于珊珊
- 作品数：13 被引量：76H指数：6
- 供职机构：长春中医药大学吉林省人参科学研究院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金吉林省科技发展计划基金公益性行业科研专项更多>>
- 相关领域：医药卫生理学生物学更多>>
- 人参果提取物对H_2O_2诱导人脐静脉内皮ECV304细胞损伤的保护作用被引量：3
- 2015年
- 目的:研究人参果提取物对过氧化氢(H2O2)诱导人脐静脉内皮细胞(ECV304细胞)损伤的保护作用。方法:体外培养的ECV304细胞随机均分为正常对照(常规培养液)组、模型(常规培养液)组与人参果提取物1、2、3、4(10、20、40、80μg/ml)组,给予相应药物培养ECV304细胞24 h后,用H2O2(0.3 mmol/L)培养ECV304细胞4 h以复制细胞氧化损伤模型;采用MTT法检测细胞活力以筛选最适质量浓度。体外培养的ECV304细胞随机均分为正常对照(常规培养液)组、模型(常规培养液)组与人参果提取物(80μg/ml)组,给予相应药物培养ECV304细胞24 h后同上复制细胞氧化损伤模型。采用HE染色观察细胞形态;采用流式细胞仪测定细胞周期;检测丙二醛(MDA)含量和乳酸脱氢酶(LDH)、超氧化物歧化酶(SOD)活性。结果:人参果提取物最适给药质量浓度为80μg/ml。与正常对照组比较,模型组细胞部分皱缩,边缘模糊,细胞有融合现象;细胞活力减弱;G1期细胞比例升高,S期和G2期细胞比例降低;SOD活性减弱,MDA含量增加,LDH活性增强,差异有统计学意义(P<0.01)。与模型组比较,人参果提取物组细胞损伤程度减轻;G1期细胞进入S期和G2期的细胞比例升高,G1期细胞比例降低,S期细胞比例升高;SOD活性增强,MDA含量减少,LDH活性减弱,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:人参果提取物对H2O2损伤的ECV304细胞具有保护作用,其机制可能与加快细胞周期进程、抗氧化作用有关。
- 李晶越皓李娜于珊珊戴雨霖郑飞刘淑莹
- 关键词：人参果人脐静脉内皮细胞
- 优眠宁神口服液提取与澄清工艺的优化被引量：2
- 2015年
- 目的:优选优眠宁神口服液的提取与澄清工艺,为该制剂的开发研究提供依据。方法:以五味子醇甲含量为考察指标,以加水量、提取时间及提取次数为考察因素,采用正交试验优选提取工艺;以五味子醇甲含量、澄清度为指标,采用单因素法从离心法、超滤法(无机陶瓷膜)、醇沉法和壳聚糖法中筛选提取液的最优澄清工艺;对优选工艺进行中试结果验证。结果:最优提取工艺为6倍量水提取2次,每次2 h,3批提取液中五味子醇甲平均含量为3.537 mg/g(RSD=1.68%,n=3);最优澄清工艺为采用无机陶瓷膜的超滤法。验证试验中3批中试产品澄明,成品率接近,分别为72.33%、76.67%、81.00%(RSD=5.65%,n=3)。结论:优化的工艺稳定、可行,适合工业化生产优眠宁神口服液。
- 郑飞于珊珊戴雨霖李晶越皓刘淑莹
- 关键词：五味子醇甲正交试验超滤法
- 改善睡眠口服液质量标准研究被引量：2
- 2014年
- 目的建立改善睡眠口服液的质量标准。方法采用薄层色谱法对酒制五味子及红参进行薄层鉴别,采用高效液相色谱法测定五味子醇甲的含量,紫外分光光度法测定人参总皂苷的含量;同时对p H值、相对密度等进行检查。结果薄层鉴别斑点清晰,阴性无干扰;五味子醇甲在浓度为0.180 2-0.485 6 mg范围内呈良好线性关系,平均回收率为100.19%;总皂苷在浓度为0.080 8-0.242 4 mg/m L范围内呈良好线性关系,平均回收率为101.35%。结论本方法简便可行,灵敏度高,可用于改善睡眠口服液的质量控制。
- 郑飞于珊珊越皓刘淑莹
- 关键词：薄层色谱法高效液相色谱法
- 嗜热β-葡萄糖苷酶的原核表达、纯化及其活性被引量：2
- 2014年
- 目的原核表达、纯化嗜热β-葡萄糖苷酶,并检测其活性。方法从嗜热细菌Fervidobacterium pennivorans基因组DNA中PCR扩增β-葡萄糖苷酶基因,插入原核表达载体p ET-28a中,构建重组表达质粒,转化E.coli BL21(DE3)Codon Plus,筛选阳性重组菌,IPTG诱导表达。采用镍柱亲和层析法纯化重组酶;紫外吸收法检测酶活力和底物选择性。结果 PCR退火温度为67℃时,可扩增得到单一的目的基因条带;测序结果显示,重组表达质粒中目的基因的核苷酸序列与细菌基因组中该基因序列同源性为100%,未发现终止密码子及氨基酸的改变;表达的重组酶相对分子质量约为54 000;纯化的目的蛋白纯度达95%,浓度为10 mg/L;该重组酶能够高效催化对硝基苯-β-D-葡萄糖苷(p NPG)的水解,60℃条件下的比活力达124 293.5 U/mg。结论成功在E.coli中表达了嗜热细菌Fervidobacterium pennivorans来源的具有较高催化活力和底物专一性的β-葡萄糖苷酶。
- 王馨莹冯丽许春春于珊珊
- 关键词：嗜热细菌Β-葡萄糖苷酶原核细胞酶活性
- 嗜热糖苷酶Fpendo5A转化绞股蓝皂苷XLIX的产物鉴定及分离纯化被引量：6
- 2017年
- 目的对嗜热糖苷酶Fpendo5A转化绞股蓝皂苷XLIX的产物进行鉴定及分离纯化。方法应用Fpendo5A酶转化绞股蓝皂苷XLIX,通过高效液相色谱法(HPLC)和快速分离液相色谱-四极杆-飞行时间质谱法(rapid resolution liquid chromatography-quadrupole-time of flight-mass spectrometry/mass spectrometry,RRLC-Q-TOF MS/MS)对转化产物进行鉴定,全制备型高效液相色谱对转化产物进行分离纯化。结果在65℃和p H 6.0条件下,利用Fpendo5A酶转化绞股蓝皂苷XLIX 48 h后,获得单一转化产物,该酶能够水解绞股蓝皂苷XLIX的C20位葡萄糖苷键,生成长梗绞股蓝皂苷Ⅰ。纯化后的转化产物纯度达95.42%,产率为21.6%。结论利用Fpendo5A酶能够成功转化绞股蓝皂苷XLIX,纯化后的绞股蓝皂苷转化产物纯度好,产率高,为今后的药理活性及相关基础研究奠定了基础。
- 于渤浩李男赵幻希李晶郑飞戴雨霖李卓刘淑莹于珊珊
- 关键词：绞股蓝皂苷高效液相色谱法
- 重组嗜热β-葡萄糖苷酶转化稀有人参皂苷Rd和CK被引量：8
- 2016年
- 利用高效液相色谱(HPLC)法,对重组嗜热β-葡萄糖苷酶(Fpglu1)转化稀有人参皂苷(Rd和CK)进行研究,并表征了其催化动力学参数.利用同源模建和分子动力学模拟等生物信息学技术,探究了Fpglu1转化人参皂苷的结构基础及其相互作用.结果表明,Fpglu1能够水解人参总皂苷生成稀有皂苷Rd和CK,其催化人参皂苷Rb_1,Rb_2和Rc的K_m值分别为0.318,1.840和5.269 mmol/L;酶的转换数(k_(cat))值分别为144.191,0.572和0.011 s^(-1).当转化时间分别为6和102 h时,Rd和CK的产率达到最大,分别为60%和93%.通过对该酶的结构预测及皂苷分子的对接研究发现,底物位于由疏水性氨基酸构成的底物口袋中,氨基酸残基Glu194和Glu367是参与催化作用的关键,且实验测得的酶促反应动力学参数(K_m)与对接的相互作用能量值存在线性关系.
- 许春春于渤浩王红蕾李晶刘淑莹于珊珊
- 关键词：Β-葡萄糖苷酶生物转化
- 超嗜热糖苷酶突变体及其在人参皂苷CK制备中的应用
- 本发明涉及一种超嗜热糖苷酶突变体及其在人参皂苷CK制备中的应用，属于生物技术工程技术领域。超嗜热糖苷酶突变体的氨基酸序列如SEQ ID NO：2所述，超嗜热糖苷酶突变体在制备稀有人参皂苷CK的应用。超嗜热糖苷酶突变体，具...
- 于珊珊刘淑莹李晶郑飞许春春
- RRLC-Q-TOF MS/MS法分析生晒参和大力参中的皂苷类成分被引量：15
- 2014年
- 利用高分离度快速液相色谱与四极杆-飞行时间质谱(RRLC-Q-TOF MS/MS)联用,对生晒参和大力参中的人参皂苷类成分进行比较研究。基于人参皂苷Rd和Re、Rf和Rg1两组同分异构体在串联质谱中的裂解规律,以及mRd的串联质谱特征,通过标准品保留时间和精确分子质量鉴定了人参中的35种人参皂苷,进而比较了生晒参和大力参中人参皂苷的相对百分含量差异,并于大力参中检测到稀有人参皂苷,如人参皂苷Rg5、Rk1、F4、Rg6等。该方法对于大力参类传统中药炮制品的成分研究具有借鉴意义,研究结果能说明大力参区别于生晒参的物质基础,可以为大力参在临床上合理、有效地使用提供指导。
- 郝颖于珊珊戴雨霖张颖钟薇刘淑莹越皓
- 关键词：生晒参人参皂苷MS
- 葛花中异黄酮类化学成分的RRLC-Q-TOF MS/MS研究被引量：18
- 2014年
- 采用快速分离液相色谱-四极杆-飞行时间质谱联用(RRLC-Q-TOF MS/MS)技术对葛花中的异黄酮类成分进行了研究,得到了相应化合物的保留时间、分子量及结构信息.研究结果表明,葛花水提取液的主要成分为异黄酮类及其苷类化合物,并含有皂苷类和酚类化合物.在葛花中首次发现同属植物狐尾葛特有化合物Alopecuroides A和葛根中的化合物3'-甲氧基大豆苷元-7-O-甲醚.讨论了异黄酮类化合物的质谱碎裂途径及规律.
- 戴雨霖于珊珊张颖郝颖钟薇越皓刘淑莹
- 关键词：葛花异黄酮
- 人参皂苷的口服吸收及体内转化被引量：8
- 2014年
- 人参中的活性成分人参皂苷具有较好的生物活性和药理作用,疗效确切,毒副作用小,应用广泛,然而其易被胃酸分解、肠内菌群代谢,且肠黏膜通透性差,导致其口服生物利用度极低。本文对人参皂苷的口服给药药代动力学特点及体内生物转化作用进行了概述,并对其未来研究方向进行了展望,为今后的研究提供新的思路。
- 李晶戴雨霖郑飞许春春冯丽王馨莹郑柏松于珊珊
- 关键词：人参皂苷口服生物利用度
