孟祥凯
- 作品数：12 被引量：85H指数：5
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- 发文基金：中国博士后科学基金山东省科技攻关计划山东省优秀中青年科学家科研奖励基金更多>>
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- 冰冻切片免疫酶和免疫荧光技术快速检测REV抗原
- 2007年
- 以禽网状内皮组织增生病病毒(reticuloendotheliosis virus,REV)的单克隆抗体11B154作一抗,建立了在冰冻切片中快速检测REV的免疫酶(IHC)和免疫荧光技术(Mc-IFA)。运用两种技术对人工接种REV的肉种鸡和疑似REV田间病例的肝脏、脾脏、腺胃、心脏、骨髓等器官的组织进行了检测,并同病毒分离方法进行了敏感性和特异性的比较。结果表明:在人工接种的肉种鸡中,采用IHC、Mc-IFA和病毒分离方法结果一致,均为阳性;在送检的疑似RE的24份病料中,用IHC检测出阳性率51.7%(13/24),Mc-IFA检测出阳性率62.5%(15/24),其中13份存在交叉;病毒分离的阳性率为37.5%(9/24),阳性数包括在13份IHC阳性病料中。由此表明冰冻切片免疫酶和免疫荧光技术都可用于临床快速检测,其中免疫荧光可用于早期的粗检,而免疫酶可用于细胞内抗原定位。
- 朱国刁秀国成子强王桂花高婷婷孟祥凯
- 关键词：REV病理组织学观察冰冻切片
- 地方鸡品种遗传多样性的微卫星标记研究被引量：6
- 2008年
- 采用微卫星标记技术检测了山东省3种地方鸡种：汶上芦花鸡、济宁百日鸡和日照鸡的遗传多样性，在40种微卫星引物中筛选出多态性丰富且扩增条带清晰稳定的6个引物。统计分析了各群体的等位基因数（NA）、多态信息含量（PIC）、平均杂合度（H）、群体间的遗传距离（DS）和相似系数（I）。采用UPGMA法构建系统发生树。结果表明：3个地方鸡种在6个微卫星位点上共发现了15个等位基因，每个位点的等位基因数为2—3个；每个群体的平均等位基因数分别为2．5、2．2和2；大小在110～300bp之间，期望杂合度与观测杂合度比较接近。芦花鸡（W）多态信息含量最大，为0．3075；日照鸡（R）中最小，为0．2915。以Nei氏遗传距离进行UPGMA聚类分析，结果表明：百日鸡（J）与日照鸡（R）间的遗传相似系数最大，为0．9832；遗传距离最小，为0．0170。3个品种鸡可聚为2类，百日鸡（J）与日照鸡（R）聚为一类，芦花鸡（W）独立聚为一类。
- 崔景香李传忠孟祥凯尹逊河王慧
- 关键词：微卫星标记芦花鸡琅琊鸡
- 商品蛋鸡成髓细胞瘤、血管瘤型J亚群白血病病理学初报被引量：46
- 2008年
- 2007年7月,山东某鸡场8 000余只150日龄海兰褐鸡发病,病鸡特征性表现衰竭、消瘦和血管瘤。大体病变:内脏器官肿大,表面及切面可见大小不等的灰白色结节;血管瘤大小不等、富有弹性,内含大量血液,血液内富含成髓细胞;组织学病变:肝脏、脾脏、骨髓、肠管和胰腺浆膜面有大量的胞质含嗜碱性颗粒的成髓细胞增生,同时在肠管固有层出现明显的肠腺上皮细胞和网状细胞增生,腺胃固有层出现明显的网状细胞增生,血管瘤为典型的海绵状血管瘤,可见其发展的各个阶段;免疫组织化学检测:经REV与ALV-J单克隆抗体检测发现,REV抗原阴性,而ALV-J抗原强阳性。在骨髓、肝脏及其它组织内的成髓细胞内、血管瘤海绵状壁层内皮细胞、增生的肠腺上皮细胞、腺胃腺小管上皮细胞、网状细胞内及部分间质内可见强阳性信号。因此,此病为成髓细胞瘤、血管瘤型并伴发多种肿瘤的J亚群白血病,这在国内外尚未见报道。
- 成子强刘思当孟祥凯张洪海刁秀国刘青崔治中
- 关键词：商品蛋鸡血管瘤J亚群白血病病理学免疫组织化学
- 肉种鸡MDV和REV人工共感染的动态病理学与抗原定位研究被引量：9
- 2008年
- 【目的】深入了解MDV与REV人工共感染肉种鸡后疾病的发生、发展状况,为二者临床复杂的混合感染提供确实的鉴别诊断方法和明确的诊断时间。【方法】MDV和REV强毒株人工共感染1日龄肉种鸡,定期剖检,进行病理组织学、细胞凋亡、免疫组化和肿瘤组织的超微结构观察。【结果】肝、胰腺、腺胃、盲肠扁桃体、心肌在感染后1周出现以小淋巴细胞浸润为主的炎症,2～9周时,大部分实质器官出现以幼稚淋巴细胞、大中小淋巴细胞为主的渐进性增生灶,部分增生灶中可见原始网状细胞和马立克氏病细胞;10周后免疫器官实质细胞出现明显的凋亡;免疫组化显示,肝、脾、法氏囊、胸腺等在2周时呈双抗原阳性;电镜下,肝脏肿瘤组织中可见多形态淋巴细胞,核分裂相和细胞凋亡同时存在,同一细胞中可见MDV和REV两种病毒粒子。【结论】MDV与REV共感染对病程起协同和促进作用,发病早,病变明显;免疫酶及荧光方法可用于共感染的早期诊断(2周以前);而后期(4周以后)可通过病理组织学进行鉴别诊断,两种病毒粒子、马立克氏病细胞、原始网状细胞、多形态和幼稚淋巴细胞可作为诊断依据。
- 刁秀国张利成子强朱国王桂花孟祥凯高婷婷崔治中
- 关键词：网状内皮组织增殖病病毒共感染动态病理学抗原定位肉种鸡
- 商品蛋鸡成髓细胞瘤、血管瘤型J亚群白血病病毒特性的研究被引量：17
- 2008年
- 2007年7月山东某蛋鸡场150日龄海兰褐蛋鸡发病，前期经病理学和免疫组织化学检测证明和ALV—J密切相关。取4只病鸡的肝组织处理后接种鸡胚成纤维细胞（CEF）培养，用ALV—J单抗G2-3进行间接免疫荧光检测，结果呈现强阳性，将反应为阳性的4株病毒分别命名为WS0701、WS0702、WS0703和WS0704；根据ALV-J原型株HPRS-103的序列设计1对针对外源性ALV—J的引物P1和P2，提取阳性CEF基因组DNA作为模板，PCR扩增后，得到长度为924bp的片段；PCR扩增产物测序结果显示，与HPRS-103的同源性为95．0％～97．5％，与国内分离株的同源性为92．0％～95．9％；遗传变异分析结果表明成髓细胞瘤型、血管瘤型ALV-J与国内毒株的同源性较远，而与HPRS-103的同源性最近，这说明ALV—J在蛋鸡体内复制的过程中有返祖现象，并呈现了新的肿瘤学特征。
- 孟祥凯刘青王海伦张洪海邱波刘功振成子强
- 关键词：商品蛋鸡J亚群白血病免疫学病毒学
- 中国芦花鸡中出现马立克氏病被引量：8
- 2008年
- 首次报道了中国特有鸡种——芦花鸡马立克氏病的发病情况。山东某养殖场散养的芦花鸡,于开产前出现颜面苍白,机体进行性消瘦,瘫痪,最后衰竭死亡,死亡率达10%。经大体剖检发现,病鸡的内脏器官有不同程度的增大,在肝、肾等器官出现散在的肿瘤样结节,经组织学检查发现,增生的病灶中心为多种细胞成分,包括大、中、小淋巴细胞和网状细胞。用I型马立克氏病(Marek’s disease,MD)的特异性引物132 bpr(132 bprepeat)进行PCR检测,阳性率为88.9%(8/9);3个阳性PCR产物测序,其基因序列与MDVGA原型株的同源性分别为95.89%、97.96%和97.52%,上述检测表明此肿瘤是由MDV感染引起的。
- 高婷婷孟祥凯成子强张洪海刘青
- 关键词：马立克氏病病理学PCR
- REV感染肉种鸡后动态病理学观察与抗原分布及检测被引量：3
- 2008年
- 用网状内皮组织增生病病毒(REV)人工接种1日龄肉种鸡,定期剖杀,通过病理组织学观察病变特征及肿瘤的发生发展;用免疫组化、PCR检测抗原与病毒在体内各器官的分布规律;超薄切片观察肿瘤细胞、病毒的形态。结果显示,肝脏、脾脏、胸腺、法氏囊较早出现明显的肿瘤增生灶,在这些器官内免疫组化阳性信号出现最早,且信号最强,在5周龄时,心肌、腺胃、肺、肾、骨髓等器官才开始出现阳性信号,但呈中度的阳性反应,9周龄后阳性信号开始减弱。肝脏、脾脏、胸腺、法氏囊、骨髓扩增出REV的LTR基因片段,超薄切片显示病毒多分布在胞浆内和细胞间隙内。研究发现病变明显的组织中,阳性反应较强,肿瘤细胞增生明显,即强阳性反应的组织器官易形成肿瘤转移灶及肿瘤结节,同时,抗原最早出现在这些器官说明其中可能存在REV的靶细胞。虽然阳性信号在腺胃出现较晚,但90%以上的腺胃肿大说明腺胃也是REV的主要侵害器官。
- 朱国刁秀国成子强王桂花孟祥凯高婷婷
- 关键词：病理组织学抗原分布电镜观察
- 地方鸡品种遗传多样性的微卫星标记研究
- 采用微卫星标记技术检测了山东省3种地方鸡种:汶上芦花鸡、济宁百日鸡和日照鸡的遗传多样性,在40种微卫星引物中筛选出多态性丰富且扩增条带清晰稳定的6个引物.统计分析了各群体的等位基因数(NA)、多态信息含量(PIC)、平均...
- 崔景香孟祥凯薛彦斌李美芹苗锦山周苗苗代惠洁
- 关键词：微卫星标记
- 文献传递
- 肉种鸡马立克氏病的动态病理组织学研究被引量：2
- 2007年
- 通过人工感染马立克氏病病毒强毒株的1日龄肉种鸡，定期剖检，进行病理组织学和肿瘤组织的超微结构观察，为目前复杂的禽肿瘤性疾病混合感染鉴别诊断及早期诊断提供病理学依据。结果表明，光镜下，感染后1周各组织器官主要为炎性变化或变化不明显；2周时，部分器官发现一种胞体较大，胞浆强嗜碱性，其细胞核只有极少或无详细结构的马立克氏病细胞。大部分组织器官淋巴细胞、网状细胞增生，增生程度日益加重，大脑有血管套现象；7周时，肌胃内动脉首先出现粥样硬化，在10～13周时，大脑等相继出现该变化。电镜下，肝脏肿瘤组织有大小不同的淋巴细胞和马立克氏病病毒，并见淋巴细胞的凋亡和核分裂相。本实验通过动态病理学研究发现，马立克氏病细胞和动脉粥样硬化可作为MD肿瘤产生前早期诊断的依据。
- 刁秀国成子强朱国王桂花孟祥凯高婷婷
- 关键词：马立克氏病超微结构
- J亚群禽白血病病毒gp37基因siRNA表达载体的构建及体外干扰效应的初步研究
- 本研究以禽白血病病毒J亚群(ALV-J)gp37基因为靶向基因，以RNA干扰的方法，干扰其表达，以达到限制ALV-J在细胞内复制的目的。
参照Takara和Ambion公司的成功的经验并利用Ambion公司的在...
- 孟祥凯
- 关键词：J亚群禽白血病病毒靶向基因基因序列
- 文献传递
