张洁
- 作品数：11 被引量：7H指数：1
- 供职机构：中国科学院天津工业生物技术研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金中国科学院知识创新工程重要方向项目更多>>
- 相关领域：生物学轻工技术与工程医药卫生环境科学与工程更多>>
- 天山根瘤菌转录调控蛋白MsiR突变蛋白及其在刀豆氨酸生物传感器中的应用
- 本发明提供了天山根瘤菌转录调控蛋白MsiR突变蛋白及其在刀豆氨酸生物传感器中的应用，所述的突变蛋白为非天然蛋白，且突变蛋白具有特异性响应刀豆氨酸的能力，突变蛋白在野生型的MsiR的1个与刀豆氨酸结合相关的核心氨基酸发生突...
- 马延和蔡韬张洁赵亚琪夏海容王钦宏
- 文献传递
- 一种淀粉的生物合成方法
- 本发明提供了淀粉的生物合成方法，该方法可以实现从二羟丙酮、甲醛、甲酸以及甲醇等简单化合物至淀粉的全人工生物合成，通过与二氧化碳化学还原等方法偶联，甚至可以以二氧化碳作为起始原料实现淀粉的全人工生物合成。天然淀粉合成需要经...
- 马延和蔡韬孙红兵乔婧张璠张洁王钦宏
- 来源于嗜热氢化杆菌的新型对苯二甲酸双(羟乙)酯水解酶的表达纯化与酶学性质被引量：1
- 2023年
- 石化来源的聚对苯二甲酸乙二酯(polyethylene terephthalate,PET)被广泛用于矿泉水瓶、食品包装和纺织品等领域,因其在自然界中不易分解,大量使用后的PET废弃物造成了严重的环境污染与资源浪费。使用生物酶法对PET废弃物进行解聚,并对解聚产物进行升级循环利用是进行塑料污染治理的重要方向之一,其中关键的是PET水解酶的解聚效率。对苯二甲酸双(羟乙基)酯(bis(hydroxyethyl)terephthalate,BHET)是PET生物酶解的中间产物,其累积是限制PET水解酶催化效率的一个重要因素,BHET水解酶和PET水解酶的联用能提升PET的整体水解效率。来源于嗜热氢化杆菌(Hydrogenobacter thermophilus)的双烯内酯酶(HtBHETase)对BHET有显著水解效果,将该酶在大肠杆菌(Escherichia coli)中进行重组表达并纯化后,对其酶学性质进行了研究。结果显示,HtBHETase对短碳链的酯类如对硝基苯酚乙酸酯催化活性较高,HtBHETase以BHET为底物时的最适反应pH值和最适反应温度分别为5.0和55℃;该酶有较好的热稳定性,经80℃的条件处理1 h仍能保持80%以上活性,显示出了良好的热稳定性,HtBHETase有在PET塑料生物解聚中使用的潜力,本研究为推动生物酶法降解PET提供了新的参考。
- 陈阳阳高健赵夷培王浩韩旭张洁张洁侯颖刘卫东
- 关键词：水解酶表达纯化酶学性质
- 双烯内酯酶突变体及其应用
- 本发明公开了双烯内酯酶突变体及其应用。本发明提供了蛋白质，将序列表中序列2所示的氨基酸序列上第194位氨基酸残基突变，其他位置的氨基酸残基不变，得到具有PET水解酶活性的蛋白；本发明利用定点突变技术将原有双烯内酯酶(Ht...
- 刘卫东高健陈阳阳韩旭张洁李倩徐娜娜顾群李金山马延和
- 地芽孢杆菌Y565-5分离鉴定及其木糖异构酶基因xylA的克隆表达和酶学性质被引量：1
- 2011年
- 从甘肃玉门油田地表土中分离到一株嗜热木糖利用菌,地芽孢杆菌Y565-5。利用PCR方法从该菌株中克隆得到一个木糖异构酶基因,xylA。该基因开放阅读框长1182 bp,编码394个氨基酸,XylA氨基酸序列与Geobacillus sp.Y412MC52相似性达到99%。将xylA基因克隆到原核表达载体pET-28a(+)上,得到重组质粒pET-28a(+)-xylA,然后将此重组质粒转化至BL21(DE3)中,经IPTG诱导后,通过SDS-PAGE电泳检测出明显的45 kD(相对分子质量)特异性蛋白质条带,并且通过半胱氨酸咔唑法检测出表达产物具有木糖异构酶的活性。对其酶学性质的研究发现,XylA最适温度为90°C,最适pH值为8.0。
- 张洁黄志勇王钦宏王永莉王硕
- 关键词：GEOBACILLUS木糖异构酶
- 富含香菇多糖的山楂功能性饮料的研制被引量：4
- 2014年
- 为了得到一种风味良好、营养丰富的新型复合功能性饮料,该实验以香菇和山楂浓缩清汁为主要原料,优化提取工艺,得到最优的香菇粗多糖提取工艺参数为料液比为1∶25、pH=8.5、提取时间2h、温度45℃、加酶量0.5%,此时香菇多糖提取率达到6.25%。通过配方筛选正交试验,得到最优配比为香菇粗多糖0.3%、山楂浓缩汁12%、安赛蜜0.012%、柠檬酸0.3%、白砂糖8%、香精0.002%、色素0.002%。实验所得到的山楂复合饮料,实现了风味和营养的互补。
- 刘丽张洁杨春晓
- 关键词：香菇多糖山楂功能性饮料
- 西维因抗体库的构建及特异性克隆的筛选被引量：1
- 2012年
- 在计算机辅助下,设计并合成西维因半抗原,与载体蛋白KLH连接后免疫Balb/C小鼠,经过5次免疫后,最高效价和特异性抑制率分别达到254 000和26%;提取免疫后小鼠脾脏总RNA,纯化mRNA后反转录获得cDNA,利用设计的兼并引物获得长度约为400 bp的轻链可变区和重链可变区基因片段,重叠延伸后获得长度约为780 bp的单链抗体基因。经过EcoR I和HindⅢ酶切后,连入T7噬菌体臂,构建西维因特异性的抗体库,抗体库原始滴度为1.74×107pfu。以西维因-OVA为配体对抗体库进行淘选,经过4轮淘选后,利用直接ELISA对获得噬菌体克隆进行特异性检测,西维因对克隆A4-7和A4-16的抑制率分别达到54.1%和66.4%。经过序列测定,2个克隆的轻链可变区分别由108和112个氨基酸构成,重链可变区分别由117和112个氨基酸构成。
- 王硕刘昕煜吴懿娜杜欣军朱超张洁
- 关键词：西维因噬菌体展示
- 天山根瘤菌转录调控蛋白MsiR突变蛋白及其在刀豆氨酸生物传感器中的应用
- 本发明提供了天山根瘤菌转录调控蛋白MsiR突变蛋白及其在刀豆氨酸生物传感器中的应用，所述的突变蛋白为非天然蛋白，且突变蛋白具有特异性响应刀豆氨酸的能力，突变蛋白在野生型的MsiR的1个与刀豆氨酸结合相关的核心氨基酸发生突...
- 马延和蔡韬张洁赵亚琪夏海容王钦宏
- 来源于Exophiala aquamarina的新型玉米赤霉烯酮水解酶的性质及底物结合中心关键氨基酸的功能研究
- 2021年
- 目的:开发一种对α-玉米赤霉烯醇(α-zearalenol,α-ZOL)催化活性高的水解酶,以促进玉米赤霉烯酮的酶法完全脱毒,推动玉米赤霉烯酮降解酶在饲料业和畜牧业的应用。方法:在NCBI数据库中通过基因挖掘获得一个来源于Exophiala aquamarina CBS 119918的新型玉米赤霉烯酮水解酶EaZHD,基因全长792 bp。构建重组质粒pET46-Eazhd,并在大肠杆菌中成功表达。经NiNTA亲和层析和DEAE阴离子交换柱纯化后,利用HPLC测定残余底物浓度的方法来表征其酶学性质。结果:EaZHD对玉米赤霉烯酮(zearalenone,ZEN)的酶活力为0.764 U/mg,而对α-ZOL的酶活力为1.529 U/mg,是对底物ZEN降解活力的2倍。Ea ZHD在p H 8.6和温度40℃条件下的活性最高,并具有较好的热稳定性和碱性条件下较高的p H稳定性。通过对Ea ZHD活性中心附近的氨基酸进行突变和活性分析,确定了对催化活性起关键作用的三个氨基酸,以及对底物特异性有影响的两个关键氨基酸。结论:为推动饲料业和畜牧业中玉米赤霉烯酮的酶法脱毒奠定了基础。
- 梁爱玲刘文婷武攀李倩高健张洁刘卫东贾士儒郑迎迎
- 关键词：酶学性质
- 一种淀粉的生物合成方法
- 本发明提供了淀粉的生物合成方法，该方法可以实现从二羟丙酮、甲醛、甲酸以及甲醇等简单化合物至淀粉的全人工生物合成，通过与二氧化碳化学还原等方法偶联，甚至可以以二氧化碳作为起始原料实现淀粉的全人工生物合成。天然淀粉合成需要经...
- 马延和蔡韬孙红兵乔婧张璠张洁王钦宏
- 文献传递
