徐文联
- 作品数：12 被引量：106H指数：6
- 供职机构：清华大学更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金山西省回国留学人员科研经费资助项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学轻工技术与工程化学工程更多>>
- 抗赤星病烟草的防卫基因的表达与基因组DNA结构的变化被引量：2
- 2000年
- 用赤星病菌 (Alternariaalternata)毒性菌株产生的AT毒素诱导烟草 ,可使寄主获得对赤星病 80 .4 %的系统抗性 ,比病菌弱毒株TBA16孢子诱导的效果高约 2 0 %。烟草品种NC89心叶叶碟在含AT毒素 60 %和 75%的MS培养基上经 2轮胁迫筛选和植株再生 ,得到抗病品系NC89 TT。用 5种防卫基因的cDNA探针检测了不诱导、受AT毒素诱导、受病菌弱毒株激发子诱导的NC89和诱导与不诱导的NC89 TT第 4代植株 5种基因的转录活性 ,结果表明 ,苯丙氨酸氨裂解酶(PAL)基因在NC89中不能组成型表达 ,可被AT毒素诱导激活 ,但不受激发子诱导 ;病程相关蛋白(PR蛋白 )PR 1a、查尔酮合成酶 (CHS)、脂氧合酶 (LOX)基因在NC89中表现为诱导转录或诱导后转录活性增强 ;这 4种基因都能在NC89 TT中组成型表达。几丁质酶 (CHT)基因在NC89中组成型表达 ,但受诱导后及在NC89 TT中表达丧失。烟草基因组DNA的随机引物扩增 (RAPD)测定表明 ,AT毒素诱导了DNA结构的明显变化 ;与亲本NC89相比 ,NC89 TT的基因组DNA显示明显的序列重排或核苷酸替换。
- 梁元存潘军刘爱新董汉松徐文联
- 关键词：烟草赤星病诱导抗性抗病品系
- 非洲鸵鸟在我国北方的繁殖习性及人工孵化被引量：8
- 1996年
- 本文描述了非洲鸵鸟在我国北方的繁殖习性，讨论了人工饲养及人工孵化时应注意的问题，提出非洲舵鸟可以作为一个优良收种在北方地区推广。
- 王苏舰张贵友徐文联曹玮蒋五玲白文彬耿戍
- 关键词：鸵鸟繁殖人工孵化人工养殖
- 水稻白叶枯病菌无毒基因的研究初报被引量：6
- 1995年
- 报道了用基因标签法克隆水稻白叶枯病菌无毒基因的研究过程。通过接合实验，将Ｔｎ５引入水稻白叶枯病菌日本系统５号小种中去，在ＬＢ＋Ｋｍ平板上筛选了２５００个接合子；用剪叶接种法，将接合子接种水稻品种ＩＲ２６，得到了４个无毒基因突变体，分别用粘粒载体ｐＳａ７４７和质粒载体ｐＵＣ１９构建了ＪＸＯＶ核基因文库和无毒基因探针，采用菌落原位杂交法在基因库中钓取了１３个无毒基因克隆。该无毒基因片断在此病原的不同小种中均有同源性。
- 徐文联李向红张学君王金生
- 关键词：水稻白叶枯病菌无毒基因突变体抗病性
- 核黄素、烟酸对烟草抗赤星病诱导的交互作用被引量：3
- 1998年
- 用核黄素、烟酸单独或二者组合分别诱导烟草植株，１６ｈ提取总ＲＮＡ，用５种防卫基因的ｃＤＮＡ探针作印迹杂交．结果表明，病程相关蛋白ＰＲ－ｌａ在４种处理中均表现出转录活性增强，其中以核黄素诱导效应最好．几丁质酶（ＣＨＴ）、查尔酮合成酶（ＣＨＳ）及脂氧合酶（ＬＯＸ）基因的表现为：受核黄素、烟酸／核黄素诱导后活性略有增强，而受烟酸、核黄素／烟酸诱导后活性下降．苯丙氨酸氨裂解酶（ＰＡＬ）基因在４种处理中都不能被激活．ＰＡＧＥ电泳显示，ＰＲ－ｌａ和ＣＨＴ积累与基因转录活性相一致；ＰＲ蛋白积累动态又与诱导抗性发生动态呈先后关系，抗病性最大期比蛋白质积累的最高期晚３天；烟草基因组ＤＮＡ的随机引物扩增（ＲＡＰＤ）检测结果指出，除烟酸单独诱导在引物２中扩增出两种产物外，其他处理都不能诱导烟草ＤＮＡ分子结构发生变化．
- 刘爱新潘军梁元存徐文联徐文联
- 关键词：抗病性核黄素烟酸防卫基因烟草抗赤星病
- 毛细管区带电泳分析稻瘟病菌诱导水稻叶片蛋白
- 1999年
- 用毛细管区带电泳分析了受稻瘟病菌侵染的水稻幼苗的叶片细胞蛋白提取物和胞间流液蛋白提取物，用线性聚丙烯酰胺涂渍的毛细管柱来抑制蛋白的吸附。采用数理统计中检验异常值的Ｇｒｕｂｂｓ方法分析结果，与对照实验相比，在叶片细胞蛋白提取物中发现了一种被稻瘟病菌诱导表达的蛋白。
- 王清刚罗国安徐文联徐文联
- 关键词：蛋白水稻CZE稻瘟病菌
- 植物诱导抗病基因工程被引量：27
- 1996年
- 概述了植物诱导抗病性的诱导因子和诱导方法，植物诱导抗病性的简要机制，以及植物抗病基因工程的理论构思和应用前景。
- 徐文联曾艳
- 关键词：植物诱导抗病性基因工程农业生物工程
- 水稻白叶枯病菌受寄主诱导启动子的克隆
- 1994年
- 用一个具链霉素（Ｓｍ）抗性，含无启动子ＣＡＴ基因的广宿主启动子探针质粒ｐＩＪ３１００．用鸟枪法克隆水稻白叶枯病菌染色体ＤＮＡ的ＢａｍＨ１酶切片段，重组质粒转化大肠杆菌ＥＤ＿（８７６７），在含链霉素和氯霉素的ＬＢ平板上筛选含有水稻白叶枯病菌启动子活性片段的转化子。在帮助质粒ｐＲＫ２０１３的帮助下，通过三亲交配，将转化子中重组质粒转移进野生型的水稻白叶枯病菌中去，在分别含有链霉素和氯霉素的ＰＳＡ对照平板上筛选对热氯霉素敏感的接合子。随机挑取２００个该接合子，接种用氯霉素处理的水稻感病品种金南风，得到１５个比对照有明显致病力的菌株，其外源重组质粒中含有能够受寄主诱导的水稻白叶枯病菌的启动子。
- 徐文联王金生
- 关键词：水稻白叶枯病菌启动子克隆寄主
- 高活性纤维素酶菌株的筛选及其产酶条件的研究被引量：27
- 1996年
- 高活性纤维素酶菌株的筛选及其产酶条件的研究郑佐兴，段明星，徐文联，姚瑞林（清华大学生物科学与技术系北京１０００８４）纤维素酶在自然界碳素循环，尤其生物降解（７）过程中起着关键作用。纤维素在工业上也具有广阔的应用前景，如利用纤维素为基质生产葡萄糖、有机...
- 郑佐兴段明星徐文联姚瑞林
- 关键词：纤维素酶菌株产酶条件发酵
- 产harpin的成团泛菌工程菌的构建被引量：16
- 1999年
- 梨火疫病菌（ Ｅｒｗｉｎｉａ ａｍｙｌｏｖｏｒａ） 产生的胞外蛋白ｈａｒｐｉｎ 是引发其非寄主植物过敏反应的因子。ｈａｒｐｉｎ 蛋白还具有诱导植物抗性的功能。成团泛菌（ Ｐａｎｔｏｅａ ａｇｇｌｏｍｅｒａｎｓ）３０８Ｒ 对链格胞属（ Ａｌｔｅｒｎａｒｉａ） 的真菌具有拮抗活性，是一株抗利福霉素的自发突变株，对壮观霉素敏感。本文通过电击转化法将带有梨火疫病菌ｈｒｐ 基因簇的重组质粒ｐＣＰＰ４３０ 导入３０８Ｒ。所得转化子具有ｐＣＰＰ４３０ 的壮观霉素抗药性标记，在番茄上引起过敏反应；从转化子中提取到与ｐＣＰＰ４３０ 大小一样的质粒，其酶切物理图谱也与ｐＣＰＰ４３０ 完全相同；用地高辛标记的ｈａｒｐｉｎ 的结构基因ｈｒｐＮ 为探针对转化子中的质粒进行Ｓｏｕｔｈｅｒｎ ｂｌｏｔｔｉｎｇ 分析，结果在转化子中得到信号明显的杂交片段，而受体菌３０８Ｒ 中未出现杂交信号；提取细菌的外壁的蛋白质进行ＰＡＧＥ 分析，在大约４４ ｋｄ 的位置上３０８Ｒ（ｐＣＰＰ４３０） 比３０８Ｒ 明显多出１ 条带。这些结果表明成团泛菌能够表达梨火疫病菌的ｈｒｐ 基因簇，所产ｈａｒｐｉｎ
- 赵立平申泉李艳琴宁红秀张晋丹董汉松徐文联段明星
- 关键词：HARPIN工程菌
- 灵芝纤维素酶的纯化和性质研究被引量：12
- 1998年
- 从七种食用和药用真菌中筛选出纤维素分解能力较强的灵芝菌株（Ｇａｎｏｄｅｒｍａｌｕｃｉｄｕｍ５００５９），比较了几种不同碳源的固体发酵培养基对灵芝５００５９产内切β－葡聚糖酶（又称羧甲基纤维素酶，ＣＭＣ酶）能力的影响，确定了最佳培养时间为５～６ｄ。通过硫酸铵沉淀、凝胶过滤和离子交换层析初步提纯了灵芝的ＣＭＣ酶，得到三个组分。其中一个组分在ＳＤＳ－ＰＡＧＥ电泳中为一条带，为单亚基分子，分子量为４．５×１０４，等电点为３．２，以ＣＭＣ－Ｎａ为底物的米氏常数（Ｋｍ）为７．２ｇ／Ｌ。该酶活力的最适温度为５０℃，半致死温度约６７℃。该ＣＭＣ酶组分在ｐＨ３．０～６．０范围内稳定，最适ｐＨ约为２．０和４．０。
- 段明星朱涛徐文联郑佐兴
- 关键词：灵芝纤维素酶纯化
