俞扬
- 作品数:2 被引量:1H指数:1
- 供职机构:东南大学医学院遗传学研究中心更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 人源抗CEA噬菌体抗体库的构建及筛选
- 2006年
- 目的构建人癌胚抗原(CEA)特异性噬菌体抗体库,制备人源抗CEA单克隆抗体(mAb)。方法用常规RT-PCR法,直接从10例结肠癌患者肠系膜淋巴结中的淋巴细胞克隆出免疫球蛋白Fd段和κ链基因,建成噬菌体抗体库。对抗体库进行5轮吸附-洗脱-扩增的亲和选择后,以ELISA法鉴定抗CEA噬菌体。结果RT-PCR可有效地扩增出Fd和κ基因并以此构建成容量为5.2×106的噬菌体抗体库。经5轮亲和选择可使特异性噬菌体抗体得到高度富集,并成功获得抗CEA噬菌体抗体阳性克隆。结论抗CEA噬菌体抗体库的构建和人源抗CEA mAb的制备,为CEA阳性表达肿瘤的靶向治疗奠定基础。
- 范健赵刚俞扬沈宇清
- 关键词:噬菌体抗体库癌胚抗原人源性单克隆抗体
- 人源性噬菌体抗体库的构建和抗CEA抗体的筛选及表达被引量:1
- 2006年
- 目的构建人源性噬菌体抗体库,筛选和表达人源性抗癌胚抗原(CEA)单克隆抗体。方法从结肠癌患者肠系膜淋巴结中的淋巴细胞克隆出免疫球蛋白Fd段和κ链基因,建成噬菌体抗体库。用人CEA对抗体库进行筛选,将得到的阳性克隆进行表达及检测。结果抗体库库容为5.2×106,Fab基因重组率为30%。ELISA及Western blot分析检测,证实表达出人源抗CEA单克隆抗体。DNA序列测定,证实所获基因为人免疫球蛋白可变区基因。结论成功构建噬菌体抗体库,从中获得人源性抗CEA的单克隆抗体。
- 范健赵刚张建琼俞扬沈宇清缪凤琴
- 关键词:噬菌体抗体库癌胚抗原人源性单克隆抗体