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应用工程微藻制备生物柴油的新途径: 生物柴油作为石化能源的替代燃料已在国际上得到广泛应用。至今生物柴油的原料主要来自油料植物,但与农作物争地的情况以及较高的原料成本限制了生物柴油的进一步推广.微藻作为高光合生物有其特殊的原料成本优势,微藻的脂类含量最高可达...; 宋东辉侯李君施定基; 关键词：基因工程高油脂生物柴油; 文献传递

蓝藻脂肪酸合成途径乙酰辅酶A羧化酶基因的克隆与穿梭表达载体的构建: ＜正＞以脂肪酸为原料制备生物柴油,是解决国内外石油资源匮乏的主要途径之一。微藻作为生物柴油的原料在培养成本和开发技术上优于其它油料植物。为此, 利用微藻基因工程进一步提高藻细胞光合生产率和脂肪酸含量,有助于解决生物柴油原...; 宋东辉侯李君宋西峰施定基; 文献传递

带G-CSF基因载体的构建及其在念珠藻7120中的表达: ＜正＞粒细胞集落刺激因子（G-CSF）主要用于防治化疗和放疗后引起的骨髓抑制, 以及其他白细胞减少的病症。国内外已把 G-CSF 基因分别在原核、真核细胞中表达,主要在大肠杆菌、酵母和动物细胞中。我们曾经用 pRL-48...; 施定基马佩君刘洁侯李君宋东辉; 文献传递

生物柴油原料资源高油脂微藻的开发利用被引量：90: 2008年; 生物柴油作为化石能源的替代燃料已在国际上得到广泛应用。至今生物柴油的原料主要来自油料植物,但与农作物争地的情况以及较高的原料成本限制了生物柴油的进一步推广。微藻作为高光合生物有其特殊的原料成本优势,微藻的脂类含量最高可达细胞干重的80%。利用生物技术改良微藻,获得的高油脂基因工程微藻经规模养殖,可大大降低生物柴油原料成本。介绍了国内外生物柴油的应用现状,阐述了微藻作为生物柴油原料的优势,对基因工程技术调控微藻脂类代谢途径的研究进展,以及在构建工程微藻中面临的问题和应采取的对策进行了综述和展望。; 宋东辉侯李君施定基; 关键词：基因工程微藻油料植物生物柴油

蓝藻磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶的生物信息学分析被引量：6: 2008年; 应用NCBI、Expasy等在线生物信息学网站对蓝藻磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶(PEPC)与其他物种进行序列同源比对,分析相同的保守序列及催化活性位点,构建分子进化树;预测跨膜结构、疏水性/亲水性、二级结构、功能域和模体等。结果显示,蓝藻PEPC与高等植物、细菌、真核藻PEPC同源性都比较低(约为33%),但是它们含有两个类似的活性部位和相同的催化活性位点;该蛋白质是非跨膜的亲水性不稳定蛋白,二级结构以a-螺旋和无规则卷曲为主,含有一个功能结构域,主要的功能是参与氨基酸的合成。; 侯李君王学魁施定基; 关键词：磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶生物信息学生物柴油

蓝藻正反义pepcA基因导入对大肠杆菌中脂类合成的调控被引量：13: 2008年; 为了探索原核生物中磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶(PEPC)在调控脂类代谢中的作用。PCR法扩增了鱼腥藻Anabaena sp.PCC 7120 PEPC基因中含保守结构域Fa的一段基因片段pepcA,并将其克隆到pMD 18-T载体上。将pepcA正反向连接到穿梭表达载体pRL-489上BamHI位点之间,构建得带有pepcA正反义基因的载体pRL-Sen pepcA和pRL-Anti pepcA,转化入大肠杆菌(Escherichia coli)DH5α宿主细胞中。分析结果表明:pepcA片段的转入对宿主菌的生长影响不大;与野生型细胞相比较,转反义pepcA片段E.coli中PEPC酶活性降低到野生菌的30.2%,蛋白合成减少23.6%,脂类的合成增加了46.9%,;而转正义pepcA片段E.coliPEPC酶活性是野生菌的2.38倍,蛋白合成增加了14.5%,脂类合成减少了49.6%;转基因菌中十八碳酸的含量明显增加。上述结果可能为利用原核生物做生物柴油原料提供线索。; 侯李君施定基蔡泽富宋东辉王学魁; 关键词：蓝藻大肠杆菌

对虾白斑病毒VP28基因在聚球藻中的表达与分析被引量：6: 2008年; 通过PCR从实验室保存的pMD-VP28质粒中扩增得到对虾白斑病毒囊膜蛋白VP28基因,同时在设计的引物起始密码子前添加促进外源基因在蓝藻中表达的SD序列,引物末端添加限制性内切酶位点BamHⅠ和EcoRⅠ,从质粒pRL-439获得强启动子PpsbA,酶切连接构建了pDC-VP28高效表达穿梭载体.利用三亲接合转移成功地将构建的载体pDC-VP28转化聚球藻7002.对转基因聚球藻进行培养,其表达产物通过SDS-PAGE分析,发现表达量达3%左右.; 邓元告侯李君邓丽珍施定基; 关键词：聚球藻7002 穿梭表达载体

油料植物中高油脂工程微藻的种质创新研究: 宋东辉邓元告刘洪艳张越男侯李君; 微藻在同样条件下，其光合生产率比高等植物要高数十倍，因而其脂类代谢反应也异常活跃.利用微藻基因工程调控脂类代谢途径，增强或抑制代谢途径的关键酶，可大大提高微藻细胞的脂类含量，从而实现用高油脂微藻制备生物柴油的目的.通过微...; 关键词：; 关键词：微藻油料植物基因工程

蓝藻PEPC在大肠杆菌中的表达对脂类合成的调控: 磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶PEPC(EC 4.1.1.31)是控制生物体内蛋白质和脂肪酸含量比例的关键酶.本研究目的在于研究PEPC的表达对大肠杆菌Escherichia coli(E.coli)中脂类合成的调控.PCR法扩...; 侯李君宋东辉施定基; 关键词：大肠杆菌磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶反义表达; 文献传递

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侯李君