永清; 文献传递

Isolation and Identification of Salmonella pullorum: 2012年; [Objective] The paper was to explore the cause of disease with symptoms of swelling joint, blanc-loose stool and few deaths, so as to provide suggestions and effective measures for diagnosis and control of the disease in chicken farm. [Method] The diseased chick samples were collected for bacteriological examination. Through bacterial isolation culture, PCR identification, biochemical test and animal test, 5 strains of S. pullorum were identified. [Result] When the isolates were inoculated into SPF chicks, the same disease cases with natural infection could be reproduced. [Conclusion] S. pullorum is the major cause of the disease in chicken farm.; 安辉张大华陈小玲徐福洲贺云霞黄秀芬李桂萍孙惠玲

副猪嗜血杆菌15个血清型标准分离株对小鼠毒力的研究被引量：10: 2011年; 为了确定Balb/c小鼠是否适合作为副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis,HPS)的试验动物模型,试验用1～15血清型HPS标准菌株感染Balb/c小鼠,每只小鼠接种量为1.0×109 cfu。结果表明:用血清型1,2,5,10,12,13,14接种的5只小鼠均死亡4只,用血清型4,15接种的5只小鼠分别死亡2,3只,用血清型3,6,7,8,9,11接种的5只小鼠均没有死亡;各血清型的毒力与猪体试验的结果基本相符。说明Balb/c小鼠适合作为副猪嗜血杆菌的试验动物模型。; 贺云霞徐慧叶飞孙慧玲王宏俊龚玉梅张莉黄秀芬张培君; 关键词：副猪嗜血杆菌标准菌株小鼠毒力

黄秀芬

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