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烟曲霉Asp f3和Asp f4的表达纯化与多克隆抗体的制备被引量：1: 2015年; 侵袭性曲霉病以烟曲霉在肺部定植、侵袭为主,具有较高的致死率.治疗侵袭性曲霉病的关键是早期确诊.目前临床上用于诊断侵袭性曲霉病的血清学方法是检测血清中半乳甘露聚糖循环抗原的GM试验,在敏感性和特异性方面存在局限性.为了用抗重组蛋白多克隆抗体鉴定和分析烟曲霉Asp f3和Asp f4特异性和曲霉广谱性表位,构建检测可疑血清样本中相应抗体的表位嵌合肽,以诊断侵袭性曲霉病.本研究表达纯化了烟曲霉Asp f3和Asp f4重组蛋白,制备了IgG抗体滴度均在1.28×106以上的高滴度的兔抗重组蛋白多克隆抗体.; 高岩霍克克季朝能唐海平徐万祥谢毅顾少华; 关键词：烟曲霉 ASP F3 ASP 表达纯化抗体制备

HPV58型E1重组蛋白的表达纯化及其多克隆抗体的制备被引量：1: 2013年; 目的：原核表达重组人类乳头瘤病毒（human papillomavirus，HPV）58型E1蛋白，并制备兔抗HPV58型El蛋白多克隆抗体。方法：分别构建含编码E1蛋白分子中1～326aafEl却的cDNA片段的表达质粒pET－28b－E1－N，以及含编码E1蛋白分子中319～644aa（E1．c）cDNA片段的表达质粒pET－28b－E1-C原核表达载体，分别转化感受态BL21（DE3）细胞，经诱导表达后，利用镍柱亲和层析方法，分离纯化目的蛋白E1-N和E1-C作为免疫原免疫新西兰大白兔，制备抗El多克隆抗体，Western blotting检测抗体的特异性。结果：制备获得高纯度的El－N和E1－C蛋白，以及高滴度的兔抗E1多克隆抗体，Western blotting结果示，制备的多克隆抗体具有较好的抗原特异性。结论：成功获得兔抗HPV58型E1蛋白多克隆抗体，为E1蛋白分子中线性B细胞表位的鉴定提供了物质基础。; 高锦阳程一航唐海平谢毅李元春徐万祥顾少华; 关键词：蛋白表达抗体制备

HPV58型E1^E4蛋白的表达纯化和多克隆抗体的制备被引量：2: 2012年; 目的:构建pRSET-A\E1^E4原核表达载体,获得E1^E4蛋白的多克隆抗体。方法:在BL21(DE3)细胞中诱导E1^E4融合蛋白表达,收集包涵体经过镍柱纯化后免疫新西兰白兔,获得的抗血清经硫酸铵沉淀法纯化得到抗体。结果:经Western blotting检测表明制备的E1^E4蛋白多克隆抗体特异性较好。结论:成功获得了纯化的E1^E4蛋白抗体,有助于后续HPV58型E1^E4蛋白功能和B细胞抗原表位的研究。; 薛冰高锦阳唐海平王健谢毅徐万祥顾少华; 关键词：蛋白表达抗体制备

短肽重组克隆构建筛选的载体及其应用: 本发明涉及一种短肽重组克隆构建筛选的载体及其应用。具体地，本发明涉及一种用于构建和筛选短肽重组克隆的表达盒及含有该表达盒的载体，所述表达盒具有优化的Z1‑S1‑Z2‑S2‑Z3‑Z4式(I)所示结构。实验结果表明，本发明...; 徐万祥唐海平王健陈玲瀚连文博詹建民顾少华季朝能谢毅; 文献传递

烟曲霉Asp f3和Asp f4线性B细胞抗原表位最小基序鉴定: 2016年; 烟曲霉(Aspergillus fumigatus)是一种广泛存在于自然界中的条件致病菌,其产生的分生孢子被易感人群吸入后定植于肺部,引起3种曲霉病:致咯血的曲霉肿、致肺纤维化的变应性支气管肺曲霉病、致较高死亡率的侵袭性曲霉病。目前临床上用于诊断烟曲霉感染的血清免疫学指标有半乳甘露聚糖和1,3-β-D-葡聚糖,但特异度和灵敏度方面存在一定的局限性。Asp f3和Asp f4为烟曲霉主要抗原,在感染者血清中存在相应的循环抗体。本研究分别用兔抗Asp f3和Asp f4抗血清对其进行抗原表位扫描,鉴定了8个Asp f3和6个Asp f4最小表位基序肽。用所鉴定的最小表位基序与烟曲霉其他抗原的最小表位基序构建嵌合肽,可能有助于提高烟曲霉感染诊断的特异度和灵敏度。; 石晶高岩霍克克季朝能唐海平徐万祥谢毅顾少华; 关键词：烟曲霉 ASP F3 ASP

4种禽流感病毒M2e多肽的串联表达和小鼠口服免疫效果: 2018年; 为研制广谱性禽流感口服疫苗,将4种禽流感病毒特异的基质蛋白2胞外区(matrix protein 2ectodomain,M2e)多肽与黏膜免疫佐剂CTA1-DD串联,原核表达并纯化CTA1DD-AVI4M2e融合蛋白。以200μg融合蛋白CTA1DD-AVI4M2e口服免疫BALB/c小鼠,结果显示实验组肠液IgA抗体效价和血清IgG抗体效价比对照组显著升高,血清中特异性IgG抗体效价达约360倍。分割的3段肠样中:第1段浸出液IgA抗体效价约为360倍,第2段约为120倍,第3段约为9 720倍。结果表明,本研究制备的CTA1DDAVI4M2e具有显著口服免疫效果,为后续研究提供了基础。; 罗斌钱凯徐万祥唐海平季朝能谢毅谢毅; 关键词：口服疫苗 IGA抗体 IGG抗体

H1N1流感病毒血凝素可诱发广谱保护性抗体的表位肽及其应用: 本发明提供了H1N1流感病毒血凝素可诱发广谱保护性抗体的表位肽，其来自于流感A病毒(IAV)H1N1血凝素(HA)切割位点。所述的表位肽除了H14亚型，在包括部分H8的17个IAV‑H亚型HA蛋白中都几乎100％保守地存...; 李元春谢毅王健戴建锋唐海平顾少华季朝能程一航连文博詹建民徐万祥; 文献传递

H1N1流感病毒血凝素可诱发广谱保护性抗体的表位肽及其应用: 本发明提供了H1N1流感病毒血凝素可诱发广谱保护性抗体的表位肽，其来自于流感A病毒(IAV)H1N1血凝素(HA)切割位点。所述的表位肽除了H14亚型，在包括部分H8的17个IAV‑H亚型HA蛋白中都几乎100％保守地存...; 李元春谢毅王健戴建锋唐海平顾少华季朝能程一航连文博詹建民徐万祥

HPV58型E2蛋白表达纯化与多克隆抗体制备: 2015年; 目的:表达纯化重组人乳头瘤病毒(human papillomavirus,HPV)58型E2蛋白,制备多克隆抗体。方法:构建重组质粒p ET-28b-E2,转化至BL21(DE3)p Lys S中诱导表达,包涵体洗涤后经镍柱亲和层析分离得到纯化目的蛋白。用纯化的重组E2蛋白免疫新西兰白兔,制备兔抗HPV58型E2蛋白多克隆抗体,ELISA分析多克隆抗体的效价,免疫印迹检测抗体的特异性。结果:表达纯化了重组HPV58型E2蛋白,制备了高滴度和高特异性的多克隆抗体。结论:制备的多克隆抗体可用于对HPV58型E2蛋白进行精细B细胞线性表位鉴定。; 姜文婷程一航唐海平谢毅连文博詹建民徐万祥顾少华; 关键词：蛋白表达抗体制备

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唐海平