宋建华
- 作品数:35 被引量:97H指数:9
- 供职机构:中国科学院武汉病毒研究所更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划国家科技重大专项更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学化学工程农业科学更多>>
- 胡萝卜素的提取方法
- 本发明公开了一种胡萝卜素的提取方法,将三孢布拉氏霉菌菌体用石油有机溶剂萃取胡萝卜素,得到萃取液,所得萃取液用适量的碱在40-60℃进行精炼中和其中的游离脂肪酸,得到的萃取液用清水或盐水洗涤至中性,得到中性萃取液,然后再将...
- 童骁宋建华陈明锴陈涛
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- 杆状病毒介导的基因表达及p35抗生物和非生物胁迫的研究
- 杆状病毒是一类专一性感染节肢动物的DNA病毒,作为生物杀虫剂广泛应用于害虫防治。随着分子水平的基础研究迅猛发展,杆状病毒作为一种新型的基因治疗载体受到人们的高度重视。我们的研究拓宽了杆状病毒敏感细胞范围,同时,通过杆状病...
- 宋建华
- 关键词:杆状病毒基因治疗载体转基因烟草基因表达
- 文献传递
- 一株高产磷酯酶C的新菌株
- 本发明是一株高产磷酯酶C的新菌株是气单胞菌属,其代谢产物是磷酯酶C,目前,国内外未见报道气单胞菌属的菌产磷酯酶C,与国外其它属种产磷酯C的菌种比较,产量高、成本低、工艺简单。
- 陈涛孙松柏王近芬童骁刘芳蔡陈崚刘嘉蓉陈蔚宋建华宋冬林
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- 乙型肝炎病毒C型重组杆状病毒的构建及鉴定
- 目的:构建乙型肝炎病毒(HBV)中国株及其拉米夫定耐药相关变异株的重组杆状病毒.方法:将1.2倍HBV基因组(血清adr型、基因C型)连接至杆状病毒的转移载体pFastBacI上,然后转化入DH10Bac菌株中,在细菌内...
- 于德敏 张欣欣 张东华 陆志檬 詹勤 姜节洪 宋建华陈新文
- 关键词:肝炎病毒YMDD变异杆状病毒乙型肝炎
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- 一株高产磷酯酶C的菌株
- 本发明是一株高产磷酯酶C的新菌株是气单胞菌属,其代谢产物是磷酯酶C,目前,国内外未见报道气单胞菌属的菌产磷酯酶C,与国外其它属种产磷酯C的菌种比较,产量高、成本低、工艺简单。
- 陈涛孙松柏王近芬童骁刘芳蔡陈崚刘嘉蓉陈蔚宋建华宋冬林
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- 胡萝卜素的提取方法
- 本发明公开了一种胡萝卜素的提取方法,将三孢布拉氏霉菌菌体用石油有机溶剂萃取胡萝卜素,得到萃取液,所得萃取液用适量的碱在40-60℃进行精炼中和其中的游离脂肪酸,得到的萃取液用清水或盐水洗涤至中性,得到中性萃取液,然后再将...
- 童骁宋建华陈明锴陈涛
- 文献传递
- 粘质沙雷氏菌武汉株PLA_1基因的克隆和序列被引量:2
- 2002年
- 通过鸟枪法构建了粘质沙雷氏菌SerratiamarcescensCW W 90 3菌株的基因组文库。使用LB 卵黄平板 ,从中筛选出 1条含磷酯酶基因的 3 0 10bp的EcoRⅠ片段。通过测序及亚克隆分析 ,发现 1个编码磷酯酶的基因phlA ,长度为 96 3bp ,编码 1个由 32 0个氨基酸组成 ,分子量为 33ku的磷酯酶PHL。PHL的氨基酸序列与多种细菌产生的磷酯酶A1的氨基酸序列有很高的同源性。在 phlA下游发现 1个 75 6bp的ORF phlB ,编码 1条 2 5 1个氨基酸组成的蛋白质 ,分子量为 2 7ku ,将其命名为PHLS ,此基因的功能有待于进一步研究。
- 苏磊童骁宋建华孙松柏陈涛
- 关键词:基因克隆
- 杆状病毒介导的GFP转染与退变的兔椎间盘髓核细胞
- 2005年
- 目的:检测杆状病毒转染正常与退变的椎间盘髓核细胞的效率以及杆状病毒介导的GFP基因(Ac/CMV/GFP)在正常与退变细胞中的表达水平。方法:取新西兰大白兔的髓核细胞进行离体培养,第1组:健康幼兔;第2组:椎间盘退变模型兔;第3组:椎间盘发生自然退变的成年兔。以200MOI杆状病毒介导的绿色荧光蛋白(GFP)转染离体培养的细胞,于第48h采用流式细胞仪检测转染效率,同时采用HPIAS2000图像分析软件半定量分析外源性GFP基因的表达水平。结果:3组细胞被转染的百分率分别为84.4±3.4,82.9±5.7,81.8±5.5(P>0.05)。外源性基因表达荧光蛋白的光密度值分别为0.0054±0.0029,0.0052±0.0032,0.0056±0.0031(P>0.05)。结论:杆状病毒转染椎间盘髓核细胞的效率与椎间盘退变程度无关,杆状病毒介导的外源性基因能在正常与退变的髓核细胞中高水平的表达。
- 刘小云宋建华李康华王锡阳梁昌镛陈新文
- 关键词:椎间盘退变髓核细胞
- 乙型肝炎病毒C型重组杆状病毒的构建及鉴定被引量:2
- 2006年
- 目的构建乙型肝炎病毒(HBV)中国株及其拉米夫定耐药相关变异株的重组杆状病毒.方法将1.2倍HBV基因组(血清adr型、基因C型)连接至杆状病毒的转移载体pFastBacI上,然后转化入DH10Bac菌株中,在细菌内的辅助质粒辅助作用下与杆状病毒基因组Bacmid发生位点特异性转座,形成含有HBV基因组的重组Bacmid,转染昆虫sf9细胞后,包装产生HBV重组杆状病毒vAcHBVc.采用连续聚合酶链反应(PCR)引入方法进行定点突变,构建YVDD变异株质粒,并按照上述方法构建HBV YVDD变异株重组杆状病毒vAcHBVYVDD,扩增并滴定.为便于观察重组杆状病毒的转染和扩增效率及病毒滴度测定,同时构建了含绿色荧光蛋白(GFP)的HBV重组杆状病毒vAcGFPHBVc.结果 HBV野毒株和变异株重组杆状病毒均构建成功,通过免疫空斑及TCID50定量测定病毒滴度为106~108pfu/ml左右.结论应用Bac to Bac杆状病毒表达系统可有效快速地构建HBV C型重组杆状病毒,以用于HBV体外复制系统的建立,为HBV野毒株及变异株生物学特性的研究及抗病毒药物的筛选提供技术平台.
- 于德敏张欣欣张东华宋建华陆志檬詹勤姜节洪陈新文
- 磷酯酶C对家兔血小板聚集和超微结构的影响被引量:12
- 2003年
- 目的 应用电镜研究磷酯酶C(phospholipaseC ,PLC)对家兔血小板聚集和超微结构的影响 ,以探讨用药后PLC抗血小板聚集作用的机制。方法 家兔颈动脉插管取血 ,制备PRP ,将其分为 4组 :①空白对照组 ;②生理盐水组 ;③ 0 5UPLC组 ;④ 2 5UPLC组。 2~ 4组分别用ADP诱导聚集 ,测出其聚集抑制率 ,各组分别制成超薄切片样品进行电镜观察、摄片。结果 0 5、2 5UPLC明显抑制血小板聚集反应 ,聚集抑制率分别为 86 0 3 %± 12 6%和 82 47%±5 49% ;0 5UPLC抑制血小板形成伪足 ,α颗粒和致密颗粒较多 ,OCS管腔较小 ,其超微结构较生理盐水组变化小 ;2 5UPLC处理血小板的形态结构和超微结构与空白对照组无差异 ,血小板呈圆形或椭圆形 ,边缘光滑 ,无伪足样突起 ,α颗粒、致密颗粒、OCS等正常分布于胞质中。结论 PLC明显抑制ADP诱导的血小板聚集反应及其超微结构的改变 。
- 宋建华陈明锴王常高孙松柏陈涛
- 关键词:血小板超微结构抗血小板聚集作用