张战锋
- 作品数：11 被引量：34H指数：4
- 供职机构：广州中医药大学更多>>
- 发文基金：广东省科技计划工业攻关项目广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 艾滋病合并马尔尼菲青霉菌感染患者外周血T细胞因子检测的应用分析
- 2023年
- 目的:检测艾滋病合并马尔尼菲青霉菌感染患者外周血细胞因子水平,分析细胞因子对该疾病的诊断效能。方法:选择广州医科大学附属市八医院单纯AIDS患者73例,合并马尔尼菲青霉菌患者40例,采用美国BD公司BDFACSCantoⅡ流式细胞仪检测外周血T细胞因子IL-2、IL-4、IL-6、IL-10、TNF-α和IFN-γ,商品化试剂检测G实验等其他相关指标,统计分析细胞因子表达水平、各个指标单独及联合对艾滋病合并马尔尼菲青霉菌感染的诊断效能。结果:艾滋病合并马尔尼菲青霉菌感染患者外周血中T细胞因子和G实验、PCT和CRP指标变化相似,均显著升高(P<0.05),而Lymphocyte和PLT均显著降低(P<0.05),IL-6、IL-10单独检测对艾滋病合并马尔尼菲青霉菌感染的诊断效能和G实验、PCT和CRP指标相似,细胞因子和G实验等指标的联合检测对该疾病的敏感度、特异度分别为0.895、0.723。结论:T细胞因子可作为艾滋病和并马尔尼菲青霉菌感染的辅助诊断指标,并且为提高对该疾病诊断的准确性,建议细胞因子和G实验等指标联合检测。
- 赵蓉石亚玲刘艳霞何清江鸿雅张战锋
- 关键词：艾滋病马尔尼菲青霉菌细胞因子
- 细胞周期依赖性蛋白激酶2重组质粒的构建与表达
- 背景 细胞周期是一种非常复杂和精细的调节过程,细胞周期依赖性蛋白激酶(cyclin-dependent kinases, CDKs)参与每个环节的起始和进程。目前已被发现并命名的CDK激酶有CDK1(cdc2)、CDK2...
- 张战锋
- 关键词：CDK2原核表达真核表达毕赤酵母
- 文献传递
- 青蒿琥酯纳米颗粒的制备及其体外抑制肿瘤细胞增殖的作用研究被引量：2
- 2013年
- 用壳聚糖(Chitosan,CS)和三聚磷酸钠(tripolyphosphate,TPP)交联制备包载青蒿琥酯纳米粒,并探讨其在体外对肿瘤细胞增殖的抑制作用。方法:以壳聚糖-三磷酸钠(CS/TPP)为基质并优化其比例,采用离子凝胶法制备包载青蒿琥酯(ART)纳米粒,对其进行表征包括粒径大小、Zeta电位、包封率、载药量和体外释放试验,以及红外光谱分析。用MTT法检测包载青蒿琥酯的壳聚糖-三磷酸钠纳米粒对Hela、Caski、U251、MCF-7和HepG2细胞增殖的抑制作用。结果:成功构建青蒿琥酯-壳聚糖-三磷酸钠纳米颗粒(ART nanoparticals,ART-NPs),平均粒径为166.8±0.2 nm,电位为10.2±0.79 mV,红外光谱分析表明CS/TPP成功连接并包裹ART,平均载药量和包封率分别为18%和74.82%;体外释放呈典型的双相分布,前24 h呈暴发性释放(44.2%),其后缓慢释放,第9天累积释放度达67.4%。对不同肿瘤细胞的杀伤作用呈浓度和时间依赖趋势,且ART-NPs作用优于单一ART;相同浓度的ART-NPs在96 h时对细胞增殖的抑制率明显高于ART组(P<0.05)。结论:用壳聚糖和三磷酸钠交联可成功包载青蒿琥酯制成具有缓释性的纳米制剂,对肿瘤细胞的生长具有明显的抑制作用,有潜在的肿瘤治疗价值。
- 沈素晶黄来强沈素云张战锋曾小伟黄宪章
- 关键词：青蒿琥酯纳米粒缓释抗肿瘤
- 应用Image J软件探索重组质粒pET32a-CDK2的蛋白表达条件
- 陈炜烨徐建华陈丹娜卢妙莲何敏彭桉平张战锋黄宪章
- 重组人白介素1受体Ⅰ型细胞外基因在毕赤酵母的表达
- 2010年
- 目的构建白介素1受体Ⅰ型细胞外基因(可溶性白介素1受体Ⅰ型,sIL-1RⅠ)的pPICZαA-sIL-1RⅠ重组表达载体,利用毕赤酵母表达技术表达sIL-1RⅠ蛋白。方法采用RT-PCR技术扩增基因sIL-1RⅠ,经酶切连接构建重组质粒pPICZαA-sIL-1RⅠ,转化E.coliStb13;阳性克隆经测序成功后,把pPICZαA-sIL-1RⅠ重组质粒电转入毕赤酵母菌株GS115,PCR对阳性克隆进行鉴定,以及对GS115转化子表型筛选。确定表型后,对重组菌株进行甲醇诱导蛋白表达。提取菌体蛋白和上清液进行Westernblotting检测以鉴定蛋白表达属于菌内表达还是分泌表达。结果 pPICZαA-sIL-1RⅠ重组质粒构建成功;pPICZαA-sIL-1RⅠ成功电转入酵母菌GS115;转化子表型筛选结果为甲醇诱导缓慢型Muts;对培养上清和菌体蛋白进行Westernblotting检测结果:上清没有检测到蛋白,在菌体内检测到蛋白。结论成功运用毕赤酵母表达体系表达sIL-1RⅠ蛋白,为sIL-1RⅠ的研究和应用提供实验基础。
- 吕渭辉庄俊华陈炜烨张战锋黄宪章
- 关键词：重组质粒毕赤酵母
- ImageJ软件在重组质粒pET32a-CDK2中蛋白表达的应用被引量：7
- 2014年
- 目的应用Image J软件探索细胞周期依赖性蛋白激酶2(CDK2)在重组质粒pET32a-CDK2中的蛋白表达条件。方法将重组质粒pET32a-CDK2转入表达菌株BL21(DE3),然后在不同时间点(0、1、2、3、4h)和不同浓度(0.5、1、2 mmol/L)异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)下诱导表达目的蛋白CDK2,对CDK2采用SDS-PAGE法进行蛋白电泳,并应用Image J软件对电泳条带进行灰度分析。结果 CDK2诱导表达量在不同时间点差异有统计学意义(P<0.001),其中0h与1h、2h、3h、4h诱导表达量的差异均有统计学意义(P=0.007,P<0.001,P<0.001,P<0.001);1h与3h和4h诱导表达量的差异均有统计学意义(P=0.001);而2h和1h、3h、4h诱导表达量的差异均无统计学意义(均有P>0.05);不同浓度IPTG下的CDK2诱导表达量差异无统计学意义(P=0.336,P=0.240,P=1.000)。结论根据Image J软件分析结果,采用0.5 mmol/L浓度IPTG 2h的条件,节约诱导时间和试剂用量。
- 陈炜烨刘冬冬徐建华陈丹娜何敏张战锋黄宪章
- 关键词：IMAGE原核表达
- 人丙型肝炎病毒NS4B对Scribble蛋白和Hippo途径的作用机制研究
- 目的：人丙型肝炎病毒(Hepatitis Cvirus, HCV)感染已成为一个全球性的健康问题,通过蛋白结构软件对非结构蛋白4B (non-structural protein4B, NS4B)进行分析,发现其C末端可...
- 张战锋
- 关键词：丙型肝炎病毒NS4BSCRIBBLEMERLIN泛素化
- 文献传递
- pPICZαA-CDK2重组质粒的构建及表达被引量：4
- 2011年
- 目的:构建含有细胞周期依赖性激酶2(CDK2)的胞外分泌型pPICZαA-CDK2重组质粒,利用毕赤酵母表达体系表达CDK2蛋白。方法:从人白细胞中提取总RNA,逆转录后采用聚合酶链反应扩增出CDK2基因,并将其插入pPICZαA质粒,构建重组质粒,化学法转化大肠杆菌JM109进行克隆。重组质粒pPICZαA-CDK2转化毕赤酵母菌株GS115,甲醇诱导酵母细胞进行蛋白表达,SDS-PAGE和Western-Blot鉴定蛋白表达情况及抗原性。结果:PCR电泳及DNA测序证实CDK2基因已正确克隆到表达载体中;重组质粒转入酵母菌GS115,酵母经甲醇诱导表达后经SDS-PAGE检测发现在34000左右有条带,Western-Blot检测发现有与CDK2单抗结合蛋白。结论:成功构建重组质粒,初步判断CDK2全长蛋白在毕赤酵母中表达成功且抗原性良好。
- 黄宪章张战锋谢诗园李朝霞李林陈炜烨何敏庄俊华
- 关键词：重组质粒毕赤酵母
- PET32a-CDK2重组质粒的构建与表达被引量：5
- 2011年
- 目的构建含有细胞周期依赖性激酶2(CDK2)的PET32a-CDK2重组质粒,利用原核表达体系表达CDK2蛋白。方法从人白细胞中提取总RNA,采用聚合酶链反应从总RNA中扩增出CDK2基因,并将其插入PET32a质粒,构建重组质粒,化学法转化大肠杆菌DH5α进行克隆。将克隆得到的PET32a-CDK2重组质粒转化入表达菌株BL21,通过异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导其蛋白表达,SDS-PAGE和Western-Blot鉴定蛋白表达情况。结果菌落PCR及DNA测序证实CDK2基因已正确克隆到载体中;重组质粒成功转入表达菌株BL21(DE3),SDS-PAGE和Western-Blot结果显示表达菌经IPTG诱导后表达出52 kD左右的蛋白。结论成功构建重组质粒,并且CDK2全长蛋白在原核表达菌BL21中成功表达。
- 黄宪章张战锋陈炜烨何敏庄俊华
- 关键词：CDK2重组质粒原核表达
- 丙型肝炎病毒感染者17种自身抗体的检测及其临床意义被引量：9
- 2014年
- 目的观察丙型肝炎病毒(HCV)感染者的自身抗体情况,了解HCV感染后疾病严重程度与抗核抗体(ANA)谱阳性率的关系。方法收集123例HCV感染患者的血清标本作为HCV组,根据病毒感染的严重程度将其分为3组:A组,急性丙型肝炎17例;B组,慢性丙型肝炎64例;C组,肝硬化42例。将排除病毒感染和自身免疫性疾病的健康者52例作为对照组。采用间接酶联免疫吸附测定法检测抗HCV抗体,线性免疫印迹法检测123例HCV感染者血清中抗dsDNA、核小体、组蛋白、SmD1、增殖细胞核抗原(PCNA)、P0、SSA/Ro60kD、SSA/Ro52kD、SSB/La、CENP-B、Scl70、U1-snRNP、AMA-M2、Jo-1、PM-Scl、Mi-2和Ku抗体。结果 47.2%(58/123)HCV感染者至少1种自身抗体阳性,明显高于对照组的9.6%,差异有统计学意义(P<0.01)。ANA谱17种自身抗体阳性率由高到低依次为:抗SSA/Ro52kD抗体(23.6%)、抗SSB/La抗体(6.5%)、抗Mi-2抗体(5.7%)、抗PCNA抗体(4.9%)、抗核小体抗体(3.3%)、抗Ku抗体(3.3%),抗dsDNA、SmD1、AMA-M2、PM-Scl抗体均为1.6%,抗组蛋白、P0、SSA/Ro60kD、CENP-B、U1-snRNP、Jo-1抗体均为0.8%,未发现抗Scl-70抗体。ANA谱阳性率与HCV感染者的性别和年龄无关(P>0.05)。急性丙型肝炎患者、慢性丙型肝炎患者与肝硬化患者的ANA谱阳性率分别为47.1%、40.6%和57.1%,差异无统计学意义(P=0.25)。结论 HCV感染者可检测到多种自身免疫性疾病的特异度抗体,其ANA谱阳性率与性别、年龄及HCV感染疾病的严重程度均无关。
- 钟运华庄俊华赵蓉张战锋
- 关键词：肝炎病毒属自身免疫
