师东方
- 作品数：100 被引量：310H指数：9
- 供职机构：东北农业大学动物医学学院更多>>
- 发文基金：国家科技支撑计划黑龙江省“十五”科技攻关项目黑龙江省科技攻关计划项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生文化科学更多>>
- 鸡空肠弯曲菌的分离鉴定被引量：3
- 1997年
- 自哈尔滨地区某疑似空肠弯曲菌感染鸡场随机取５０份２０周龄蛋鸡新鲜粪便样本，用改良Ｃａｍｐ－ＢＡＰ培养基分离培养，经一系列生化试验鉴定，有１１株分离培养物为空肠弯曲菌，分离率为２２％。
- 师东方周志勇向毅王德兆葛庆武
- 关键词：空肠弯曲菌鸡病
- 大肠杆菌菌毛基因多重PCR检测方法的建立与初步应用被引量：4
- 2020年
- 为建立一种可以同时扩增大肠杆菌(E.coli)F4、F5、F6、F41和F18菌毛基因保守序列的多重PCR检测方法,本研究设计合成5对分别针对F4、F5、F6、F41和F18菌毛基因的特异性引物,以具有相应菌毛基因的E.coli参考菌株DNA为模板,通过对多重PCR反应条件的优化,建立了检测F4、F5、F6、F41和F18菌毛基因的多重PCR方法。所建立的多重PCR方法能够特异性扩增F4、F5、F6、F41、F18菌毛基因的目的片段,大小分别为770 bp、533 bp、422 bp、643 bp和1140 bp,该方法对沙门氏菌、猪丹毒杆菌、巴氏杆菌以及无菌毛基因的E.coli等参考菌株均无特异性扩增片段,检出F4、F5、F6、F41和F18菌毛基因的最低活菌浓度分别为5.3×10^5cfu/mL、3.7×10^6cfu/mL、3.1×10^5cfu/mL、3.7×10^7cfu/mL、6.9×10^5cfu/mL。用不同批次的引物和试剂进行3次多重PCR检测均能扩增出目的条带,表明建立的多重PCR方法有很好的批内和批间重复性。对90株大肠杆菌临床分离菌株菌毛基因进行检测,F4阳性率为3.33%,F5阳性率为2.22%,未检测到F6、F41和F18阳性菌株,其检测结果与常规单一PCR的检测结果一致。研究表明:建立的E.coli菌毛基因多重PCR分型方法具有很好的特异性、敏感性和重复性,可用于E.coli分离菌株菌毛基因型的快速鉴定,同时提高了检测效率。
- 孙思萌侯美佳冯启峥石博刘嘉利师东方
- 关键词：大肠杆菌多重PCR
- 旋毛虫各隔离种雌虫生殖能力的实验研究被引量：4
- 2001年
- 本试验对旋毛虫各隔离种雌虫体外产新生幼虫能力进行了研究。结果显示 ,猪旋毛虫和旋毛形线虫 (Trichinellaspiralis)雌虫体外培养 2 4h平均产新生幼虫数分别为 6 6 .0 0± 7.34和 76 .2 0± 7.5 7,而犬旋毛虫和本地毛形线虫 (Trichinellanativa)分别是 2 8.80± 4.30和 2 2 .0 0± 3.2 2 ,前者在雌虫体外产幼虫能力上明显高于后者。研究结果表明 ,黑龙江猪旋毛虫相当于旋毛虫形线虫 。
- 张桂红宋铭忻路义鑫师东方
- 关键词：旋毛虫雌虫体外培养隔离种
- 旋毛虫各隔离种对小鼠的感染性研究被引量：4
- 2001年
- 比较研究了黑龙江省猪、犬旋毛虫及国际标准虫种 :旋毛形线虫 (Trichinella spiralis)和本地毛形线虫 (Trichinellanativa)对小鼠的感染性异同。结果表明 ,四者对小鼠的感染力存在着显著差异 ,猪旋毛虫和旋毛形线虫在小鼠体内的繁殖力指数 (RCI)分别为 12 1.0 1± 7.80和 149.86± 7.47;而犬旋毛虫和本地毛形线虫的 RCI分别为 6 0 .98± 5 .0 5和 5 5 .15± 4.6 9。由实验结果可认为黑龙江省的猪旋毛虫相当于旋毛形线虫 ,而犬旋毛虫相当于本地毛形线虫。
- 宋铭忻张桂红路义鑫师东方
- 关键词：旋毛虫感染性隔离种小鼠
- 影响大肠杆菌不耐热肠毒素2型毒性的氨基酸初步筛选
- 2022年
- 为探究影响产肠毒素大肠杆菌(ETEC)不耐热肠毒素2型(LT2)毒性的关键氨基酸及其突变重组蛋白的免疫原性,本研究扩增了LT2编码基因elt2,并采用重叠延伸PCR(SOE PCR)方法分别对其A亚基进行R5K、H42A、S59K、V95K、Y102K和E110K的单突变,将elt2及其6个突变基因分别双酶切后克隆于pET-30a中构建重组大肠杆菌pET-30a-elt2/BL21、pET-30a-R5K/BL21、pET-30a-H42A/BL21、pET-30a-S59K/BL21、pET-30a-V95K/BL21、pET-30a-Y102K/BL21、pET-30a-E110K/BL21,经IPTG诱导表达了重组LT2(rLT2)及其突变重组蛋白mrLT2-R5K、mrLT2-H42A、mrLT2-S59K、mrLT2-V95K、mrLT2-Y102K、mrLT2-E110K;利用细胞毒性试验和小鼠致病性试验比较了rLT2和突变重组蛋白对小鼠肾上腺皮质瘤(Y1)细胞的毒性作用及对小鼠的致病性,并将rLT2和mrLT2-V95K作为免疫原接种小鼠检测其对小鼠的免疫原性。结果显示,突变重组蛋白对Y1细胞的毒性作用均弱于rLT2,其中mrLT2-V95K对Y1细胞的毒性作用最弱为1.145×10^(1)TCID_(50)/0.1 mL;rLT2及该突变重组蛋白对小鼠均无致病性,表明小鼠也不适合用于LT2的致病性检测。mrLT2-V95K免疫BALB/c小鼠的血清特异性IgG抗体效价和对rLT2的中和抗体效价分别为1:102 400和1:32,与rLT2的免疫原性无显著差异。本研究首次证实LT2 A亚基的aa95对LT2细胞毒性作用的影响较明显,其突变重组蛋白具有良好的免疫原性,为大肠杆菌减毒疫苗研究提供了重要科学信息。
- 石博侯美佳孙思萌刘嘉利董秀梅杨巍杨巍师东方
- 关键词：产肠毒素大肠杆菌定点突变重组蛋白免疫原性
- 猪传染性胃肠炎重组N蛋白抗原及纯化方法
- 本发明提供的是一种猪传染性胃肠炎重组N蛋白抗原及纯化方法。从纯化后的TGEV病毒液中进行病毒核酸提取，以TGEV N基因的上游引物Li01进行病毒基因组cDNA的合成，再使用TGEV N基因的上、下游引物，进行N基因的扩...
- 李一经唐丽杰师东方马广鹏
- 文献传递
- 猪传染性胃肠炎病毒核衣壳N蛋白基因的克隆与鉴定被引量：7
- 2002年
- 根据文献已发表的猪传染性胃肠炎病毒 (TGEV)cDNA基因序列 ,设计和合成 1对引物 ,以TGEVTH 98强毒株基因组mRNA为模板 ,通过RTPCR技术扩增其N基因 ;将RTPCR产物按正确的阅读框架 (ORF)定向克隆到载体pProEXHTb上 ,重组质粒PHN转化进大肠埃希氏菌DH5α株 ,通过酶切分析及序列测定表明已成功获得了TGEVN基因的无性繁殖体系。TH 98强毒株的N基因与Purdue 115株、FS772 / 70株、TO14株、96193 3株及TFⅠ株的核苷酸序列的同源性分别为 99%、97%、97%、95 %和 96% ,氨基酸序列的同源性分别为 99%、97%、98%、96%和 97%。
- 唐丽杰师东方李一经王荣军
- 关键词：传染性胃肠炎病毒N基因克隆核衣壳
- 复合益生菌添加剂对奶牛隐性乳房炎及生产性能的影响被引量：11
- 2015年
- 在动物饲料中加入添加剂主要是为了增加饲料营养价值,提高动物生产性能,保证动物健康。益生菌添加剂因其特有的安全性和多功能性已成为饲料添加剂的热点之一。试验将枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、嗜酸乳杆菌和酿酒酵母菌(4种菌菌数比例约为1:1:1:1)组成的复合益生菌制剂以每头奶牛每天200g的量添加到奶牛日粮中,连续添加7d,观察其对奶牛隐性乳房炎及奶牛生产性能的影响。结果表明:在隐性乳房炎奶牛中,试验期间,隐性乳房炎的治愈率为90%;在健康奶牛中,与试验前比较,试验期奶产量提高了18.87%(P<0.05),奶中的乳蛋白率、乳糖质量分数和乳脂率分别提高4.10%(P<0.05)、2.31%(P<0.05)、3.18%(P<0.05)。实验表明,日粮中添加复合益生菌制剂既能提防治奶牛隐性乳房炎,又能提高奶牛的生产性能。
- 张岩师东方田国彬
- 关键词：益生菌添加剂奶牛
- 产肠毒素大肠杆菌F5菌毛基因的克隆与表达被引量：2
- 2008年
- 应用PCR方法从产肠毒素性大肠杆菌(ETEC)中扩增出不含信号肽序列的F5菌毛抗原基因片段,克隆测序后将其连接到大肠杆菌表达载体pET-30a(+)中,转化工程菌BL21,经IPTG诱导表达。经SDS-PAGE和Western Blot分析,重组蛋白在BL21中得到表达并与F5菌毛单因子血清发生明显反应。
- 于迪付海兵丁琳师东方单安山
- 关键词：产肠毒素性大肠杆菌基因克隆蛋白表达
- 一株混合O血清型猪水肿病大肠杆菌的分离与鉴定被引量：5
- 2009年
- 从具有典型临床症状和病理剖检变化的病死猪肠系膜淋巴结中分离到的1株革兰阴性细菌,通过菌体形态观察,染色、生化试验、SLT-Ⅱe基因检测、O血清型鉴定、动物试验,其结果证明分离菌为O26、O139、O142混合血清型,产SLT-Ⅱe大肠埃希氏杆菌。SLT-Ⅱe基因序列与GenBank上发表的参考序列(序列号为AY368993)的同源性达100%。用粗提的毒素经腹腔注射小鼠后引起小鼠后肢麻痹、死亡和胃肠水肿。
- 师东方葛俊伟王明翠许亚卓李海滨单安山
- 关键词：猪水肿病大肠杆菌
