李丽莉
- 作品数：15 被引量：26H指数：3
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- 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>
- 贝氏柯克斯体抑制宿主单核细胞的碳源代谢
- 2010年
- 贝氏柯克斯体是一种专性细胞内寄生的革兰阴性小球杆菌，为Q热的病原体。本文通过比较贝氏柯克斯体感染单核细胞和非感染单核细胞的蛋白表达谱，研究该病原体感染引发宿主细胞表达差异的蛋白。用贝氏柯克斯体I相毒株感染人单核细胞（THP一1），采用等电聚焦和SDS-PAGE双向电泳对感染单核细胞和非感染单核细胞进行比较蛋白质组学研究，用电泳图谱分析软件发现它们之间的差异表达蛋白，用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱仪鉴定差异表达蛋白。结果发现，电泳图谱分析发现137个差异蛋白，质谱分析鉴定到15种差异蛋白与细胞生理代谢有关。这些蛋白的表达变化说明贝氏柯克斯体感染单核细胞使宿主细胞碳源代谢受到抑制，由此可能影响单核细胞正常杀菌功能，而有利于贝氏柯克斯体在细胞内的生存。
- 李丽莉朱力温博海高尚先王恒樑陈梅玲
- 关键词：贝氏柯克斯体单核细胞蛋白质组
- 贝氏柯克斯体感染与免疫的研究
- 贝氏柯克斯体是一种嗜单核一巨噬细胞寄生的革兰阴氏性小球杆菌,为Q热的病原和潜在生物恐怖剂。将贝氏柯克斯体与人单核细胞(THP-1)在体外共同培养,结果发现人单核细胞对活贝氏柯克斯体的吞噬效率则显著低于对Ξγ射线灭活贝氏柯...
- 温博海孙长俭李青凤李丽莉
- 关键词：贝氏柯克斯体细菌感染免疫功能
- 文献传递
- 贝氏柯克斯体被单核细胞吞噬及其在单核细胞内生长的初步研究被引量：4
- 2005年
- 目的探讨贝氏柯克斯体被单核细胞吞噬及其在单核细胞内生长的规律。方法将泛影葡胺梯度超速离心纯化的I相贝氏柯克斯体(强毒株)与体外培养人单核细胞(THP-1)相互作用,用免疫荧光染色和显微镜检查单核细胞内贝氏柯克斯体。用Gamma射线灭活贝氏柯克斯体作平行实验。结果在4 h内分析单核细胞的吞噬作用,发现单核细胞内灭活贝氏柯克斯体的数量迅速增加,而活立克次体的数量无明显变化。在第1-6d的实验周期内,单核细胞内灭活贝氏柯克斯体数逐渐减少,第5d近于完全消失;而活贝氏柯克斯体的数量从第4d开始逐渐增加。结论单核细胞吞噬活贝氏柯克斯体的效率明显低于对灭活贝氏柯克斯体的吞噬;活贝氏柯克斯体可以在人单核细胞内缓慢生长繁殖,而灭活贝氏柯克斯体则在单核细胞内逐渐被清除。
- 李丽莉温博海张晶波邱玲陈梅玲牛东升
- 关键词：贝氏柯克斯体单核细胞
- 流式细胞术产品质量标准的建立及应用
- 2010年
- 流式细胞术(Flow cytometry,FCM)是一种对液流中排成单列的细胞或其他生物微粒逐个进行快速定量分析及分选的技术,为人类疾病的检测提供了快速有效的手段。目前已有很多商品化的FCM试剂盒面世,应用于免疫缺陷症、遗传病、细胞周期分析及肿瘤诊断、分型、愈后监测等领域。本文依据标记免疫类产品常规分析方法及产品说明书提供的评价方法,从FCM试剂的外观、准确性、稀释线性、精密性和染色稳定性等要点出发,对FCM产品质量标准的建立及应用作一综述。
- 李丽莉高尚先张春涛
- 关键词：流式细胞术淋巴细胞亚群
- 实时荧光定量PCR检测汉赛巴通体被引量：3
- 2007年
- 目的采用新型TaqMan-MGB探针建立检测汉赛巴通体的实时荧光定量PCR方法。方法根据汉赛巴通体特异的16S～23SrRNA间隔区序列设计引物和探针，以克隆的16S-23SrRNA间隔区基因片段作DNA模板，在荧光定量PCR检测仪（ABI 7900HT）上建立实时荧光定量检测方法，对所建立的方法分别进行敏感性、特异性及重复性分析，并且对模拟标本进行检测。结果建立的定量标准曲线的循环阈值（Ct）与模板拷贝数呈良好的线性关系（r=0．997）；与普通PCR相比较，荧光定量PCR检测的灵敏度是其1000倍。用荧光定量PCR检测其他相关立克次体和细菌DNA样本，除军团菌检出微弱信号（2个拷贝）外，其余检出结果均为0；对重复性进行了评价，批内和批间的变异系数在0．2％～1．9％之间。用荧光定量PCR检测汉赛巴通体感染的小鼠血标本，在感染后第2天、第3天、第5天，检出少量的汉赛巴通体，在感染后的第1天和第2天从脾脏样本中检出大量的汉赛巴通体。结论检测汉赛巴通体实时荧光定量PCR方法具有高度特异性和高敏感性以及良好的重复性，可用于快速检测各种样本中的微量汉赛巴通体以及作为汉赛巴通体感染的实验室诊断。
- 张晶波温博海陈梅玲李丽莉邱玲牛东升
- 关键词：实时定量PCR
- 2009年度甲胎蛋白(AFP)体外诊断试剂抽验质量分析被引量：2
- 2010年
- 目的对14家企业的19批次的甲胎蛋白(AFP)体外诊断试剂进行评价,考察我国该类试剂的质量。方法依据产品注册标准和自拟标准对所有试剂进行检测。结果与结论 18批次试剂符合产品注册标准,自拟标准检测16批次试剂符合关于剂量反应曲线的线性相关系数的要求,16批次试剂符合准确性的要求,15批次试剂检测4份临床质控血结果差别显著(P<0.05)。各企业AFP体外诊断试剂产品注册标准存在差异,直接影响产品质量,建议加强该类标准的制修订工作,对三类体外诊断试剂的注册检验实行统一管理。
- 张春涛黄颖于婷李丽莉孙彬裕沈舒高尚先
- 关键词：甲胎蛋白体外诊断试剂
- 检测贝氏柯克斯体的实时荧光定量PCR被引量：12
- 2005年
- 目的采用新型TaqMan-MGB探针建立检测贝氏柯克斯体的实时荧光定量PCR(real-timequantitativePCR)方法。方法根据贝氏柯克斯体特异的23SrRNA插入基因序列设计引物和探针,以克隆的23SrRNA插入基因片段作DNA模板,在荧光定量PCR检测仪(ABI7900型)上建立实时荧光定量检测方法。结果建立的定量标准曲线的循环阈值(Ct)与模板拷贝数呈良好的线性关系(r=0.997);与套式PCR相比较,荧光定量PCR检测敏感性是其100倍。用荧光定量PCR检测其它相关立克次体,检出结果均为0。用荧光定量PCR检测贝氏柯克斯体感染的小鼠脾脏标本,脾脏中贝氏柯克斯体的感染量与感染过程具有相关性。结论本研究建立的检测贝氏柯克斯体的实时荧光定量PCR具有很高的特异性和敏感性,特别适合样本中微量贝氏柯克斯体DNA的检测,其定量检测可用于动物实验中的贝氏柯克斯体感染程度的分析。
- 张晶波温博海陈梅玲邱玲牛东升李丽莉
- 关键词：贝氏柯克斯体实时定量PCRRRNA
- 荧光原位杂交(FISH)产品质量标准及检验技术平台的建立和应用被引量：1
- 2010年
- 黄颖陈忠苏艳李丽莉于婷张春涛
- 关键词：荧光原位杂交细胞遗传学技术基础医学研究
- 贝氏柯克斯体与单核细胞相互作用的研究
- 贝氏柯克斯体是一种专性细胞内寄生的革兰阴氏性小球杆菌，为Q热的病原体。单核一巨噬细胞是贝氏柯克斯体关键宿主细胞。本研究拟通过细胞生物学和蛋白质组学等方法研究贝氏柯克斯体与宿主细胞(单核细胞)的相互作用，进一步探讨贝氏柯克...
- 李丽莉
- 关键词：贝氏柯克斯体单核细胞蛋白质组学
- 文献传递
- 荧光定量PCR检测查菲埃立克体被引量：2
- 2006年
- 依据查菲埃立克体16S rRNA基因序列设计特异性引物和TaqMan-MGB探针，以克隆的查菲埃立克体16S rRNA基因片段作DNA模板，建立实时荧光定量PCR检测方法。与套式PCR相比较，荧光定量PCR检测的灵敏度是其30倍；用荧光定量PCR检测其他相关立克次体和细菌DNA样本，检出结果为0；对荧光定量PCR检测重复性进行分析，变异系数（CV）批内和批间误差在0．2％～2．0％之间。结果证明本研究建立的荧光定量PCR方法具有种特异性和良好的重复性，可用于检测感染样本中的微量查菲埃立克体DNA。
- 张晶波温博海陈梅玲杨晓李丽莉
- 关键词：查菲埃立克体实时荧光定量PCRRRNA基因
