姜永厚
- 作品数：70 被引量：468H指数：13
- 供职机构：浙江理工大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金浙江省自然科学基金浙江省科技攻关计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学文化科学轻工技术与工程更多>>
- 同时检测多种混合感染病毒的方法
- 本发明公开了一种同时检测多种混合感染病毒的方法，包括以下步骤：1)获取待检测病毒的核酸序列，再分别在每种病毒的保守区内设计紧密相连的两条寡核苷酸鉴别探针；2)设计通用引物以及完全互补的Zip Code和cZipCode；...
- 姜永厚徐辉商晗武竺锡武赵灵燕陈伟杰丁先锋
- 文献传递
- 猪萨佩罗病毒聚合酶链式反应检测方法的建立及应用
- 2024年
- 猪萨佩罗病毒(Porcine sapelovirus,PSV)是引发猪腹泻的重要病毒之一。为开发一种能快速、准确检测PSV的聚合酶链式反应检测方法,针对PSV的保守区3D基因设计了一对特异性引物,优化了聚合酶链式反应退火温度,分析聚合酶链式反应检测方法特异性和灵敏度,并应用于猪场样品检测。结果表明:建立的聚合酶链式反应检测方法可特异性扩增出PSV目的片段,对其他非靶标猪腹泻病毒则无条带产生,检测低限为5拷贝/μL;在浙江地区采集的88个健康猪粪便样本中检测PSV阳性率为7.95%。该PSV聚合酶链式反应检测方法特异性强、灵敏度高,可应用于PSV前期诊断和防控。
- 张伟韩寅卓姜永厚
- 关键词：3D基因聚合酶链式反应特异性灵敏度阳性率
- 猪星状病毒检测和分型富集多重PCR快速诊断试剂盒
- 本发明公开了一种猪星状病毒检测和分型富集多重PCR快速诊断试剂盒，包括5对猪星状病毒基因型特异性组合引物(CP)和1条通用引物(UP)；还包括PCR反应液、PCR标准品、阳性对照品、阴性对照品；PCR标准品由PAstV1...
- 姜永厚韩寅卓文丹
- 水对稻田蜘蛛捕食功能的影响被引量：8
- 2003年
- 采用脉冲抽样法调查 ,将两年的田间飞虱每日被捕食量与捕食性天敌密度的资料分为有水和无水两组 ,分析了两种条件下飞虱被捕食量、被捕食百分率与蜘蛛密度、飞虱平均拥挤度的关系 ,并在室内模拟有水和无水分别进行了拟水狼蛛 ( Pirata subpiraticus)和食虫瘤胸蛛 ( Oedothorax insecticeps)对褐飞虱 ( N ila-parvata lugens Sta。l)的捕食功能反应。结果表明 :飞虱被捕食百分率随飞虱平均拥挤度增加而呈递减趋势 ;在同一飞虱平均拥挤度时 ,有水时飞虱被捕食量大于无水 ;有水时飞虱被捕食量与水狼蛛密度呈二次抛物线型关系 ,水狼蛛密度在每穴 1 .4头时 ,飞虱被捕食量最大 ;无水时飞虱被捕食量与水狼蛛密度呈线型关系 ;两种条件下飞虱被捕食量与微蛛密度的关系不明显。室内功能反应同样证实了水狼蛛在有水时的捕食量大于无水 ,前者比后者高 1 .5倍 ,而食虫瘤胸蛛无明显差异。
- 杨国庆吴进才王洪全姜永厚邱慧敏
- 关键词：捕食者捕食量捕食功能飞虱农业害虫
- 荧光定量PCR检测猪主要病毒的试剂盒
- 本发明利用探针荧光定量PCR技术，分2个体系能从临床样品中快速获取并检测出多种引起猪繁殖障碍和腹泻疾病的病毒，A体系检测猪圆环病毒2型(PCV2)、猪细小病毒(PPV)、伪狂犬病病毒(PRV)；B体系检测猪流行性腹泻病毒...
- 姜永厚吴海港饶品彬
- 文献传递
- 猪圆环病毒2型全基因组的克隆及病毒拯救
- 2018年
- 为构建猪圆环病毒(Porcine circovirus,PCV)2型(PCV2)感染性DNA克隆,以淋巴结病料组织中分离的PCV2细胞培养适应毒株为材料,通过基因序列分析比对,在PCV2基因组序列XbaⅠ酶切位点区设计重叠引物,进行全长扩增并克隆至pMD-18T和pBluescript SK,获得载体pMD-PCV2和pBluescript SK-PCV2。将pMDPCV2重组质粒大量扩增后,用XbaⅠ切出PCV2全基因组,在体外用T4DNA连接酶使其自环化。通过脂质体法将PCV2自环化产物转染至PK15细胞,并且经15次连续传代,分别用PCR、RT-PCR和间接免疫荧光测定(Indirect immunofluorescence assay,IFA)检测到PCV2的复制、转录和蛋白表达。该研究成功构建具有感染性的PCV2全基因组DNA,为PCV2致病机理和基因功能研究奠定基础。
- 王紫凝高章照董沁芳全滟平姜永厚
- 关键词：猪圆环病毒2型细胞转染病毒拯救
- 转Bt基因作物Bt毒蛋白在土壤中的安全性研究被引量：40
- 2003年
- 商业化的转Bt基因作物获准在田间大面积种植 ,使其释放的Bt毒蛋白对土壤生态系统的生态风险性问题成为人们关注的焦点 .本文综述了转Bt抗虫作物以植株残体、根系分泌物、花粉等形式释放的Bt毒蛋白通过田间耕作等方式进入土壤后的一些安全性问题 ,包括土壤活性颗粒对Bt毒蛋白的吸附作用 ,Bt毒蛋白在土壤中的杀虫活性、存留 。
- 白耀宇蒋明星程家安姜永厚
- 关键词：BT毒蛋白杀虫活性生物降解土壤生物
- 田间蜘蛛集团对飞虱的每日捕食量与室内、盆栽水稻的捕食作用比较
- 2002年
- 田间蜘蛛集团对害虫的精确估计一直是难以解决的问题。本文采用脉冲采样结合杀死飞虱计数法研究了田间蜘蛛集团对飞虱的每日捕食量估计并与室内、半田间 (盆栽水稻 )的功能反应的捕食作用进行了比较。获得了相对精确的捕食量定量估计值。设 t- t+△ t期间被捕食量的公式为 :Y t=(N t+ H t + M t) - (N t + 1+ Pt + Et+ D t)式中 N t、N t + 1分别为 t和 t+△ t期间飞虱数量 ;H t、M t、Pt、Et、D t分别为 t- t+△ t期间新孵化的若虫数 ,成虫迁入 ,飞虱被寄生死亡 ,成虫迁出和飞虱自然死亡数。上述数据结合一些辅助试验获得。结果表明田间蜘蛛平均每日每头对飞虱的捕食量为 0 .6 99头 ,这一捕食量比室内和半田间的捕食量要小得多。分析表明田间蜘蛛集团的捕食百分率与飞虱密度呈二次抛物线关系 ,即飞虱密度低于中等密度。在每穴 10头飞虱左右 ,捕食量和捕食百分率最高。在有一定存量蜘蛛时 ,捕食量与微蛛、狼蛛数量呈显著的二次线性回归关系 ,其回归方程为 :Y=0 .6 2 0 6 4- 0 .0 6 6 7(± 0 .0 12 187) X1- 0 .19116 (± 0 .0 2 885 2 1)X2± 0 .0 85 19式中 Y为蜘蛛捕食百分率 ,X1、X2分别为微蛛、狼蛛数量。回归方程的偏回归系数为负值 ,且狼蛛的负回归系数是微蛛的 2 .87倍 ,表明随蜘蛛密度增加 ,飞?
- 吴进才姜永厚邱慧敏杨国庆
- EvaGreen实时荧光定量PCR检测猪圆环病毒2型方法的建立
- 2014年
- 根据GenBank中的猪圆环病毒2型(PCV2)ORF4基因序列设计一对特异性引物,通过常规PCR扩增PCV2的ORF4基因,并将其纯化的PCR产物克隆入pMD18-T载体中,构建重组质粒。应用该重组质粒进行EvaGreen实时荧光定量PCR,建立了PCV2 DNA的标准曲线,并进行熔解曲线分析。结果显示:建立的EvaGreen实时荧光定量PCR特异性强,与其他非靶标病毒基因不发生交叉反应;灵敏度高,最高可检测到10拷贝/μL的病毒量;重复性好,3个浓度的批间和批内的变异系数均小于2.5%;对118份临床样品进行检测,阳性样品25份,阳性率为21.2%,检测结果与普通PCR相符率为99.2%,其中一份样品经荧光PCR检测为PCV2阳性,普通PCR检测为阴性。结果表明,建立的EvaGreen实时荧光定量PCR方法具有特异性强、敏感度高、重复性好、简便快捷等特点,可用于临床PCV2感染的早期诊断以及分子流行病学调查。
- 蔡晔饶品彬吴海港姜永厚
- 关键词：猪圆环病毒2型实时荧光定量PCR
- 五种猪腹泻病毒多重实时荧光定量PCR快速诊断试剂盒及应用
- 本发明公开了五种猪腹泻病毒多重实时荧光定量PCR快速诊断试剂盒，包括5对病毒特异性引物，还包括荧光定量PCR反应液、阳性对照品、阴性对照品、定量PCR标准品。本发明还公开了上述试剂盒在多重实时荧光定量检测五种猪腹泻病毒感...
- 姜永厚刘高鹏
- 文献传递
