张玉静
- 作品数：174 被引量：376H指数：9
- 供职机构：吉林大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家杰出青年科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学农业科学医药卫生理学更多>>
- 一种基因治疗用载体蛋白及其制备方法和用途
- 本发明提供一种基因治疗用载体蛋白及其制备方法和用途，提供了人源H4<Sup>67-103</Sup>作为DNA结合结构域，用于构建基因载体的用途，同时本载体利用人源组蛋白H4的部分DNA结合域（H4<Sup>67-103...
- 艾永兴吴山力邓晨郑海南赵程程于佩峰王梦云郝林琳于浩张玉静
- 文献传递
- 端粒(酶)同癌症与衰老关系的研究进展被引量：5
- 2000年
- 端粒是真核生物染色体的天然末端，具有稳定染色体结构，避免遗传信息在复制过程中丢失的作用。端粒酶是端粒复制所必须的一种特殊的ＤＮＡ聚合酶，在大多数的正常人体细胞中没有活性。在近年来的研究中，人们发现“衰老者的端粒缩短”，而且在约８５％的肿瘤细胞中检测到了端粒酶活性。这些事实提示人们：端粒、端粒酶同癌症与衰老之间存在相关性。
- 马鹤雯张玉静阮承迈陈守义张立树
- 关键词：端粒端粒酶衰老癌症
- 抗猪脂肪细胞特异膜蛋白scFv噬菌体抗体库的构建及可溶性表达
- 高士争张玉静刘松财郝军元
- 猪肌生成抑制素基因原核表达载体的构建及其表达
- 从猪肌生成抑制素(MSTN)编码序列中设计引物,去除其信号肽的编码序列,扩增出MSTN cDNA片段,所获片段全长1225bp,包含猪MSTN基因的编码序列.将所得片段与pMD18-T载体连接,转化到JM109大肠杆菌中...
- 李慎涛欧阳红生张玉静张锐廖晓萍孙博兴张永亮
- 文献传递
- 猪肌生成抑制素(MSTN)cDNA的克隆被引量：14
- 2001年
- 从猪的肌生成抑制素 ( MSTN)编码序列中设计引物 ,以军牧一号猪肌细胞总 RNA为模板 ,利用 RT-PCR和嵌套 PCR技术 ,扩增出 MSTN c DNA片段。该片段全长 1 2 77bp,包含猪 MSTN基因的全部编码序列。将所得片段与 p MD1 8-T载体连接 ,转化到 JM1 0 9大肠杆菌中 ,成功地筛选到阳性克隆 ,其质粒测序结果与文献报道的一致。经 Eco R 和 Pst 酶解分析 ,c DNA片段与 p MD1 8-T载体之间既有正向插入的克隆 ,也有反向插入的克隆 ,所得到的 MSTN c
- 李慎涛孙博兴欧阳红生张玉静廖晓萍张锐张永亮吴文甲
- 关键词：肌生成抑制素基因克隆
- 马立克氏病毒感染鸡的端粒酶活性及其病毒血症的动态研究被引量：1
- 2010年
- 1日龄非免疫鸡分别人工感染马立克氏病病毒(MDV)I型国际标准强毒GA株、I型MDV疫苗毒CVI988株后,从第5日起,定期采血,用本实验室改进的Trap法和Bandscan软件测定、分析并计算感染过程中其外周血液单核细胞(PBMC)的端粒酶活性变化;同时用抗MDV囊膜糖蛋白B(gB)单克隆抗体介导的间接免疫荧光试验检测MDV在外周血液单核细胞中的感染状况。结果表明,自接种I型强毒GA株后,端粒酶在没有临床症状和可视病变出现之前就可检测到,并且随着MDV感染后日龄的增加逐渐升高,在25日龄时其相对活力达到最高值;而接种CVI988后,整个生长过程端粒酶活性均呈阴性。从感染第5日到鸡发病死亡前,都能检出GA株引起的病毒血症,并于18～22 d左右达到高峰;而接种CVI988株后第5日到第20日止,能检出病毒血症,并于第10～12天左右达到高峰。
- 韩烨张玉静周志江
- 关键词：马立克病毒端粒酶病毒血症
- 鸡端粒酶反转录酶启动子区克隆及序列分析
- 2007年
- 根据GenBank(AY505015)报道的鸡端粒酶反转录酶序列设计了1对特异性引物,以鸡淋巴瘤细胞(MDCC-MSB1)总核酸为模板进行PCR。PCR产物连接到pMD19-T载体进行测序,通过BLAST对GenBank进行同源性搜索,并用DNAMAN分子生物学软件进行分析。结果测得MDCC-MSB1启动子区全长为997 bp,其中G+C占50.78%。与国外报道的端粒酶反转录酶(AY505015)启动子区序列同源性为99.22%。与人端粒酶反转录酶启动子区相比:二者在起始密码子之前约250 bp均有1个E-box,但在chTERT启动子区新增加了4个c-Myb位点,而3个c-Ets2和WT1位点缺失,其他基序二者的分布基本相似。二者启动子区富含CpG岛,延伸到编码区。
- 邹亚学孙莹潘风光郑梅竹张玉静
- 关键词：反转录酶
- 抗猪脂肪细胞特异膜蛋白scFv基因地克隆及序列分析
- 从分泌单克隆抗体的3A6杂交瘤细胞纯化mRNA,经RT-PCR扩增抗体轻、重链可变区基因(V、V),然后采用重叠延伸剪接法通过PCR组装成单链抗体基因(V-linker-V-L),并再其5’和3’端分别加上SfiⅠ和Ni...
- 张玉静高士争刘松财郝军元
- 文献传递
- 具胆碱酯酶活性的抗人血清丁酰胆碱酯酶单克隆抗体3A5
- 2007年
- 目的 研究具抗原酶活性的抗人血清丁酰胆碱酯酶单抗3A5的催化特性及活性位点。方法 利用酶促反应动力学方法测定3A5的Km及Keat／Krn；根据胆碱酯酶抑制剂对其催化活性的影响情况分析其活性位点。结果 3A5催化丁酰胆碱酯酶特异性底物的水解符合米．曼氏方程规律，但Keat／Krn明显小于抗原酶；丝氨酸蛋白酶抑制剂PMSF明显抑制其胆碱酯酶活性，胆碱酯酶活性中心催化位点抑制剂吡啶斯的明及活性中心阴离子位点抑制剂四甲基铵则分别对其产生竞争性及非竞争性可逆抑制。结论 3A5具有与抗原酶相似但较弱的催化活性，具有与天然胆碱酯酶相似的活性中心催化位点及阴离子位点。
- 闫晓凯张玉静洪敏
- 关键词：胆碱酯酶活性位点
- 猪肌生成抑制素基因成熟蛋白编码序列的表达与纯化
- 2004年
- 猪肌生成抑制素基因myostatin(MSTN)的cDNA去除信号肽后对成熟蛋白编码序列PCR扩增出1.2kb片段,将该片段与pMD18-T载体连接,转化JM109受体菌细胞,筛选阳性克隆测序分析,结果表明与设计序列完全一致。将该克隆载体的质粒DNA用带有BamHI和SalI内切酶识别序列的另一对引物进行PCR扩增,将回收的1 2kbPCR目的片段定向克隆到pET28a(+)表达载体上,成功地构建了猪肌生成抑制素成熟蛋白编码的原核表达载体。对成功构建表达载体阳性克隆在LB液体培养基中用IPTG诱导表达,SDS-PAGE凝胶电泳显示,重组菌表达的MSTN蛋白是以包涵体的形式表达的;SDS-PAGE凝胶经薄层扫描仪扫描分析,表达的MSTN包涵体蛋白占菌体不溶性蛋白含量的27 9%,表达的MSTN分子量为41451 3D.因为所构建的表达载体中含六聚组氨酸标签,则用His-trap亲和柱进行纯化后,纯度可达92 5%.该试验为获得较好的猪肌生成抑制素基因抗原、制备抗体打下了良好的基础。
- 张锐孙美榕欧阳红生张玉静
