张育先
- 作品数：15 被引量：45H指数：3
- 供职机构：北京市回民医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金中国博士后科学基金中国科学院学部咨询评议项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 尾加压素Ⅱ受体拮抗剂Palosuran对四氯化碳诱导大鼠肝损伤的影响被引量：2
- 2017年
- 目的探讨尾加压素Ⅱ受体(urotensinⅡreceptor,UT)拮抗剂Palosuran对四氯化碳(carbon tetrachloride,CCl4)诱导肝损伤大鼠的影响。方法 Wistar大鼠32只,随机分为对照组、4周模型组、8周模型组和治疗组各8只。4、8周模型组和治疗组腹腔注射体积分数40%CCl4+橄榄油的混悬液2mL/kg制备肝损伤模型,治疗组造模4周起给予Palosuran 300mg/(kg·d)灌胃连续4周;4、8周模型组造模成功后分别连续给予等量生理盐水灌胃4、8周;对照组腹腔注射等量生理盐水连续8周。实验结束后处死大鼠,切取肝脏同一部位,采用实时荧光定量PCR法检测4组肝组织尾加压素Ⅱ(urotensinⅡ,UⅡ)、UT mRNA相对表达量;心脏取血检测4组血浆UⅡ蛋白表达及血清谷丙转氨酶(glutamate pyruvate transaminase,GPT)、谷草转氨酶(glutamic-oxaloacetic transaminase,GOT)、总胆红素(total bilirubin,TBil)和白蛋白水平。结果肝组织UⅡmRNA、UT mRNA相对表达量、血浆UⅡ蛋白表达量在4周模型组[(5.47±1.06)、(3.27±0.54)、(79.13±3.78)ng/L]、8周模型组[(8.70±0.21)、(4.45±0.29)、(110.32±12.09)ng/L]和治疗组[(3.49±0.28)、(3.31±0.50)、(53.10±4.32)ng/L]高于对照组[(0.93±0.12)、(1.06±0.13)、(45.54±4.69)ng/L](P<0.05);4、8周模型组和治疗组血清GPT[(487.38±53.15)、(932.05±42.89)、(363.92±37.79)u/L]、GOT[(1 286.42±190.06)、(2 420.13±156.67)、(812.41±99.97)u/L]和TBil水平[(18.50±3.42)、(26.62±6.39)、(19.13±3.48)μmol/L]均高于对照组[(36.76±6.36)u/L、(95.33±5.92)u/L、(0.71±0.17)μmol/L](P<0.05),白蛋白水平[(28.38±2.67)、(28.83±2.39)、(27.63±1.83)g/L]与对照组[(31.06±3.03)g/L]比较差异无统计意义(P>0.05);4、8周模型组肝组织UⅡmRNA、UT mRNA相对表达量、血浆UⅡ蛋白表达量及GPT、GOT和TBil水平高于治疗组,8周模型组高于4周模型组(P<0.05);4、8周模型组和治疗组血浆白蛋白水平比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论 UⅡ受体拮抗剂Palosuran可改善CCl4诱导
- 刘殿刚张育先张若蹊张超王宇
- 关键词：肝损伤
- 人脂联素真核表达质粒构建及其在LX-2中的表达被引量：2
- 2009年
- 目的构建人全长脂联素真核表达质粒,转染人肝星状细胞系(LX-2),观察其表达及分泌情况,为脂联素在肝纤维化作用的基础及临床研究提供实验数据。方法提取人脂肪组织mRNA,用RT-PCR扩增出添加酶切位点的人全长脂联素基因片段,双酶切扩增出的目的基因片段及空载体质粒P7,将酶切后的片段进行连接、转化构建质粒。用FuGENE HD将构建成功的质粒转染LX-2细胞,用免疫荧光观察其转染效率及细胞定位,Western blotting检测脂联素蛋白表达。结果酶切及测序证实成功构建人全长脂联素真核表达质粒,免疫荧光检测转染效率约为40%,Western blotting检测到30000处存在目的蛋白表达,与预期相对分子质量一致。结论成功构建的人全长脂联素真核表达质粒能有效转染LX-2细胞及表达脂联素蛋白。
- 张育先白启轩马超马红
- 关键词：脂联素肝纤维化
- 脂联素对LX-2细胞COL-Ⅰ表达的调节及其机制被引量：1
- 2011年
- 目的:研究全长脂联素真核表达质粒对体外培养人类肝星状细胞株(LX-2)细胞,Ⅰ型胶原(collagenⅠ,COL-Ⅰ)基因及蛋白的影响,探讨全长脂联素对细胞凋亡的作用及其调节COL-Ⅰ表达的作用机制.方法:实验分为对照组、空质粒组、全长脂联素真核表达质粒组,各组转染48h后Real-timePCR方法检测COL-ⅠmRNA的表达,ELISA法检测COL-Ⅰ蛋白水平的表达,MTT检测细胞存活率变化,Annexin V-FITC检测细胞凋亡率变化,Western blot检测细胞凋亡蛋白caspase-3的变化.结果:与空质粒组及对照组相比,全长脂联素真核表达质粒组COL-ⅠmRNA及蛋白的表达下降(179.00ng/L±16.83ng/Lvs532.30ng/L±27.52ng/L,570.00ng/L±16.12ng/L,均P<0.01),细胞存活率下降(65.70%±1.56%vs93.15%±1.90%,95.82%±2.52%,均P<0.01),凋亡率增加(14.70%±2.34%vs1.60%±0.23%,1.80%±0.15%,均P<0.01),caspase-3活性蛋白的表达增加(0.62±0.09vs0.21±0.04,0.22±0.07,均P<0.01).结论:脂联素可下调LX-2细胞COL-Ⅰ表达而抑制肝纤维化,其机制可能是通过抑制LX-2细胞增殖及增加caspase-3蛋白的途径促进其凋亡.
- 刘殿刚张育先李非刘家峰孙家邦
- 关键词：脂联素肝星状细胞肝硬化
- 癌易感性候选基因2在肝细胞癌中的表达及其对患者预后的影响被引量：1
- 2019年
- 目的探讨肝细胞癌(HCC)患者长链非编码RNA癌易感性候选基因2(CASC2)的表达水平与患者预后的关系。方法回顾分析首都医科大学宣武医院及首都医科大学附属北京佑安医院2007年9月至2014年1月129例HCC患者资料。其中男性80例,女性49例,年龄21~73岁。实时荧光定量PCR检测肝癌及癌旁正常组织CASC2相对表达,分析其与临床病理特征的关系。生存分析采用Kaplan-Meier法,组间比较用log-rank检验。单因素和多因素Cox回归分析患者预后影响因素。结果129例患者肝癌组织CASC2相对表达为(0.84±0.05),明显低于癌旁组织(3.35±0.11),差异有统计学意义(P<0.05)。129例HCC患者CASC2相对表达高低与肿瘤直径、肿瘤分化程度和肿瘤分期相关。以CACS2相对表达的均值0.84为界值,129例患者分为低表达组(n=72)和高表达组(n=57)。CACS2高表达组总生存率高于低表达组,差异有统计学意义(P<0.05)。多因素分析,肿瘤分化程度(HR=0.20,95%CI:0.05~0.59)、肿瘤分期(HR=1.71,95%CI:1.02~2.99)和CACS2表达(HR=0.51,95%CI:0.08~0.92)为预后影响因素。结论CACS2的低表达可能与HCC的发生发展有关。CACS2高表达是HCC患者预后的保护因素。
- 张育先杜海军刘殿刚高翔王悦华李聪武聚山
- 关键词：预后
- 瘦素、脂联素在慢性肝病中的研究进展被引量：3
- 2010年
- 瘦素脂联素是脂肪细胞分泌的细胞因子,发挥多种生物学作用并与一系列人类疾病相关.越来越多的研究发现瘦素脂联素等细胞因子在肝脏脂变、炎症坏死及纤维化方面起重要作用,尤其是非酒精性肝病(nonalcoholic fatty liver disease,NAFLD)、慢性丙型肝炎方面.本文就瘦素脂联素在慢性肝病中的进展作一总结.
- 张育先马红
- 关键词：脂肪因子瘦素脂联素
- 脂联素对原代大鼠肝星状细胞表达MMP-2和MMP-13的影响
- 2010年
- 目的观察外源性脂联素对体外培养原代大鼠肝星状细胞(HSC)表达基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和基质金属蛋白酶-13(MMP-13)的影响,探讨脂联素对肝纤维化的影响。方法改良的肝脏二步原位灌注法分离肝星状细胞,外源性脂联素(125μg/L、250μg/L、500μg/L)处理体外培养的原代肝星状细胞。Real-time PCR方法分析其对原代HSCMMP-2和MMP-13 mRNA表达的影响,ELISA方法检测原代HSC分泌MMP-2和MMP-13蛋白水平,酶谱法检测细胞外MMP-2的酶活性。结果脂联素促进MMP-2和MMP-13 mRNA表达,随脂联素浓度增加,作用更加明显。脂联素可促进HSC分泌MMP-2及MMP-13蛋白,提高MMP-2酶活性,但均无剂量依赖性。结论脂联素调节MMP-2表达和活性,促进MMP-13表达,可能对肝纤维化产生影响。
- 王美娟于丹张育先马红
- 关键词：脂联素肝星状细胞
- Palosuran改善四氯化碳肝硬化模型大鼠肝纤维化的机制研究被引量：3
- 2017年
- 目的探究尾加压素Ⅱ(UⅡ)受体拮抗剂Palosuran对四氯化碳(CCl4)肝硬化模型大鼠肝纤维化的改善作用。方法 2015年1—12月,将32只SPF/VAF级雄性Wistar大鼠随机分为对照组、4周模型组、8周模型组、治疗组,各8只。4周模型组、8周模型组分别腹腔注射0.2 ml/100 g CCl4溶液(分别连续4周、8周)建造肝硬化模型,造模后分别处死;对照组腹腔注射等量0.9%氯化钠溶液(连续8周),结束注射后处死;治疗组腹腔注射等量CCl4溶液(连续4周)建造肝硬化模型,之后改为Palosuran灌胃(4周),第8周末处死。取各组肝组织进行天狼猩红染色,观察各组肝组织病理组织学变化、统计肝纤维化半定量计分;检测各组肝组织羟脯氨酸(Hyp)水平;采用RT-qPCR检测各组肝组织Ⅰ型胶原(ColⅠ)mRNA表达水平;采用ELISA检测各组血清ColⅠ水平;采用免疫组化法检测各组肝组织α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)阳性细胞计数。结果对照组仅在肝内汇管区及静脉壁周围可见胶原沉积;4周模型组可见肝脏结构紊乱、纤维组织增生、假小叶形成;8周模型组可见肝小叶结构破坏,纤维组织增生明显,将肝小叶分隔成大小不等的肝细胞团,肝细胞索排列弥漫,中央静脉周围带大片肝细胞气球样肿胀,胞质疏松淡染,肝窦受压变窄;治疗组纤维间隔细小,增生的纤维组织明显减少。治疗组肝纤维化半定量计分[(8.6±2.5)分]低于8周模型组[(16.1±2.2)分](P<0.05)。治疗组肝组织Hyp水平[(135.6±20.9)ng/g]低于8周模型组[(332.4±2.6)ng/g](P<0.05);治疗组肝组织ColⅠmRNA表达水平(103.63±7.96)及血清ColⅠ水平(8.75±1.67)均低于8周模型组(160.00±17.85,16.13±2.03)(P<0.05)。治疗组肝组织α-SMA阳性细胞计数[(110.35±11.09)个]少于8周模型组[(210.57±38.09)个](P<0.05)。结论 Paolsuran可以改善CCl_4肝硬化模型大鼠的肝纤维化程度,其机制可能是减少肝脏α-SMA阳性细胞。
- 刘殿刚张育先张若蹊张超李非王宇
- 关键词：四氯化碳
- 脂联素通过激活p38MAPK信号通路调节大鼠肝星状细胞MMP-13及TIMP-1表达被引量：12
- 2010年
- 目的观察外源性脂联素对体外培养的大鼠肝星状细胞系(HSC-T6)细胞脂联素受体1(AdipoR1)表达的调节作用及对细胞内p38MAPK信号通路的影响,并观察该通路是否参与调节脂联素对HSC细胞基质金属蛋白酶-13(MMP-13)、基质金属蛋白酶抑制因子-1(TIMP-1)表达的影响。方法 MTT法观察不同浓度脂联素对HSC生长的影响。荧光定量PCR法检测脂联素作用下HSC-T6细胞AdipoR1、MMP-13、TIMP-1的mRNA表达情况。Western blotting方法检测脂联素作用下HSC-T6细胞信号蛋白p38MAPK的活化及活性和AdipoR1、MMP-13、TIMP-1的蛋白表达情况。结果 0.5μg/mL～2.0μg/mL脂联素处理HSC细胞,各组细胞增生无明显变化。0.5μg/mL、1.0μg/mL、1.5μg/mL脂联素作用下AdipoR1mRNA和蛋白表达增加。1.0μg/mL脂联素处理HSC后,p38MAPK激酶磷酸化水平随时间增加而增高,在120min达最大值,之后又开始下降。不同浓度脂联素处理HSC120min后,p38MAPK激酶磷酸化水平均增加,并具有浓度依赖性。p38MAPK抑制剂SB203580可抑制p38MAPK激酶的磷酸化及活性。脂联素处理组HSC细胞MMP-13mRNA及蛋白表达均较对照组明显增加,而TIMP-1mRNA及蛋白表达较对照组降低,而SB203580可以抑制这种效应。结论脂联素可上调活化肝星状细胞AdipoR1的表达,通过激活p38MAPK信号通路,调节HSC细胞MMP-13及TIMP-1的表达。
- 陈辉马超张育先马红
- 关键词：脂联素肝星状细胞系
- 原花青素对高脂饮食诱导大鼠脂肪肝的防治研究被引量：4
- 2016年
- 目的探讨原花青素对高脂饮食诱导的大鼠脂肪肝的预防及治疗作用。方法雄性Wistar大鼠60只,随机分为空白对照组、模型组、花青素低剂量治疗组(低剂量组)和花青素高剂量治疗组(高剂量组)各15只。空白对照组大鼠喂食普通饲料,模型组和低、高剂量组给予高脂饲料,低、高剂量组分别给予50、200mg/(kg·d)花青素灌胃,对照组和模型组给予质量分数0.9%氯化钠溶液灌胃。喂养8周后,禁食12h处死大鼠,收集血清和肝脏组织。观察各组肝组织病理学改变,检测血清谷丙转氨酶、谷草转氨酶、总胆固醇、三酰甘油、高密度脂蛋白胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇水平及血清超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶活性和丙二醛含量。结果对照组大鼠肝组织结构正常,模型组大鼠肝组织出现大面积小叶内肝细胞脂肪变性、气球样变性和炎性细胞浸润,低剂量组和高剂量组肝脏脂肪变性明显减轻、无明显气球样变、无炎性细胞浸润;模型组血清总胆固醇[(3.98±0.29)mmol/L]、三酰甘油[(0.85±0.14)mmol/L]、低密度脂蛋白胆固醇[(1.41±0.19)mmol/L]、谷丙转氨酶[(13.84±1.92)u/L]、谷草转氨酶[(22.93±2.35)u/L]、丙二醛[(3.63±0.23)μmol/L]水平高于对照组[(1.45±0.21)mmol/L、(0.57±0.07)mmol/L、(0.98±0.20)mmol/L、(8.91±2.13)u/L、(16.90±0.87)u/L、(1.51±0.32)μmol/L]和高剂量组[(1.57±0.28)mmol/L、(0.60±0.08)mmol/L、(1.02±0.11)mmol/L、(9.57±1.81)u/L、(17.86±1.75)u/L、(2.34±0.15)μmol/L](P<0.05),低剂量组血清谷丙转氨酶[(10.50±1.23)u/L]低于模型组(P<0.05);模型组超氧化物歧化酶[(199.62±18.25)u/mL]、谷胱甘肽过氧化物酶[(326.75±27.90)u/mL]活性低于对照组[(313.87±12.98)、(448.23±35.89)u/mL]、高剂量组[(283.54±10.92)、(442.44±32.87)u/mL]和低剂量组[(269.53±20.38)、(397.25±27.56)u/mL](P<0.05),高、低剂量组与对照组两两比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论原花青素可能�
- 宣琪张育先刘殿刚崔叶青
- 关键词：原花青素抗氧化肝脏高脂饮食
- 抗反流手术与抑酸药物治疗胃食管反流病降低食管腺癌发生风险的meta分析被引量：3
- 2018年
- 目的比较抗反流手术及药物治疗胃食管反流病(gastroesophageal reflux disease,GERD)对预防食管腺癌(esophagus adenocarcinoma,EAC)发生的效果。方法以esophagus、neoplasm、cancer、Barrett's esophagus、adenocarcinoma、fundoplication、antireflux surgery、Nissen等为英文检索词,以食道、良性肿瘤、癌、巴瑞特食管、腺癌、胃底折叠术抗反流手术、Nissen术式、胃食管反流病、质子泵抑制剂等为中文检索词,检索Pub Med、EMBASE、Cochrane library、Web of Science、万方、中国知网等数据库自建库至2017年4月,关于药物及手术治疗GERD的相关文献,设立纳入与排除标准筛选文献,并进行资料提取与偏倚评估。结果最终纳入文献7篇,其中3篇为随机对照试验(RCT)研究、4篇为回顾性病例对照研究,共纳入病例78 703例,其中手术治疗患者11 398例(手术组),药物治疗患者67 305例(药物组)。meta分析结果示:手术组与药物组患者相比,癌变率比较差异并无统计学意义(RR=1.10,95%CI:0.81,1.49,P=0.54);然而剔除病例数占比最大的研究后,药物组癌变率高于手术组(RR=0.38,95%CI:0.15,0.97,P=0.04)。结论对于GERD伴或不伴Barrett食管患者癌变率方面,抗反流手术优于药物治疗。但抗反流手术用于此类患者预防EAC的发生仍需进一步大样本、长期随访的RCT研究来验证。
- 张育先张若蹊刘殿刚高翔张超汪忠镐
- 关键词：胃食管反流BARRETT食管抗反流手术META分析
