任来峰
- 作品数：35 被引量：91H指数：6
- 供职机构：山西医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金博士科研启动基金山西省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学更多>>
- HCV NS3/4A基因外来表达对Huh7细胞凋亡及DNA损伤应答的影响被引量：8
- 2014年
- NS3/4A是丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)编码的丝氨酸蛋白酶复合体,是病毒完成自身复制周期的必要成分。该研究为调查NS3/4A对细胞凋亡及DNA损伤应答(DNA-damage response,DDR)的影响,在Huh7细胞中表达了外来NS3/4A基因。通过DAPI染色和MTT分析显示,外来表达NS3/4A显著诱导细胞的凋亡和增殖活力的下降。免疫荧光检测结果表明,NS3/4A可明显增加细胞内源性DNA双链断裂(double strand breaks,DSBs)损伤(γH2AX灶点升高);而进一步用X-ray诱导细胞外源性DSBs损伤后,外来表达NS3/4A的细胞显示出明显的DSBs损伤修复缺陷(减缓的γH2AX灶点消退)。免疫印迹法检测结果显示,NS3/4A可抑制喜树碱(Camptothecin,CPT)诱导的ATM第1 981位丝氨酸的磷酸化(pATM1 981)。以上结果提示,NS3/4A基因外来表达可引起细胞DNA损伤,抑制ATM介导的DSBs损伤修复信号,诱导细胞凋亡通路的活化。
- 任来峰唐子执吴惠文许宁刘刚曾鸣郭莲娣
- 关键词：DNA损伤丙型肝炎病毒DNA双链断裂非结构蛋白3
- IFI16在肝癌细胞中的亚细胞定位研究
- 石新丽任来峰刘景利李明远刘秋君于琨成媛牛晓莉
- 该项目通过细胞染色质蛋白抽提及免疫荧光染色等分子生物学和细胞生物学技术探明了干扰素γ诱导蛋白16（IFI16）在不同TP53基因型肝癌细胞及正常肝细胞中的表达、亚细胞定位及与染色质关系；并分析了干预肝癌细胞中IFI16亚...
- 关键词：
- 关键词：肝癌细胞增殖药物治疗
- 两种血凝块基因组DNA提取方法的比较被引量：2
- 2009年
- 分子生物学实验常常涉及到血液中基因组DNA的提取,通常用于实验的DNA主要是从抗凝血中提取,但抗凝血保存的时间过长,也会形成血块,给提取带来不便,造成许多珍贵的血液标本遗弃。为此,本实验对比研究了两种不同的血凝块基因组DNA提取方法，以探索血凝块基因组DNA提取的有效方法，现报道如下。
- 任来峰
- 关键词：DNA提取方法基因组DNA血凝块分子生物学实验血液标本
- 大理白族自治州乙型肝炎病毒基因型分布研究被引量：2
- 2009年
- 目的了解大理地区白族人群感染乙型肝炎病毒(HBV)基因型的分布。方法对202份乙型肝炎表面抗原(HBsAg)阳性血清采用基因型特异性引物-PCR法进行基因型检测。结果202份血清标本中100份(49.5%)HBV基因分型阳性。其中,B基因型41份,占41%;C基因型25份,占25%;B+C混合基因型34份,占34%。在HBV基因型B、C、B+C中HBeAg阳性率分别为:68.3%(28/41)、40.0%(10/25)、58.8%(20/34),B、C基因型比较HBeAg阳性率有显著性差异(χ2=5.089,P=0.024)。结论大理地区HBV基因型主要为B基因型、C基因型和B+C混合基因型,最显著的特点是B+C混合基因型感染占很大比例。
- 任来峰张烜榕申元英王涛陈钟周勇李威
- 关键词：乙型肝炎病毒基因型聚合酶链反应
- 下调SMU1表达对细胞增殖和DNA双链断裂损伤反应的影响被引量：2
- 2014年
- SMU1是一个与细胞基因组复制和RNA剪切过程相关的新基因。该研究为进一步调查SMU1对细胞增殖及DNA双链断裂(DNA double-strand breaks,DNA DSBs)损伤应答的影响,设计合成针对SMU1基因的小分子siRNA,并与对照siRNA(scramble)分别转染HEK 293T或U2OS细胞。通过免疫印迹(Western blot)检测证实,siSMU1转染细胞中SMU1的表达显著下降,采用台盼蓝染色细胞计数检测显示,SMU1表达下调显著降低细胞增殖能力。免疫荧光和免疫印迹法检测结果表明,SMU1表达下调显著增加细胞内源性DSBs损伤(γH2AX foci和蛋白水平均升高);而进一步用X-ray处理细胞造成外源性DSBs损伤后,SMU1沉默细胞显示出延长的DSBs损伤修复动力学(减缓的γH2AX foci和蛋白水平消退)。以上结果提示,SMU1在细胞DSBs损伤修复反应中扮演重要角色,积极参与细胞基因组完整性的维持。
- 任来峰郭莲娣石新丽李莎
- 关键词：DNA损伤RNA干扰DNA双链断裂基因组稳定性
- RPA32蛋白原核表达、多克隆抗体制备及初步鉴定
- 2012年
- 目的原核表达人RPA32蛋白并制备其多克隆抗体,为后续RPA32的功能研究奠定基础。方法以人cDNA文库为模板,构建原核表达质粒PET41a-RPA32,转化受体菌E.coli BL21,经IPTG诱导表达,采用GST亲和纯化方法获得GST-RPA32融合蛋白,将该融合蛋白免疫家兔制备RPA32多抗血清,最后采用Western blot检测其在多种肝细胞株中的特异性。结果在受体菌E.coli BL21中成功诱导表达GST-RPA32融合蛋白,免疫家兔后获得高效价RPA32抗血清,Western blot检测证实该血清能够识别多种肝细胞株中的RPA32及CPT作用后出现的RPA32磷酸化条带。结论成功制备兔抗人RPA32多克隆抗体,为RPA32在DNA损伤中的功能研究奠定了基础。
- 左斌王欢王海斌曾鸣任来峰李莎郭莲娣李明远
- 关键词：原核表达多克隆抗体
- 模拟粪便标本的制作被引量：2
- 2007年
- 目的:为弥补临床医学生和检验专业学生在实验诊断及临床检验实习中标本来源的困难。探讨模拟粪便标本的制备。方法:用面粉做基质,辅以琼脂、血液、蔬菜、肉末及菌种,使用生理盐水调治成糊状。结果:将该标本进行粪便化学及显微镜检查,可观察到一些阳性指标。结论:学生通过对模拟标本的检查,可看到一般阳性指标的形态,感受到与临床的紧密性,及早与临床接触,增强学习兴趣和工作责任心。
- 任吉莲薛翠娥侯艳香任来峰
- 关键词：粪便
- 结直肠癌患者外周血淋巴细胞亚群比例及表面受体表达的变化
- 2023年
- 目的 根据结直肠癌T细胞、自然杀伤(NK)细胞、 NKT细胞表面蛋白受体表达情况,探索结直肠癌患者免疫功能评价体系。方法 收集144例结直肠癌患者和87例健康对照组的外周血样本,通过流式细胞术、细胞培养等方法,分析患者外周血淋巴细胞亚群表面受体与健康对照组的差异。结果 与健康对照组相比,结直肠癌患者外周血总淋巴细胞、 CD16^(bright)CD56^(dimN)K细胞、 NKT细胞百分比降低;T细胞、 CD16^(bright)CD56^(dim)NK细胞、 NKT细胞表面抑制型受体T细胞免疫球蛋白和免疫受体酪氨酸抑制基序结构域(TIGIT)百分比增加;T细胞、 NK细胞、 NKT细胞表面趋化因子受体CC趋化因子受体7(CCR7)略降低。结论 结直肠癌患者外周血NK细胞亚群比例及表面受体表达谱存在差异。
- 惠怡华王海娜崔雅妮段轶鋆任来峰苏文
- 关键词：自然杀伤(NK)细胞
- 氯喹抑制自噬增强宫颈癌细胞SiHa对CPT处理的敏感性被引量：5
- 2016年
- 自噬诱导是肿瘤细胞对化疗药物抵抗性的原因之一,该研究探讨溶酶体抑制剂氯喹对喜树碱(camptothecin,CPT)诱导的宫颈癌细胞Si Ha死亡的增敏效果。CPT和/或氯喹处理宫颈癌Si Ha细胞,MTT法检测细胞增殖,DAPI和TUNEL染色观察细胞凋亡,Western blot和免疫荧光检测自噬及凋亡相关蛋白。结果发现,CPT处理后,Si Ha细胞MAP1LC3B荧光点和LC3II(microtubuleassociated protein light chain 3II)蛋白水平增加,p62荧光点和蛋白质水平则减少;而采用氯喹特异抑制自噬后,可明显提高CPT诱导的细胞凋亡、caspase-9的激活和PARP(poly ADP-ribose polymerase)的切割,而全长caspase-2水平显著下降。以上结果提示,氯喹可通过抑制细胞自噬而增强宫颈癌细胞株Si Ha对CPT诱导细胞凋亡的敏感性。
- 王晓娜任云青吴惠文赵嘉伟游荷花宋彬妤杨赛任来峰
- 关键词：氯喹喜树碱自噬SIHA细胞
- 人骨肉瘤细胞DNA双链断裂修复γH2AX分析
- 2014年
- 目的:探讨人骨肉瘤细胞U2OS中利用γH2AX分析评价细胞DNA双链断裂(DNA Double-Strand Breaks,DSBs)损伤反应动力学过程。方法:用免疫荧光和蛋白质印迹法结合DNA损伤应答通路抑制剂及siRNA基因沉默技术分析U2OS细胞在遭受DSBs损伤处理前后γH2AX foci和其表达水平的动力学变化,并通过流式细胞术定量分析γH2AX的变化情况。结果:在细胞未经损伤处理时,U2OS细胞仅有极少量的γH2AX foci,而在遭受电离辐射(ionizing radiation,IR)后,γH2AX在损伤部位的募集和表达水平快速升高,1h内达峰值,该过程可被ATM抑制剂和磷酸肌醇激酶3相关激酶抑制剂Wortmannin抑制;而后随着时间的推移,γH2AX表达又逐渐消退,反映了细胞DSBs损伤应答的动力学过程。利用小分子RNA敲除参与DSBs损伤修复的关键因子Mre11表达的细胞及对照siRNA转染细胞,IR处理4h后γH2AX foci数分别为31.68±4.59和21.33±2.08,处理8h分别为21.85±2.49和12.02±4.13,处理12h分别为19.65±2.34和8.51±2.17),处理16h分别为18.05±1.75和6.94±3.19,各时间点Mre11沉默组细胞的γH2AX foci数显著多于对照siRNA处理组细胞,P=0.013,反映了延长的DSBs损伤修复动力学(减缓的γH2AX foci消退)。经γH2AX和PI双染色流式细胞术发现,不同细胞分期γH2AX阳性率差异有统计学意义,G1期细胞在IR处理前为(1.34±0.28)%,处理后为(20.25±3.56)%,P<0.001;S期细胞在IR处理前为(1.26±0.19)%,处理后为(79.48±5.72)%,P<0.001;G2/M期细胞在IR处理前为(8.84±1.25)%处理后为(29.49±4.36)%,P<0.001。结论:γH2AX分析可有效分析U2OS细胞的DSBs损伤应答反应动力学,U2OS细胞具有低γH2AX背景、易于传代培养等优点,可作为研究细胞DSBs损伤应答反应的模式细胞。
- 任来峰郭莲娣石新丽李莎
- 关键词：DNA损伤DNA双链断裂基因组稳定性电离辐射
