姜宝芹
- 作品数：2 被引量：5H指数：1
- 供职机构：中国检验检疫科学研究院更多>>
- 发文基金：国家质检总局科技计划项目国家公益性行业科研专项更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 哺乳动物细胞西尼罗病毒样颗粒表达、纯化及其鉴定被引量：1
- 2011年
- 目的利用哺乳动物细胞表达含有西尼罗病毒(WNV)prM和E蛋白,形成病毒样颗粒(virus-like particles,VLPs),为西尼罗病毒感染的免疫诊断试剂的研制奠定基础。方法筛选典型西尼罗病毒株,构建重组质粒,转染293T细胞,表达并纯化西尼罗病毒prM-E蛋白,利用透射电镜、免疫印迹试验、间接免疫荧光实验(IFA)和酶链免疫吸附试验(ELISA)对表达产物进行鉴定。结果重组质粒转染细胞后产生病毒样颗粒(viruslike particles VLPs),转染细胞上清纯化物中透射电镜观察到重组蛋白形成的球型颗粒,免疫印迹试验和间接免疫荧光试验表明,表达的病毒样颗粒蛋白能够与抗西尼罗病毒抗体特异结合,具有良好的抗原性;间接ELISA证实,重组蛋白可以作为抗原用于检测患者血清特异性抗体。结论在哺乳动物细胞中表达的西尼罗病毒样颗粒具有良好的抗原性,为西尼罗病毒感染快速特异诊断试剂研制奠定了基础。
- 咸庆杰姜宝芹郭雪王琳杨鹏飞张丽萍平芮巾岳启安胡孔新
- 关键词：西尼罗病毒293T细胞病毒样颗粒间接免疫荧光试验
- 快速检测西尼罗病毒胶体金免疫层析试纸条方法的建立被引量：4
- 2010年
- [目的]建立一种能快速区分、简便诊断西尼罗病毒感染的胶体金免疫层析试纸条方法。[方法]采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒,标记西尼罗病毒NS1蛋白,采用双抗原夹心法制备胶体金免疫层析试纸条,对试纸条进行特异性和敏感性评价。[结果]该试纸条可在15min之内完成检测;在敏感性上,该试纸条对阳性血清的检测较美国Focus公司商品化的ELISA试剂盒检测低1个滴度;对89份阴性血清进行检测,试纸条检出9份阳性,ELISA试剂盒检出3份阳性,两种检测的符合率为86.52%,特异性为89.89%。[结论]初步建立了一种可以用于现场快速检测西尼罗病毒的胶体金免疫层析方法,为进一步大规模应用奠定了基础。
- 王彦芳姜宝芹邢福彬杨鹏飞张丽萍平芮巾咸庆杰胡孔新岳启安
- 关键词：西尼罗病毒胶体金试纸条免疫层析法
