刘飞
- 作品数：51 被引量：203H指数：7
- 供职机构：中国农业科学院上海兽医研究所更多>>
- 发文基金：上海市自然科学基金国家生猪现代产业技术体系建设项目上海市科技兴农重点攻关项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生轻工技术与工程更多>>
- 伪狂犬病毒变异株(JS-2012)对仔猪的致病性研究被引量：37
- 2014年
- 本实验室2012年从江苏省太仓市某发病猪场分离到1株变异的伪狂犬病毒,命名为JS-2012。为了研究该分离株对仔猪的致病性,将12头15日龄的伪狂犬病毒阴性仔猪随机分为3组,其中2组(每组5头猪)分别通过肌肉注射和滴鼻接种JS-2012毒,第3组2头猪做空白对照。接种病毒的仔猪在攻毒后24 h体温均开始升高,4 d后开始死亡,死亡率为100%。临床观察发现,滴鼻组仔猪发病死亡明显快于肌肉注射组。对病死猪进行剖解,均可见大脑血管扩张并出血等典型的伪狂犬病病理变化。病理切片显示猪的脑蛛网膜下腔严重出血,其他各脏器也均有严重病理变化。结果表明该变异株JS-2012为伪狂犬强毒毒株。
- 童武郑浩单同领刘飞梁超李国新姜一峰于海高飞周艳君童光志
- 关键词：伪狂犬病毒仔猪
- 一株携带EGFP基因的重组伪狂犬病毒变异株的构建
- 2015年
- 本研究运用同源重组的方法,在伪狂犬病毒(Pseudorabies virus,PRV)变异株PRV JS-2012基础上,构建了一株携带增强型绿色荧光蛋白基因的标记重组伪狂犬病毒,命名为r PRV JS-2012-EGFP。经PCR方法鉴定及荧光显微镜观察分析,结果表明重组病毒构建成功,并能在感染细胞中稳定表达绿色荧光蛋白。生长曲线和空斑试验结果显示,r PRV JS-2012-EGFP与亲本株PRV JS-2012在体外具有相似的生长特性。将r PRV JS-2012-EGFP毒接种14日龄PRV阴性仔猪,能使实验猪100%发病,病死率高达40%,表明r PRV JS-2012-EGFP是一株具有强致病力的标记伪狂犬病毒变异株,在伪狂犬病毒变异株致病机制研究中具有一定的使用价值。
- 童武郑浩梁超刘飞曹艳云李林田青郑旭晨单同领李国新童光志
- 关键词：伪狂犬病毒同源重组重组病毒
- 马流感疫苗研究进展被引量：2
- 2013年
- 马流感（Equine influenza，EI）是由正黏病毒科、流感病毒属的A型流感病毒中的马流感病毒（Equine influenzavirus，EIV）引起的马属动物一种严重的上呼吸道急性高度接触性传染疾病，多呈暴发性流行，传播迅速而且范围广泛。OIE规定马流感为法定报告动物疫病，我国将其列为三类传染病。
- 刘春国刘飞彭永刚刘明相文华
- 关键词：马流感病毒A型流感病毒传染疾病上呼吸道马属动物法定报告
- 猪伪狂犬病毒变异株全长基因组测序及遗传演化分析
- 为了进一步了解伪狂犬病毒(PRV)野毒株的遗传变异情况，同时进一步弄清传统基因缺失疫苗对仔猪感染现有野毒株和经典强毒株的保护力差异的分子机制，对PRV JS-2012株全基因组测序和功能区域进行遗传演化和变异分析，以及主...
- 张青占童武刘飞郑浩周艳君童光志
- 关键词：猪伪狂犬病毒
- 文献传递
- H3N2亚型禽流感病毒分离鉴定及HA和NA基因序列分析
- 2015年
- 为了研究野生禽类H3N2亚型低致病性禽流感病毒的分子特征,本研究从野鸭粪便样本中分离到一株禽流感病毒,通过血凝抑制试验证实分离株为H3亚型流感病毒,命名为A/Mallard/Qiqihaer/0726/2013(H3N2)。对其血凝素和神经氨酸酶基因进行了克隆和序列分析,核苷酸序列比对结果表明分离株HA基因与H3N8亚型A/Mallard/San Jiang/90/2006(H3N8)的同源性最高,达到99.5%,NA基因与H5N2亚型A/northern pintail/Akita/714/2006(H5N2)的同源性最高,达到99.4%。系统发育树分析进一步证实分离株的HA和NA基因可能分别来自于H3N8亚型和H5N2亚型禽流感病毒,是一株重排病毒。本研究为H3N2亚型禽流感病毒的遗传进化机制提供了理论数据。
- 李健刘飞刘大飞罗其勇李一经刘春国
- 关键词：野鸭H3N2亚型HA基因NA基因重排
- 贵州省PRRSV分离株NSP2基因的克隆及序列分析
- 为了解贵州省PRRSV分离株的遗传变异情况和分子流行病学背景，本研究收集了2007年以来贵州省不同地区的12株PRRSV毒株，并进行NSP2基因序列测定与遗传变异分析。研究表明，这12株PRRSV均与我国2006年以来流...
- 刘飞王开功周碧君罗险峰文明安同庆路宪礼陈俊程振涛
- 关键词：NSP2
- 文献传递
- 乙型脑炎病毒基因组cDNA克隆在宿主菌中不稳定因子的初步研究
- 为了探求乙型脑炎病毒基因组cDNA克隆在宿主茵中不稳定遗传的影响因子,本研究以猪源JEV HEN0701株基因组片段1 bp～2913 bp为研究对象,分析基因组原核启动子和相关毒力基因在不稳定遗传中的作用.在5'端,分...
- 郑旭晨郑浩郭亦非刘飞梁超童武单同领于海童光志
- 关键词：基因克隆
- 文献传递
- H3N8亚型EIV HA基因在昆虫细胞中的表达及生物学特性分析
- 2013年
- 为表达H3N8亚型马流感病毒(EIV)HA蛋白,本研究将A/equine/xinjiang/3/2007(H3N8)的HA基因克隆至杆状病毒转移载体pFastBac1中,构建重组转移质粒pFB-XJ3-HA,并将其转化至DH10BAC感受态细胞中,与杆状病毒骨架质粒Bacmid进行重组,重组杆粒rBac-XJ3-HA转染Sf9昆虫细胞,构建重组杆状病毒rBv-XJ3-HA,并通过细胞免疫组化和western blot进行鉴定。结果表明rBv-XJ3-HA构建正确,表达的HA蛋白与抗EIV的血清反应良好;血凝试验结果表明表达的HA蛋白具有良好的血凝活性。本研究为研制EIV HA蛋白亚单位疫苗提供了实验依据。
- 刘春国王伟刘飞刘彦云王丹吕让刘明相文华
- 关键词：马流感病毒HA基因杆状病毒表达血凝活性
- 乙型脑炎病毒基因组cDNA克隆在宿主菌中不稳定因子的初步研究被引量：1
- 2014年
- 为了探求乙型脑炎病毒（Japanese encephalitis virus，JEV）基因组cDNA克隆在宿主菌中不稳定遗传的影响因子，本研究以猪源JEV HEN0701株基因组片段1-2913 bp为研究对象，分析基因组原核启动子和相关毒力基因在不稳定遗传中的作用。在5＇端，分析片段中潜在的原核启动子序列，通过PCR扩增得到不同长度的cDNA片段；在3＇端，通过内切酶酶切截断基因组prM蛋白或E蛋白编码区，获得3＇末端不同的cDNA片段。将各片段克隆入pCR-BluntII-TOPO载体，转化大肠杆菌，于37℃条件下培养。结果显示，片段73-2913 bp、97-2913 bp、355-2913 bp及1-933 bp、1-1275 bp能够在转化菌中稳定遗传；含有其他片段39-2913 bp、54-2913 bp及1-1800 bp、1-1971 bp的重组细菌不能在37℃条件下生长；片段1-1600 bp虽然能够在转化菌中传代，但是出现不规律突变。以上结果表明：软件所预测各原核启动子片段中，基因组73-118 bp区域与cDNA克隆稳定性有关，且上游的54 bp至73 bp的序列对该区域启动子存在影响；在JEV基因组1275 bp至1600 bp之间可能存在毒性蛋白编码序列。
- 郑旭晨郑浩郭亦非刘飞梁超童武单同领于海童光志
- 关键词：乙型脑炎病毒
- 乙型脑炎病毒E-138(Glu/Lys)变异导致病毒神经毒力减弱
- 引言乙型脑炎病毒(Japanese encephalitis virus,JEV)能够感染人(主要为15岁以下儿童)和多种动物(如猪、马)的中枢神经系统,引发病毒性脑炎,危害严重。本实验室保存有猪源乙型脑炎病毒HEN07...
- 郑旭晨郑浩田青刘飞梁超童武童光志
