丁建刚
- 作品数：6 被引量：26H指数：3
- 供职机构：西南农业大学园艺园林学院更多>>
- 发文基金：重庆市应用基础研究项目国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 结球甘蓝下胚轴高效植株再生系统的研究被引量：10
- 2003年
- 研究不同取材时期以及不同浓度 BA+NAA的组合和不同浓度 Ag NO3 对结球甘蓝 (Brassica olerace var.capitata L.)下胚轴的不定芽分化率的影响 ,建立了结球甘蓝下胚轴高效植株再生系统 ,离体培养再生频率达到76 %。最佳取材时期为 6、7日苗龄 ,BA、NAA、Ag NO3 的最佳浓度配比为 BA5 .0 mg/ L+NAA1.0 mg/ L+Ag NO37.5 mg/ L。
- 丁建刚李成琼宋洪元
- 关键词：结球甘蓝下胚轴植株再生系统
- 人工雄性不育基因及恢复基因表达载体的构建被引量：3
- 2004年
- 结合Cre/loxp定位重组系统和杂种一代的育种特点,构建了雄性不育基因表达载体pCABARTABn和相应的恢复基因表达载体pBINPLUSCre。将位于质粒pTTABn中的雄性不育基因表达盒(含TA29启动子、barnase基因及Nos终止子)切下插入中间克隆载体pGloxp2个同向lox位点之间,再将上述表达盒连同lox位点切下插入pCAMBar,获得以除草剂Basta为筛选剂的雄性不育基因表达载体pCABARTABn。PCR方法从溶原菌BM25.8基因组DNA扩增出Cre基因,克隆测序验证无误后插入PBI525CaMV35S-35S双启动子和Nos终止子之间,再将表达盒切下插入pBINPLUS质粒相应位点,得到恢复基因植物表达载体pBINPLUSCre。
- 宋洪元丁建刚曹必好雷建军宋明
- 关键词：雄性不育基因恢复基因表达载体构建
- 致雄性不育基因—反义肌动蛋白基因和核糖核酸酶基因（Barnase）导入甘蓝的研究
- 近几年来，随着分子生物学的发展，使利用基因工程技术创制雄性不育系成为可能。由于利用基因工程技术可以在较短的时间内创制雄性不育系以及相应恢复系，在一种作物上获得突破后，其应用可以迅速涵盖于其他作物。因而，近年来该技术在植物...
- 丁建刚
- 文献传递
- 中国结球甘蓝雄性不育研究进展被引量：7
- 2003年
- 本文从常规选育结球甘蓝雄性不育系和利用分子生物学技术将雄性不育基因转入甘蓝获得雄性不育植株两个方面综述了中国结球甘蓝雄性不育的研究进展 。
- 丁建刚李成琼宋洪元
- 关键词：结球甘蓝雄性不育分子生物学技术
- 核糖核酸酶barnase基因的克隆策略研究被引量：3
- 2005年
- 比较了目前报道的两种克隆barnase基因的方法——barnase基因的单独克隆和barstar抑制剂基因保护下的barnase基因克隆.分别利用4种质粒进行barnase基因的单独克隆时,得到的阳性克隆数量少.对其中15个阳性克隆进行了测序分析,结果有5个克隆出现碱基缺失,1个克隆出现碱基增加,其余9个克隆则出现氨基酸突变,均未得到氨基酸序列完全正确的克隆.进一步分析表明这些突变的位点大多直接与保持barnase蛋白的活性位点相关.而在克隆barnase基因之前,预先将barstar基因连同其自身启动子加载于待克隆载体上,随后再进行barnase基因克隆时则容易得到与报道的barnase基因序列完全一致的阳性克隆.分析认为由于barnase基因单独存在时有一定数量的蛋白表达,宿主菌大肠杆菌无法忍受而通过某种方式造成其barnase发生相应突变而无法实现barnase基因的单独克隆.因此有必要利用barstar基因的保护来进行barnase基因相应的克隆和遗传操作.
- 宋洪元曹必好丁建刚雷建军宋明
