李慧敏
- 作品数：14 被引量：11H指数：2
- 供职机构：华南农业大学更多>>
- 发文基金：广东省科技计划工业攻关项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生电气工程更多>>
- 不同启动子表达载体的构建及其体外活性分析被引量：2
- 2014年
- 本研究以禽网状内皮增生症病毒(reticuloendotheliosis virus,REV)囊膜糖蛋白(envelope,env)基因作为报告基因,定量检测不同启动子在体外的转录活性,为研发马立克氏病病毒(Marek’s disease virus,MDV)活载体疫苗、选择适宜的启动子提供依据。本试验构建6个含不同启动子,且能表达env基因的重组质粒,并将构建好的重组质粒转染到鸡胚成纤维细胞中,通过间接免疫荧光试验和实时荧光定量PCR检测不同启动子的表达转录水平。研究证明6种启动子均能使env基因在体外获得表达,且不同启动子的转录活性不同。比较发现MDV自身启动子相对其他组启动子的转录活性较弱,pec启动子的转录活性最强。
- 刘正伟李慧敏黄妙容郭凯王建丽李延鹏陈瑞爱
- 关键词：启动子活性分析
- 共免疫对跳蚤叮咬引起的猫过敏性皮炎保护效果评价
- 2018年
- 为评价共免疫r FSA1和p VAX-FSA1对于猫跳蚤过敏性皮炎(FAD)的预防免疫保护效果,用人工合成的跳蚤唾液抗原(FSA1)基因,分别构建原核表达质粒p ET28a-FSA1和真核表达质粒p VAX1-FSA1。p ET28a-FSA1转化E.coli BL21(DE3)感受态细胞,诱导表达纯化FSA1,获得r FSA1。12月龄以上猫共免疫r FSA1+p VAX-FSA1,第14天实施二免后,进行跳蚤叮咬,连续4轮,跳蚤叮咬结束后,统计皮炎评分。结果显示,第4轮攻跳蚤后共免疫r FSA1+p VAX-FSA1组的猫皮炎评分远远低于FAD对照组,说明共免疫r FSA1+p VAX-FSA1能抑制FAD症状,对跳蚤叮咬猫引起的过敏性皮炎有显著保护效果,可以作为预防猫跳蚤过敏性皮炎的良好办法。
- 赵兵温良海刘正伟王瀚张爱国李慧敏李延鹏陈瑞爱
- 马立克病病毒1型LZ1309株的分离鉴定与生物特性分析被引量：4
- 2015年
- 从免疫马立克病(MD)HVT和CVI988疫苗的甘肃某规模化鸡场采集MD阳性病鸡抗凝全血,分离淋巴细胞,接种于鸡胚成纤维细胞,分离出1株马立克病病毒(MDV)。病毒蚀斑纯化后经PCR和间接免疫荧光鉴定,该毒株为MDV1型毒株,命名为LZ1309株。PCR扩增并测序致瘤基因meq。核苷酸同源性分析结果显示,与国内分离株LS株的同源性最高(99.9%),与CVI988株的同源性最低(98.8%)。氨基酸序列分析显示,氨基酸突变位点符合国内强毒株的特征。为掌握LZ1309株的致病力,进行了LZ1309株攻毒试验。结果显示,LZ1309株攻毒组鸡的死亡率为13.3%,攻毒组鸡体重显著降低,肝、脾、腺胃乳头和心脏均出现肿瘤结节,胸腺和法氏囊严重萎缩。PCR检测攻毒鸡的器官组织,均能扩增到MDV1型强毒株meq基因的特异性条带。本研究成功分离鉴定出1株MDV强毒株,此结果为研究国内MDV毒力演化、致病机理和疫苗研发奠定了重要基础。
- 李慧敏罗琼刘郁夫郭凯赵兵温良海陈瑞爱
- 关键词：马立克病病毒生物特性
- 新城疫灭活标记疫苗(MG7株)对新兴土鸡2号免疫持续期研究
- 2018年
- 新城疫是危害我国养禽业最严重的疫病之一,该病为OIE所规定的动物必报疫病,也是我国规定的一类动物疫病,世界各国对该病的防控和研究一直十分重视。目前我国防控新城疫主要使用La Sota和Clone30两种疫苗株,二者均属于基因Ⅱ型;而田间流行的毒株主要是基因Ⅶ型NDV。
- 王宏飞罗琼罗琼同戈张晓楠朱启运朱启运李慧敏
- 关键词：新城疫免疫持续期标记疫苗土鸡灭活
- 一种紫外-蓝光吸收剂及其制备方法和制成的紫外-蓝光吸收材料
- 本发明属于材料领域，公开了一种紫外‑蓝光吸收剂及其制备方法和制成的紫外‑蓝光吸收材料。该紫外‑蓝光吸收剂具有如下式(Ⅰ)所示结构，其中R为‑OH或‑NH<Sub>2</Sub>。再将紫外‑蓝光吸收剂和甲基丙烯酸甲酯、聚甲...
- 郑明涛李慧敏梁业如刘应亮雷炳富肖勇董汉武胡航
- 文献传递
- 一种用于高倍率锂离子电池存储的碳化铁/氮掺杂中空碳微管及其制备方法和应用
- 本发明属于材料技术领域，公开了一种用于高倍率锂离子电池存储的碳化铁/氮掺杂中空碳微管及其制备方法和应用。该方法包括步骤：将油渣类衍生物置于盐酸溶液中搅拌混合；再置于反应釜中水热，用去离子水和乙醇洗涤水热产物，再干燥；然后...
- 郑明涛袁刚刘应亮李慧敏梁业如肖勇胡航董汉武雷炳富胡超凡
- 禽网状内皮组织增生症病毒的分离鉴定、全基因序列分析及致病性试验被引量：3
- 2014年
- 本试验采集广东某鸡场疑似禽网状内皮组织增生症患病鸡病料并进行处理,经接种DF1细胞、聚合酶链式反应(PCR)及特异性间接免疫荧光试验(IFA),分离鉴定出1株禽网状内皮组织增生症病毒(REV),命名为GD1210。依据已发表的REV前病毒全基因组序列设计并合成6对引物,采用分段扩增的方法完成了分离株的全基因组序列测定。结果显示,该分离株基因组序列全长8443bp。将该分离株的基因序列与国内外各参考株相应序列进行同源性比对分析,与SNV株亲缘关系最近,核苷酸同源性最高。将该分离株感染1日龄SPF鸡以鉴定其致病性,结果显示该分离株使SPF鸡产生严重的免疫抑制作用。
- 王建丽郭凯刘正伟刘郁夫刘传高赵大伟李慧敏董楠陈瑞爱
- 关键词：网状内皮组织增生症病毒
- 茄子果色上位D基因SmMYB1克隆及其在茄子花青素合成中的功能分析
- 花青素是自然界一类广泛存在于植物的花瓣、果实、茎和叶的水溶性天然色素，具有抗氧化作用，在植物生长发育过程中发挥着有益的作用，并且对人体健康有益。 茄子在茄科蔬菜生产中占有重要的地位，我国是世界上茄子种植面积最大的国家。...
- 李慧敏
- 关键词：茄子花青素
- 鸡新城疫基因Ⅶ型灭活标记疫苗(MG7株)最小有效免疫剂量的研究
- 2017年
- 为科学指导鸡新城疫基因Ⅶ型灭活标记疫苗(MG7株)的临床免疫剂量,通过测定免疫鸡HI抗体滴度和攻毒保护试验,进行了10日龄和30日龄SPF鸡最小有效免疫剂量的研究。动物实验使用10μL、20μL和40μL三种不同免疫剂量,免疫疫苗后21 d检测HI抗体效价,10日龄SPF鸡001批次疫苗HI抗体平均效价依次为4.8、6.2和6.5,攻毒保护率依次为80%、100%和100%,30日龄SPF鸡HI抗体平均效价依次为5.0、6.3和6.5,攻毒保护率依次为70%、100%和100%。结果表明,新城疫灭活标记疫苗(MG7株)HI抗体效价和保护效力呈正相关,免疫剂量与HI抗体效价和保护效力也呈正相关。用NDV基因Ⅶ型强毒G7株进行攻毒保护试验,两种日龄鸡在20μL的免疫剂量下,疫苗仍能达到良好的免疫保护效果。
- 罗琼李延鹏王宏飞同戈张晓楠朱启运李慧敏陈瑞爱
- 整合REV LTR序列的MDV弱毒株的分离鉴定与生物学特性被引量：2
- 2014年
- 【目的】从非免疫健康三黄鸡中分离到一株马立克氏病病毒(MDV),命名为MDV GD06株,本工作系统研究了其生物学特性。【方法】PCR扩增GD06株Meq基因及短末端重复区(RS)序列,进行序列分析,并用间接免疫荧光试验进行血清型特异性鉴定;通过接种SPF鸡和鸡胚成纤维细胞(CEF)来判定GD06株体内外的增殖能力;为确定GD06株的致病性,用1日龄SPF鸡进行攻毒试验。【结果】GD06株为MDV血清I型病毒,其基因组中自然整合禽网状内皮增殖症病毒(REV)的长末端重复序列(LTR),Meq基因富含脯氨酸的结构域比参考强毒株Md5多59个氨基酸,与MD商品化疫苗CVI988/Rispens和814株相符,具有弱毒株的特征。在接种CEF细胞96、120、144、168、192 h,GD06株病毒滴度分别为1.9×105、3.9×105、6.1×105、6.5×105、5.8×105PFU,明显比CVI988/Rispens(病毒滴度分别为1.3×105、3.5×105、5.0×105、5.7×105、4.7×105PFU)高(P<0.05);接种SPF鸡21、28天,GD06株在鸡体内的病毒滴度分别为740和350 PFU,明显比CVI988/Rispens株(病毒滴度分别为460、216 PFU)高(P<0.05),结果表明,GD06株在CEF细胞和鸡体内具有比CVI988/Rispens更快的增殖能力。人工接种攻毒实验表明,GD06株对SPF鸡没有致病性,不引免疫抑制。【结论】研究结果表明,MDV GD06株为国内首次分离的自然整合有REV LTR序列的重组MDV弱毒株。
- 陈瑞爱罗琼郭凯刘正伟李慧敏王建丽
- 关键词：马立克氏病病毒
