夏浩 作品数:10 被引量:13 H指数:2 供职机构: 第三军医大学大坪医院野战外科研究所 更多>> 发文基金: 国家重点基础研究发展计划 军队“十一五”面上项目 高等学校骨干教师资助计划 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
严重多发伤患者外周血清对巨噬细胞核因子-κB的激活作用 目的探讨严重多发伤患者伤后24小时外周血清对巨噬细胞核因子-kB的激活作用及其与预后的关系。方法将带有荧光素酶报告基因的NF-kB重组质粒转染至巨噬细胞(RAW264.7),24h后用不同的血清刺激该细胞6h。检测荧光素... 梁华平 徐祥 夏浩 费军 吴丹 王正国PTEN对巨噬细胞炎性细胞因子分泌的影响及其机制研究 被引量:2 2009年 目的:PTEN/PI-3K/Akt通路在LPS介导的炎症和内毒素血症中可能具有重要的调控作用,PTEN与LPS刺激引起的炎性介质增多之间的关系尚不明确。文中观察PTEN对LPS攻击所致RAW 264.7细胞TNF-α分泌水平的影响并探讨其可能的机制。方法:①以RAW 264.7细胞为研究对象,第1组为对照组,第2组和第3组为PTEN抑制剂组,分别提前1 h加入PTEN抑制剂200、100 nmol/L,以LPS刺激6 h后收集细胞培养上清,用ELISA法检测上清中TNF-α的水平。②将NF-κB-LUC质粒与pRL-CMV质粒共转染RAW 264.7细胞,以LPS处理细胞6 h后通过检测NF-κB反应性荧光素酶报告基因表达,观察PTEN在LPS攻击巨噬细胞时对NF-κB转录激活的影响。结果:与正常细胞相比,抑制PTEN可使LPS诱导的TNF-α分泌减少,NF-κB活性减弱。结论:PTEN可上调LPS诱导的巨噬细胞TNF-α分泌水平,可能是通过激活NF-κB的转录活性增加TNF-α的分泌水平,从而在内毒素所诱导的炎症反应中发挥重要的调控作用。 尹华华 夏浩 袁科 李磊关键词:巨噬细胞 核因子-ΚB 脂多糖 LPS对小鼠肺组织及RAW264.7细胞Akt蛋白表达及磷酸化的调控 被引量:2 2007年 目的探讨脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)在体内外对Akt蛋白表达和磷酸化水平的影响。方法用不同剂量LPS攻击RAW264.7细胞,检测不同时相点细胞Akt蛋白表达和磷酸化水平。小鼠腹腔注射LPS6h后检测肺组织Akt蛋白表达和磷酸化水平。结果不同剂量LPS攻击RAW264.7细胞,细胞Akt蛋白表达没有显著差异(P>0.05),磷酸化水平增加。而内毒素血症小鼠肺组织Akt蛋白表达没有显著变化(P>0.05),磷酸化水平减低。结论LPS在体内外对Akt蛋白磷酸化作用不同,体外Akt蛋白磷酸化水平增高,但在内毒素血症小鼠体内出现Akt蛋白磷酸化水平异常减低。 尹华华 夏浩 程晓刚 朱京慈 闫红 刘道城 李磊关键词:AKT 磷酸化 内毒素血症 严重创伤患者外周血清及内毒素对巨噬细胞核因子-κB活性的影响 被引量:1 2006年 目的探讨严重多发伤患者外周血清及内毒素对巨噬细胞核因子-κB(NF-κB)活性的影响及其意义。方法将带有荧光素酶报告基因的NF-κB重组质粒转染至小鼠巨噬细胞(RAW 264.7),24小时后用创伤或正常血清、创伤或正常血清+内毒素(LPS)刺激该细胞6小时。本研究分4组:20例正常人外周血清为正常血清组,26例严重多发伤患者伤后1、3、7天外周血清为创伤血清组,同时设正常血清+内毒素组,创伤血清+内毒素组。用荧光素酶报告基因检测试剂盒分析荧光素酶报告基因(LUC)的活性。结果各组荧光素酶报告基因活性的检测结果:创伤血清组、正常血清+LPS组和创伤血清+LPS组均显著高于正常血清组(P<0.01),创伤血清+LPS组也显著高于创伤血清组和正常血清+LPS组(P<0.01)。创伤血清组和创伤血清+内毒素组伤后1天的荧光素酶报告基因活性明显增高,伤后3天达高峰,伤后7天降低,但仍高于正常水平。创伤后并发器官损害病人的荧光素酶报告基因活性显著高于无器官损害者,其死亡率也较高。结论严重多发伤患者外周血清及内毒素刺激可明显增强巨噬细胞NF-κB活性。荧光素酶报告基因活性检测可早期预测严重多发伤后的脏器功能不全或MODS。 夏浩 顾红光 尹华华 徐祥 胡承香 梁华平关键词:创伤 内毒素 荧光素酶 巨噬细胞 PTEN对脂多糖攻击RAW264.7细胞核因子-κB转录活性的影响及其意义 2007年 目的探讨PTEN(phosphatase and tensin homolog deleted on chromosome ten)全县对脂多糖(IYS)攻击RAW264.7细胞核因子-κB转录活性的影响。方法NF-κB-LUC质粒与PTEN质粒或其突变质粒分别共转染RAW264.7细胞,通过检测NF-κB反应性荧光素酶报告基因表达,观察PTEN在LPS攻击巨噬细胞时对NF-κB转录激活的影响。结果野生型PTEN过表达可促进LPS诱导的NF-κB活性增强,而突变型PTEN则没有明显作用。结论PTEN可正性调控LPS诱导的NF-κB转录因子的激活,从而有可能在内毒素所诱导的炎症反应中发挥重要的调控作用。 尹华华 夏浩 朱京慈 程晓刚 徐祥 袁科 Qi Wan 李磊关键词:PTEN基因 细胞核因子-ΚB 脂多糖 创伤失血后大鼠单核/巨噬细胞分泌功能变化的异质性及其意义 被引量:2 2006年 目的探讨单核/巨噬细胞分泌功能异质性与创伤后机体免疫功能紊乱的相互关系。方法健康Wistar大鼠24只,按随机数字表法分为创伤前及创伤失血后1、4和7d组。分别以放射免疫法测定不同部位单核/巨噬细胞分泌白细胞介素6(IL6)及IL10的含量。结果1生理状态下,腹腔巨噬细胞(PM)IL10分泌量最高,单核细胞(Mo)次之;而Mo的IL6分泌量最高,PM次之;肺泡巨噬细胞(AM)两种细胞因子的分泌量均处于较低水平。2创伤失血后大鼠单核/巨噬细胞各部位分泌功能变化具有差异性。AM的IL6及IL10分泌均显著增加;PM的IL6分泌伤后1d和4d下降,7d上升,略高于伤前;与之相反,伤后1d和4d IL10分泌显著增高,7d降低,略低于伤前。Mo的IL6分泌持续下降,IL10分泌持续上升,至伤后7d达顶峰。结论生理状态下单核/巨噬细胞分泌能力存在异质性,创伤失血后这种异质性表现更为明显,并可能成为创伤后机体分泌功能紊乱的重要原因。 尹华华 夏浩 朱京慈 顾长国 徐发良 李磊关键词:单核细胞 巨噬细胞 白细胞介素类 内毒素耐受及其与核转录因子-κB的关系 被引量:4 2006年 夏浩 梁华平 顾红光关键词:内毒素耐受 核转录因子-KB 内毒素 信号转导 严重多发伤患者外周血清对巨噬细胞核因子-κB的激活作用及其与预后的关系 目的探讨严重多发伤患者伤后24小时外周血清对巨噬细胞核因子-κB的激活作用及其与预后的关系。方法将带有荧光素酶报告基因的NF-κB重组质粒转染至巨噬细胞(RAW264.7),24h后用不同的血清刺激该细胞6h。检测荧光素... 梁华平 徐祥 夏浩 费军 吴丹 王正国文献传递 内毒素对Akt蛋白表达与磷酸化水平的影响 被引量:1 2007年 目的探讨内毒素脂多糖(1ipopolysaccharide LPS)在体内外对Akt蛋白表达和磷酸化水平的影响。方法不同剂量LPS攻击RAW264.7细胞,检测不同时相点细胞Akt蛋白表达和磷酸化水平。小鼠腹腔注射LPS6h后检测肺组织Akt蛋白表达和磷酸化水平。结果不同剂量LPS攻击RAW264.7细胞,细胞Akt蛋白表达没有显著差异,磷酸化水平增加。内毒素血症小鼠肺组织Akt蛋白表达无显著变化,磷酸化水平降低。结论LPS在体内外对Akt蛋白磷酸化作用不同,体外Akt蛋白磷酸化水平增高,但内毒素血症小鼠体内出现Akt蛋白磷酸化水平异常降低。 程晓刚 尹华华 夏浩 闫红 刘道城 李磊关键词:脂多糖 AKT 磷酸化 内毒素血症 严重多发伤患者外周血清对巨噬细胞核因子-KB的激活作用及其与预后的关系 被引量:1 2009年 目的探讨严重多发伤患者伤后24h外周血清对巨噬细胞核因子-KB(NF—KB)的激活作用及其与预后的关系。方法收集47例严重多发伤患者及24名健康体检者的外周血清。将带有荧光素酶报告基因的NF—KB重组质粒转染至巨噬细胞(RAW264.7),24h后用不同的血清刺激该细胞6h。检测荧光素酶活性以反映血清对NF.KB的激活作用强度,同时以ELISA法测定血清中白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α((TNF—α)、白细胞介素-10(IL-10)、白细胞介素-1(IL-1)受体拮抗剂(IL-1Ra)、可溶性肿瘤坏死因子受体I(sTNFRI)水平。结果创伤血清组对巨噬细胞NF—KB的激活作用显著高于正常血清组,且创伤后MODS组、死亡组值分别显著高于无MODS组及存活组。该变化与APACHEⅡ评分呈明显的正相关,但与血清中各细胞因子水平无明显相关性。NF—KB活性在判定MODS及死亡结局的受试者作业特征曲线(ROC)下面积显著大于APACHEⅡ评分的ROC下面积。结论早期测定严重多发伤患者外周血清对巨噬细胞NF—KB的激活作用对MODS及死亡结局的判定具有参考价值。 梁华平 徐祥 夏浩 费军 吴丹 王正国关键词:多处创伤 巨噬细胞 预后