李小红
- 作品数:6 被引量:5H指数:2
- 供职机构:石河子大学生命科学学院更多>>
- 发文基金:国家科技重大专项新疆生产建设兵团博士基金更多>>
- 相关领域:生物学农业科学更多>>
- 利用农杆菌毒蛋白基因提高花粉管通道法的转化效率的方法
- 本发明涉及一种利用农杆菌毒蛋白基因提高花粉管通道法的转化效率的方法,主要利用农杆菌介导植物转化机理,利用农杆菌协助转化的毒蛋白基因,在体外同需要转化的目的基因(绿色荧光蛋白基因)组装或混合,经脂质体包装后,采用花粉管通道...
- 祝建波张煜星崔百明王爱英刘红玲李小红王彦芹
- 文献传递
- 根癌土壤农杆菌Ti质粒VirE2基因的克隆及原核表达被引量:3
- 2010年
- 目的:获得根癌土壤农杆菌Ti质粒VirE2基因原核表达蛋白,为研究其功能打下基础。方法:利用PCR方法,根据发表的根癌土壤农杆菌(Agribacterium tumefaciens)C58Ti质粒基因序列,设计1对引物扩增了C58根癌土壤农杆菌Ti质粒毒性区蛋白VirE2基因,连接T载体经测序,结果与发表的序列同源性达100%。将目的片段从T载体上切下,连接至原核表达载体PET-30a上,转化E.coli DH5α,筛选出阳性克隆,提质粒转化E.coliBL21,用IPTG诱导表达。结果:经SDS-PAGE电泳,发现与对照比较在略小于66kDa处有特异条带,与理论大小(63.5kDa)相符。结论:克隆的VirE2基因获得了原核表达。
- 刘红玲李小红王彦芹王爱英祝建波
- 关键词:克隆
- 通过pR1aS导肽提高植物中绿色荧光蛋白的激发强度
- 2010年
- 绿色荧光蛋白在植物细胞胞质表达中对转化植物细胞的再生存在不利的影响,为增强绿色荧光蛋白在植物细胞中的表达,在mgfp的5'端连接了pR1aS信号肽序列,同时在3'末端引入滞留在内质网中的特异序列KDEL,成功构建了植物表达载体pBLG-pR1aS-gfp,经转基因烟草表达分析,结果表明:转化体植株显著增加了绿色荧光蛋白在烟草中的表达,同时消除了绿色荧光蛋白对植物潜在的光毒害。这为植物转基因转化频率的研究和转基因植物安全性评价提供了一种有利的工具。
- 王辉李小红王爱英沈海涛祝建波
- 关键词:绿色荧光蛋白烟草
- 根癌土壤农杆菌Ti质粒毒蛋白基因VirD_1的克隆及原核表达被引量:2
- 2005年
- 根癌土壤农杆菌Ti质粒毒性区VirD1蛋白表现拓扑异构酶活性,能解除T-DNA边界处25bp重复序列的超螺旋状态,使外源基因的插入成为可能。本实验以C58菌株为模板,设计了一对含有BamHI和XhoI酶切位点的引物,成功克隆了VirD1基因,并构建了原核表达载体pET30a-VirD1,将其在宿主菌BL21中获得了表达,为将来构建含有VirD1基因的植物表达载体并协助目的基因转化奠定基础。
- 王彦芹李小红包慧芳刘红玲祝建波
- 关键词:基因克隆原核表达
- 快捷、简单、有效的原生质体计数方法
- 2007年
- 1960年Cocking用酶法首次分离出了有活性的原生质体。1971年Takebe等从烟草叶片分离原生质体,经培养获得再生植株,原生质体的研究和应用进入了新的阶段。植物原生质体是除去细胞壁,仅为原生质膜所包围的裸露细胞,是基因转化的理想受体。植物原生质体培养是细胞融合的前提,并且可用于细胞器移植和细胞突变体筛选,是植物生物技术研究的重要组成部分和基础性工作,已成为植物品种改良的新途径。
- 李小红王辉
- 关键词:植物原生质体计数方法原生质体培养植物生物技术突变体筛选烟草叶片
- 利用农杆菌毒蛋白基因提高棉花转化效率的研究
- 棉花是新疆最重要的经济作物,在国民经济中占有重要的位置。利用基因工程技术将外源基因导入棉花细胞是现代遗传育种的重要途径,但从目前植物转化技术的发展来看,各种转化方法在棉花上应用仍受很大限制。本项目根据农杆菌介导植物转化机...
- 李小红
- 关键词:花粉管通道技术遗传育种核定位信号农杆菌介导
- 文献传递