公共文化服务平台

共 7 条记录，以下是 1-7

全选清除导出

排序方式：

江苏省2012年柯萨奇病毒A组16型基因特征分析被引量：2: 2014年; 目的：了解江苏省2012年柯萨奇病毒A组16型（CA16）分离株VP1区基因特征。方法：选取江苏省2012年14株CA16病毒分离株,用1对特异性引物进行VP1区核苷酸序列扩增,对扩增产物进行测序,利用生物信息学软件对序列进行分析,结果与CA16参考株序列进行同源性比较并构建基因进化树。结果：14株CA16分离株VP1区核苷酸和氨基酸同源性分别为90.5%~100.0%和98.7%~100.0%,与CA16国际标准株G10的核苷酸和氨基酸同源性分别为75.5%~76.7%和91.6%~92.3%。江苏省2012年的CA16分离株全部属于B1基因亚型,同时包含B1a 和B1b 两条进化分支。结论：江苏省2012年有CA16病毒的B1a与B1b两种进化分支共同存在与循环,且呈现以B1b基因亚型为优势型别。B1a基因亚型为辅助型别的传播模式;无论是优势型别还是辅助型别,均各自呈现密切的亲缘关系。; 单军嵇红包林付建光王慎骄祁贤汤奋扬周明浩朱叶飞; 关键词：手足口病 VP1基因基因型

抗人结缔组织因子人源单链抗体的筛选、表达及活性鉴定: 2013年; 目的从人源噬菌体抗体文库中筛选抗人结缔组织生长因子(CTGF)单链抗体(ScFv),原核表达并鉴定其活性。方法以重组人源CTGF(rhCTGF)为靶标,对人源噬菌体抗体文库进行筛选;用Phage-ELISA筛选阳性克隆并进行原核表达、纯化,获得了高纯度的ScFv蛋白,通过ELISA和Millicell迁移实验鉴定其活性。结果经过3轮筛选,获得1株特异性抗人CTGF ScFv 1C5,ELISA显示1C5能与rhCTGF特异性结合;在Millicell迁移实验中,1C5能抑制CTGF的生物学功能,具有中和活性。结论成功筛选到1株抗人CTGF的ScFv,有望在CTGF相关疾病的治疗上发挥作用。; 周云包林金秋张黎蔡雪婷卢悟广曹鹏焦永军张建平; 关键词：结缔组织生长因子噬菌体展示技术单链抗体靶向治疗

肠道病毒71型VP1蛋白单克隆抗体的制备及初步鉴定: 2013年; 目的:制备肠道病毒71型(enterovirus 71,EV71)VP1外壳蛋白单克隆抗体。方法:利用重组纯化的EV71-VP1蛋白为抗原免疫BALB/c鼠,按常规杂交瘤技术进行细胞融合,对阳性杂交瘤细胞进行筛选及亚克隆,获得1株能稳定分泌抗EV71-VP1抗体的杂交瘤细胞株6F2B9,细胞体外扩大培养后的上清用Protein G柱纯化,超滤后用BCA法测其浓度,用免疫球蛋白亚类鉴定试剂盒鉴定单克隆抗体亚型,间接ELISA方法检测其效价和特异性,间接免疫荧光法检测其与EV71病毒的特异性结合能力。结果:本研究得到的抗EV71-VP1抗体DSE-136,纯化后浓度为1.9 g/L,免疫球蛋白亚类为IgG2b,轻链属于κ链;间接ELISA检测效价为1∶3.2×105;间接免疫荧光结果显示其可与EV71病毒特异性结合。结论:成功制备出1个效价高、特异性好的抗EV71-VP1单克隆抗体DSE-136,为VP1抗原诊断、疫苗研发及其效果评价奠定了基础。; 包林张黎曾晓燕郭喜玲史凤娟黄明明梁淑仪汪华焦永军; 关键词：肠道病毒71型 VP1蛋白单克隆抗体

肠道病毒71型重组VP1蛋白的原核表达及初步鉴定: 2012年; 目的利用大肠杆菌原核表达系统表达并纯化肠道病毒71型(EV71)VP1蛋白,并对重组蛋白功能进行初步鉴定。方法 PCR扩增EV71VP1全长基因,在测序正确的基础上,将其插入表达载体pET28a(+),构建表达质粒pET28a(+)/VP1,转化表达菌BL21(DE3),IPTG诱导表达,利用Ni 2+亲和层析柱对重组蛋白进行纯化,经ELISA和Western Blot,验证EV71VP1的抗原性。结果成功构建pET28a(+)/VP1重组质粒,经大肠杆菌表达、纯化获得分子量约为43kDa的融合蛋白,经ELISA和Western Blot,结果显示该蛋白有良好的抗原性。结论实现了肠道病毒7l型VP1蛋白的原核高效表达,为肠道病毒71型诊断试剂和疫苗的研究奠定基础。; 张黎包林金秋黄明明曾晓燕郭喜玲李祥瑞焦永军; 关键词：肠道病毒71 原核表达

肠道病毒71型重组VP1蛋白的原核表达及初步鉴定: 目的:利用大肠杆菌原核表达系统表达并纯化肠道病毒71型(EV71)VP1蛋白,并对重组蛋白功能进行初步鉴定。方法：PCR扩增EV71 VP1全长基因,在测序正确的基础上将其插入表达载体pEI30a(+),构建表达质粒pE...; 包林金秋黄明明曾晓燕郭喜玲李祥瑞焦永军; 关键词：肠道病毒外壳蛋白原核表达疫苗; 文献传递

高尔基蛋白73(GP73)ELISA定量检测方法的建立及临床应用: 2013年; 目的建立双抗体夹心ELISA定量检测人血清高尔基蛋白73(GP73)的方法,并用于检测血清GP73含量。方法利用杂交瘤法制备纯化的抗GP73单克隆抗体(mAb)进行辣根过氧化物酶(HRP)标记后,通过棋盘滴定法确定包被抗体和酶标抗体及其最适工作浓度;以重组人的GP73抗原为标准品建立标准曲线;以重复性、灵敏性和回收率实验评价ELISA方法。应用该ELISA法对正常人、肝炎、肝硬化及肝癌患者血清中的GP73水平进行定量检测。结果当抗GP73 mAb3D5A10和7H3F5分别为捕获抗体和酶标抗体、工作浓度分别为40μg/ml和1∶4000时,双抗体夹心ELISA法最优。该方法的平均批内和批间变异系数分别为4.6%和7.6%,灵敏度达3.76ng/ml,平均回收率为(102.2±5)%。用本方法重复测定肝癌(33例)、肝硬化(28例)、乙型肝炎(44例)及正常人(44例)血清样本中GP73浓度(中位数)分别为25.9、27.6、16.7、9.9μg/L;除肝癌与肝硬化组间差异无统计学意义外,其余各组间均有统计学差异(P<0.05)。结论成功建立了双抗体夹心ELISA定量检测GP73的方法。检测血清GP73可作为诊断肝脏疾病的重要辅助手段之一。; 周云包林徐言金秋张黎张建平焦永军; 关键词：原发性肝癌双抗体夹心ELISA

全选清除导出

共1页<1>

包林