康涵
- 作品数：4 被引量：16H指数：2
- 供职机构：复旦大学更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项上海市青年科技启明星计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- M/XDR-TB的快速分子检测和耐药特征分析被引量：11
- 2011年
- 目的 使用分子线性探针杂交技术结合仪器法液体快速培养分析耐多药（ multidrug resistant,MDR）及广泛耐药（extensively drug resistant,XDR）结核分枝杆菌（Mycobacterium tuberculosis,MTB）的耐药基因和表型特征.方法 运用GenoType MTBDR试剂盒检测M/XDR-TB菌株中各耐药基因的突变位点及类型,平行用BD MGIT960系统检测所选菌株对一线及二线抗结核药物的敏感性.结果 （1）94株MDR-TB经MGIT960检测,乙胺丁醇（ethambutol,EMB）、阿米卡星（amikacin,AMK）、氧氟沙星（ofloxacin,OFX）及莫西沙星（moxifloxacin,MFX）的耐药率分别为36.2%、17.0%、54.3%和55.3%.XDR-TB检出率为13.8%.（2）以MGIT960药敏结果作为参考标准,94株MDR-TB中,GenoType MTBDRplus检测MTB对异烟肼（isoniazid,INH）、利福平（rifampin,RFP）耐药的符合率分别为86.2%和95.7%；GenoType MTBDRsl检测MTB对EMB、AMK、OFX及MFX耐药的敏感性分别为47.1%、81.3%、94.1%、94.2%；特异性分别为75.0%、98.7%、90.7%、92.9%.（3）rpoB基因突变中以S531L最多；INH耐药主要由katG基因发生突变导致,以S315T1类型居多；gyrA突变位点主要集中在第94位密码子.所测菌株中有23例为复合耐药,7例为未知突变.结论 M/XDR-TB中,INH、RFP、AMK、OFX及MFX耐药株大多分别是由katG、rpoB、rrs及gyrA突变导致,乙胺丁醇与embB之间的耐药关联性相对较低.GenoType MTBDR试剂盒检测M/XDR-TB敏感性和特异性较好,可以在未获得传统细菌表型药敏结果前指导临床用药治疗.
- 范齐文郭建张慧涨吴晓渊胡香南钱雪琴邓桂林康涵吴文娟
- 关键词：结核分枝杆菌药物敏感试验
- 丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶在结核分枝杆菌致病机制中的作用被引量：5
- 2012年
- 丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(STPK)是一类真核细胞样的蛋白激酶,是分枝杆菌生长和代谢的重要调节因子,参与其多种细胞活动(如细胞和菌落形态、葡萄糖和谷氨酰胺转运、吞噬体-溶酶体融合、转录因子活性等)的调节。结核分枝杆菌编码产生11种STPK(PknA、PknB、PknD～PknL),可分为5群(ABL群、HED群、FIJ群、PknG和PknK)。ABL群STPK中的PknA和PknB主要与细胞形态有关;PknL可磷酸化DNA结合蛋白Rv2175c。HED群参与细菌的多种重要生理活动并与致病性密切相关。FIJ群的PknF可能与葡萄糖转运和细菌分裂有关;PknI可能参与调节有害环境中的细菌生长;PknJ可磷酸化多种功能蛋白,进而影响细菌代谢活动。PknG参与谷氨酸盐/谷氨酰胺代谢,并与致病性有关。PknK可能对调节体内环境压力下的生长起重要作用。综上所述,STPK可能参与结核分枝杆菌致病过程中的多个环节,但详细机制还不清楚,仍需进一步研究。
- 康涵吴文娟
- 关键词：结核分枝杆菌发病机制
- 卡介苗初免-DNA疫苗加强免疫策略的抗结核保护效果研究
- 目的:制备表达免疫优势抗原Ag85A的DNA疫苗，以其加强卡介苗(BacillusCalmette-Guerin，BCG)初免的作用，并评价其抗结核(Tuberculosis，TB)的作用;同时分析疫苗接种后诱导的T细胞...
- 康涵
- 关键词：抗结核作用卡介苗DNA疫苗免疫策略T细胞应答
- 文献传递
- Ag85A DNA疫苗加强免疫显著提高卡介苗初免小鼠的抗结核T细胞免疫应答
- 2013年
- 目的构建表达结核分枝杆菌（Mycobacterium tuberculosis，Mtb）免疫优势抗原Ag85A的DNA疫苗，分析其加强免疫后提高卡介苗（BCG）初免小鼠的抗结核T细胞免疫应答。方法以Mtb毒株H37Rv基因组DNA为模板，PCR扩增Ag85A抗原编码的结构基因并克隆至真核表达载体pVAXI中构建其DNA疫苗；接着，将纯化后的该DNA疫苗加强免疫BCG初免小鼠2针，以BCG和DNA单独免疫小鼠为对照，免疫8周后无菌分离脾淋巴细胞，分别应用IFN-yELISPOT和多因子胞内流式细胞术（intracellular staining）分析免疫小鼠的Mtb抗原特异性效应细胞免疫水平与分泌IFN-/TNF-a/IL-2的多功能CD4＋T细胞频率及其强度以及CD8＋T细胞免疫应答。结果与BCG免疫及DNA单独免疫组相比，Ag85ADNA加强免疫不仅能显著提高小鼠IFN-y＋TNF-a＋IL-2＋多功能T细胞，IFN-y＋IL-2＋、IL-2＋TNF-a＋双功能T细胞与IL-2＋单功能T细胞的频率以及IL-2的分泌能力，还能显著诱导小鼠产生更多分泌IFN-y和IL-2的CD8＋T细胞。结论本研究成功构建了表达Mtb免疫优势抗原Ag85A的DNA疫苗并分析了其免疫原性，证实了BCG初免-DNA加强的免疫策略可同时显著增强实验小鼠的Mtb抗原特异性CD4＋T和CD8＋T细胞应答水平，有利于提高BCG的免疫原性，为增强BCG逐渐下降的抗结核保护效果提供新思路。
- 康涵范小勇袁琴吴福明沈芳
- 关键词：DNA疫苗卡介苗加强免疫
