刘金坤
- 作品数：20 被引量：82H指数：6
- 供职机构：重庆市中医院更多>>
- 发文基金：广东省自然科学基金中央级公益性科研院所基本科研业务费专项国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 单细胞转录组测序在鼻咽癌免疫微环境中的研究进展
- 2022年
- 分析近年来鼻咽癌单细胞转录组测序的研究进展,对鼻咽癌免疫微环境进行剖析,总结髓系细胞、T细胞、B细胞、NK细胞等免疫细胞和成纤维细胞在鼻咽癌组织中的作用机制,为鼻咽癌的诊断、治疗和预后预测提供参考。
- 应敏刘金坤
- 关键词：鼻咽癌
- 巨泡式死亡:一种新的细胞死亡方式被引量：6
- 2013年
- 细胞死亡是生命活动过程中一项重要的生理或病理现象。传统的细胞死亡方式主要包括凋亡、坏死和自噬等。新近研究发现了一种新的细胞死亡方式-methuosis,在这种细胞死亡过程中,由于过度刺激导致细胞内水泡吸收、积累、融合而逐步形成相对于细胞本身而言的大量巨大液泡,最终导致细胞代谢活动减少、细胞膜破裂、细胞死亡。本文对巨泡式死亡的命名来源、形态特征、可能的机制、与相关死亡方式的区别及其研究进展进行了阐述。
- 蔡红兵刘金坤范钦李欣
- 关键词：细胞死亡
- 干燥综合征发病机制相关信号通路研究进展
- 2022年
- 干燥综合征(SS)是一种慢性全身性自身免疫性疾病,其特征为外分泌腺的淋巴细胞浸润导致口眼干燥,还可影响肺、肾、肝等多个系统。先天性和适应性免疫途径的激活均可诱发SS,在SS患者中发现激活Toll样受体、JAK-STAT、TNF、NF-κB等信号通路均与SS的发生发展相关,但其潜在发病机制仍不清楚。本文对其相关信号通路进行综述,为深入了解SS的发病机制提供参考。
- 刘金坤王琴高洪燕喻晓雯冯婧白殊同吴斌
- 关键词：干燥综合征信号通路
- 六味地黄口服液薄层色谱鉴别研究被引量：3
- 2016年
- 目的建立鉴别六味地黄口服液中中药材的薄层色谱(TLC)法。方法采用TLC法对六味地黄口服液中牡丹皮、山茱萸、泽泻、茯苓、山药5味中药进行定性鉴别。结果薄层色谱分离度好,鉴别斑点清晰,特征斑点专属性强,阴性对照品溶液无干扰。结论该法结果准确、可靠、重复性好,可用于六味地黄口服液的质量控制。
- 刘金坤王琴白殊同高洪燕喻晓雯吴斌
- 关键词：六味地黄口服液薄层色谱法牡丹皮山茱萸泽泻
- 硫利达嗪诱导SW480细胞凋亡的机制被引量：2
- 2015年
- 目的：研究硫利达嗪对结肠癌SW480细胞增殖及凋亡的影响。方法应用5-30μmol/L硫利达嗪处理SW480细胞，MTT法检测细胞增殖抑制率；Hoechst33342细胞核染色法观察细胞凋亡的形态学改变；流式细胞仪检测细胞凋亡率、细胞周期；RT-qPCR分析PDCD4、c-MYC、BCL2、CCND1、CASPASE3、PARP1、CDK4、EIF4A基因表达水平；Western blotting检测AKT、p-AKT、PDCD4蛋白表达水平。结果 MTT结果表明硫利达嗪抑制SW480细胞的增殖，硫利达嗪处理细胞后出现核固缩、染色质凝集和核碎片化等典型的细胞凋亡特征；流式检测表明硫利达嗪诱导G0/G1期阻滞，细胞凋亡增加。RT-PCR结果表明硫利达嗪处理细胞后PDCD4表达上调，CCND1、CDK4、c-MYC、BCL2、CASPASE3、PARP1和EIF4A表达下调。免疫印迹分析结果显示PDCD4蛋白表达上调，p-AKT蛋白表达下调。结论硫利达嗪能够抑制人结肠癌SW480细胞的增殖，并诱导其凋亡，其机制可能与抑制PI3K/AKT信号通路导致PDCD4表达水平升高有关。
- 刘金坤郝亚娟黄嘉维李欣蔡红兵彭康
- 关键词：结肠癌SW480硫利达嗪细胞凋亡
- 化香树果序醇提物诱导人鼻咽癌CNE1/2细胞发生巨泡式死亡的机制被引量：3
- 2021年
- 目的:研究化香树果序醇提物(EPS)诱导鼻咽癌细胞CNE1/2发生巨泡式死亡的机制及对荷鼻咽癌转移瘤裸鼠的抑瘤作用.方法:采用MTT实验及平板克隆形成实验检测EPS对CNE1/2细胞活性及增殖的影响.设计荧光示踪实验,设置空白组、荧光黄处理组、荧光黄+EPS处理组、荧光黄+EPS+细胞松弛剂处理组,在荧光显微镜下观察细胞的形态变化并采用流式细胞分析仪分析细胞荧光值.蛋白免疫印迹法检测c-fos、ARF6、DUSP1、p-DUSP1、ERK1/2、p-ERK1/2等蛋白表达水平.使用小分子c-fos抑制剂T-5224及DUSP1抑制剂BCI分别处理细胞并孵育24 h后观察细胞形态的变化,进一步在倒置显微镜下观察EPS处理过表达ARF6及c-fos的鼻咽癌细胞后细胞的形态变化,并在蛋白水平进行验证.最后通过荷鼻咽癌移植瘤裸鼠模型,研究EPS在体内的抑瘤作用,瘤组织免疫组化研究相关蛋白在瘤组织中的表达差异.结果:EPS能明显抑制CNE1/2细胞的活性及增殖(P<0.05).荧光黄+EPS处理组与荧光黄+EPS+细胞松弛剂组相比,结果无统计学差异,使用细胞松弛剂并不减少细胞对荧光示踪剂的摄取.与对照组相比,p-ERK1/2、c-fos、p-DUSP1蛋白表达明显下降.使用c-fos及DUSP1抑制剂后,巨泡式死亡现象消失,过表达ARF6及c-fos也能逆转液泡在细胞内集聚.体内实验显示EPS能抑制荷鼻咽癌移植瘤裸鼠肿瘤的生长,实验组瘤组织中c-fos、p-DUSP1表达与对照组相比下降,与体外细胞实验结果一致.结论:EPS在体内外均有明显抗肿瘤作用,并通过抑制ARF6/ERK1/2/c-fos通路和DUSP1磷酸化诱导人鼻咽癌CNE1/2细胞发生巨泡式死亡.
- 涂维刘金坤沈鸿贵莫惠婷蔡红兵
- 关键词：C-FOS
- 化香树果序化学成分和药理作用研究进展被引量：3
- 2019年
- 通过对化香树果序的化学成分、提取方法、药理活性的概述,探讨化香树果序含有的主要有效成分和药理作用分子机制,并以此总结化香树果序抗鼻炎的相关靶基因,从而为化香树果序的药效物质研究和资源开发利用提供参考。
- 刘金坤应敏许文婧李汉成
- 关键词：化学成分药理活性
- 基于网络药理学探讨大黄-水蛭-香附配伍治疗子宫内膜异位症的作用机制被引量：3
- 2022年
- 目的:采用网络药理方法研究大黄-水蛭-香附治疗子宫内膜异位症的分子机制。方法:采用中药系统药理学数据库与分析平台和BATMAN-TCM数据库,筛选大黄-水蛭-香附配伍的活性成分和靶点信息。通过对比治疗靶点数据库和GeneCards平台获得子宫内膜异位症疾病靶基因信息,使用Venny软件对大黄-水蛭-香附配伍靶基因和子宫内膜异位症靶基因取交集,获得药物作用核心靶点。通过Cytoscape软件构建"成分-靶点-疾病"网络,并通过STRING数据库分析核心靶点蛋白质-蛋白质相互作用。通过R语言对核心靶点进行基因本体(GO)功能富集分析,通过DAVID数据库进行京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析。结果:共筛选到大黄-水蛭-香附配伍的38个活性成分和98个潜在核心靶点,其中槲皮素、木犀草素、山柰酚、番红花酸和乌索酸为主要化学成分,PTGS2、AR、PPARG、TOP2A和ESR1为主要靶点。大黄-水蛭-香附配伍影响的主要生物过程包括脂多糖应答、甾体激素应答和活性氧应答,KEGG通路富集分析得到330条信号通路,主要包含磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B(PI3K-Akt)、缺氧诱导因子(HIF)和肿瘤坏死因子(TNF)信号通路。结论:大黄-水蛭-香附的可通过山柰酚、槲皮素和木犀草素等成分与PTGS2、AR和ESR1等靶点发生相互作用,调节PI3K-Akt、HIF和TNF等多信号通路,影响细胞功能、氧化应答和免疫调节等一系列生物过程,进而实现治疗子宫内膜异位症的作用。
- 邓颖刘金坤白殊同
- 关键词：子宫内膜异位症水蛭香附网络药理学药理机制
- 化香树果序乙醇提取物调控RAS/MAPK通路对鼻咽癌细胞的影响被引量：7
- 2018年
- 目的：研究化香树果序醇提物（ethanol extract of infructescence of Platycarya strobilacea,EPS）的对鼻咽癌CNE1,CNE_2细胞的药理作用机制。方法：以鼻咽癌CNE1,CNE_2细胞为研究对象,以EPS 0.25,0.5,1.0,1.5,2.0 g·L^（-1）干预,设空白组,孵育24 h后,采用噻唑蓝（MTT）比色法检测EPS对CNE1,CNE_2细胞活力的影响。用1.0 g·L^（-1）EPS处理CNE1,CNE_2细胞24 h,倒置显微镜观察细胞形态变化,透射电镜观察细胞器的变化。流式细胞仪检测细胞凋亡程度,RNA高通量测序检测EPS处理后细胞中的差异基因。蛋白免疫印迹法检测HRas proto-oncogene（HRAS）蛋白细胞外调节蛋白激酶1/2（ERK1/2）和c-Fos proto-oncogene（c-Fos）蛋白表达水平。结果：与空白组比较,EPS能明显抑制CNE1,CNE_2细胞的增殖（P〈0.05）,且呈浓度依赖性。与空白组比较,EPS明显诱导CNE1,CNE_2细胞质出现大量空泡,空泡相互融合,不断增大,最后细胞膜破裂,透射电镜发现细胞核没有发生明显的变化,溶酶体空泡化明显,流式结果未发现明显凋亡,与细胞methuosis死亡特征一致。高通量测序结果显示与癌蛋白（RAS）/丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）信号通路相关,与空白组比较HRAS,ERK1/2,c-Fos蛋白表达降低,磷酸化细胞外调节蛋白激酶1/2（p-ERK1/2）蛋白表达升高（P〈0.05）。结论：EPS可通过调控RAS/MAPK信号通路诱导人鼻咽癌细胞CNE1,CNE_2发生methuosis死亡,导致细胞相互融合,细胞内出现大量空泡。
- 刘金坤应敏敖利敖利涂维
- 关键词：鼻咽癌丝裂原活化蛋白激酶
- 中药复方治疗子宫内膜异位症实验研究进展被引量：8
- 2020年
- 对国内外文献报道的具有治疗子宫内膜异位症作用的10种中药复方进行综述,从抗炎免疫调节、抑制血管新生、诱导细胞凋亡和抑制细胞侵袭转移等角度分析中药复方治疗子宫内膜异位症的多成分、多靶点协同起效作用机理,为临床了解中药复方治疗子宫内膜异位症的药理作用特点提供借鉴与参考,也为基于中药复方的抗子宫内膜异位症新药研究开拓新思路。
- 邓颖侯聪高洪燕刘金坤白殊同
- 关键词：子宫内膜异位症中药复方药理作用
