李文香
- 作品数：24 被引量：72H指数：6
- 供职机构：苏州大学医学部医学生物技术研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划江苏省高校自然科学研究项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 阳离子交换一步层析法纯化抗gp130单克隆抗体被引量：3
- 2005年
- 目的:建立从小鼠腹水中纯化抗gp130单克隆抗体(mAb)B-S12的一步层析方法。方法:小鼠mAb腹水样品经离心后,进行阳离子交换层析柱纯化。检查了上样缓冲液的pH值和洗脱液的离子强度梯度对mAb纯度的影响。纯化后mAb的生物学活性用MTT比色法检测。结果:在pH4.0、20mmol/LHEPES缓冲液条件下上样,用0～1.0mol/L的NaCl梯度洗脱,可获得纯度超过90%的mAbB-S12,回收率为52%。纯化后的mAb对XG-2细胞有明显的促增殖作用。结论:建立的一步纯化方法操作简便,所得mAb的纯度高及生物学活性好。
- 马泓冰庄羽美徐颖郁健锋刘琳李文香张学光
- 关键词：纯化单克隆抗体
- 体外活化扩增肿瘤抗原特异性CTL优化方案的研究
- T细胞介导的免疫应答在肿瘤免疫中有重要的作用。T细胞的激活和扩增需要多种免疫细胞和细胞因子的参与。DC作为功能最强的APC,摄取、加工和处理抗原后递呈给T细胞,赋予T细胞活化的第一信号,同时DC表面的CD80/CD86、...
- 席泓朱一蓓古涛李文新顾宗江李文香张学光
- 文献传递
- 可溶性CD40配体酶联检测试剂盒的研制及其运用被引量：1
- 2004年
- 目的 :建立灵敏、特异和稳定的人可溶性CD4 0配体 (sCD4 0L)酶联检测试剂盒。方法 :采用鼠抗人CD4 0L单克隆抗体 1B1为包被抗体 ,识别人CD4 0L不同位点的单克隆抗体 4F1经琥珀酰羟基生物素 (BNHS)标记后为检测抗体 ,建立双抗体夹心的人sCD4 0L酶联检测方法。在此基础上 ,测定 2 0 0例健康供血员血清和血浆中sCD4 0L的含量。结果 :成功研制人sCD4 0L酶联检测试剂盒 ,灵敏度为 0 5ng ml。该试剂盒 4℃放置 3个月 ,离散度 (CV) <± 6 9% ,回收率为 94 7%～ 10 4 8% ,提示该检测系统具有良好的灵敏度、稳定性和准确性 ,与国外商品化试剂盒的分析结果相似。应用该试剂盒测得的健康供血员血清和血浆sCD4 0L含量分别为 9 5 6± 4 71、2 98± 1 13ng ml。结论 :研制成灵敏、特异和稳定的人sCD4 0L酶标检测试剂盒 ,能够对血清和血浆中sCD4 0L进行准确定量分析 ,并首次证实血清和血浆中sCD4
- 樊一笋朱华亭李文香顾国浩施勤张寄南束永前张学光
- 关键词：可溶性CD40配体酶联免疫反应血小板
- 两步串联层析法纯化鼠抗人CD80单克隆抗体4E5被引量：1
- 2006年
- 采用阴离子交换与凝胶过滤两步串联层析法，纯化了小鼠腹水来源的CD80阻断型单克隆抗体4E5。腹水样品经离心、过滤预处理后，在Tris-HCl缓冲溶液（pH8．0，50mmol／L）条件下，上阴离子交换柱对目的单抗进行捕集，采用0-0．5mol／L NaCl浓度分步洗脱；含目的单抗的洗脱馏分再上凝胶过滤柱纯化，用PB缓冲溶液（pH7．2，20mmol／L）洗脱，获得目的单抗4E5，其生物学活性高、纯度大于95％，抗体总回收率达61％。
- 马泓冰邱玉华陶然李文香徐颖张学光
- 关键词：单克隆抗体腹水纯化
- 一株鼠抗人4-1BBL功能性单克隆抗体的研制及其生物学特性的研究
- 2008年
- 目的:鼠抗人4-1BBL功能性单克隆抗体的研制及其生物学特性的鉴定。方法:以高表达人4-1BBL分子的基因转染细胞L929/4-1BBL为免疫原,常规免疫BALB/c小鼠,采用B淋巴瘤杂交瘤技术进行细胞融合,经流式细胞术分析和多次克隆化培养,筛选特异性杂交瘤细胞株;采用Ig亚型快速定性试纸法、染色体核型分析、竞争结合抑制试验、间接免疫荧光法对单抗的生物学特性进行鉴定,并采用体外细胞计数和ELISA检测分析单抗对单核细胞的作用。结果:获得1株持续、稳定分泌鼠抗人4-1BBL单抗的杂交瘤细胞株,命名为3E7。该单抗能识别人白血病细胞株和单核细胞表面的4-1BBL分子。对单抗生物学功能的研究结果表明,该单抗能有效地促进外周血单核细胞体外生长,并促进IL-6和TNF-α的分泌。结论:成功地获得了一株鼠抗人4-1BBL功能性单克隆抗体3E7,该单抗能特异地识别人4-1BBL分子,并有效地通过激发4-1BBL逆向信号通路促进单核细胞的体外生长及细胞因子的分泌。
- 王旭东周斌李文香於葛华张光波张学光
- 关键词：4-1BBL单克隆抗体共刺激信号杂交瘤
- 两步串联层析法纯化鼠抗人CD28单克隆抗体2F5
- 目的:CD28分子在信号转导及自身免疫性疾病等中的作用已成为目前研究的热点。为了深入研究其功能,本研究小组制备了鼠抗人CD28单克隆抗体(mAb)2F5,并建立从小鼠腹水中纯化鼠抗人CD28单克隆抗体(Monoclona...
- 马泓冰孙中文徐颖李文香陶然陈洁张学光
- 关键词：纯化单克隆抗体
- 文献传递
- 共刺激分子在小鼠叶酸性肾病组织中的表达及其免疫病理意义被引量：3
- 2005年
- 观察共刺激分子在小鼠叶酸性肾病组织中的动态表达并分析叶酸肾病的免疫病理的可能机制。以小鼠叶酸性肾病为研究对象,采用免疫组织化学方法检测肾脏组织中CD40/CD40L、B7-1/CD28和4-1BB等共刺激分子的表达,免疫荧光标记和流式细胞术分析脾脏T淋巴细胞及其亚群,并行肾功能等常规检测。实验结果表明,病变先后涉及两个时期即急性期和慢性期。在早期,小鼠免疫应答增强,肾脏组织呈现CD40、B7-1、4-1BB的异常表达,CD28、CD40L在浸润淋巴细胞中表达,同时伴有炎症细胞浸润,表现为急性肾功能衰竭;在晚期,表现为慢性肾功能衰竭。同时肾脏组织呈现共刺激分子的异常表达和脾脏T淋巴细胞数量明显下降。这些均表明共刺激分子在小鼠叶酸性肾病不同阶段的发生发展中起着重要的作用。
- 戴继鸿李晓忠殷洪二徐颖李文香张学光
- 关键词：共刺激分子细胞浸润免疫病理
- 人B7-H4基因转染细胞的构建及其对T细胞的共刺激效应的初步研究被引量：7
- 2005年
- 目的构建含有人B7H4基因的重组逆转录病毒载体,获得稳定表达B7H4基因的L929细胞并初步研究其对T细胞的共信号作用及可能机制。方法从含人B7H4基因的cDNA序列FLJ22418中,采用PCR扩增出B7H4全长基因,双酶切装入逆转录病毒载体pEGZHATerm,与辅助病毒载体脂质体法共转染包装细胞293T,用其培养上清感染L929细胞72h后,经Zeocin筛选出稳定表达B7H4蛋白的L929细胞株;采用免疫荧光标记和流式细胞仪分析免疫分子的表达、3HTdR掺入检测细胞增殖以及ELISA测定细胞因子的水平。结果构建了含人B7H4基因的重组逆转录病毒载体和获得含有B7H4基因的重组病毒,筛选获得能稳定高表达人B7H4蛋白的L929转基因细胞;该转基因细胞对T细胞体外具有抑制增殖、活化和细胞因子分泌的作用。结论构建了稳定表达人B7H4蛋白的细胞株,B7H4分子在体外通过抑制T细胞分泌IL2和促进其凋亡作用可显著地下调T细胞功能的效应。
- 毛一香王勤陈洁陈永井施勤杨明峰李文香张学光
- 关键词：B7-H4逆转录病毒T细胞功能基因转染细胞重组逆转录病毒载体
- 肿瘤患者外周血单个核细胞来源DC的体外诱导及其功能被引量：3
- 2007年
- 目的:研究肿瘤患者外周血单个核细胞来源的树突状细胞(monocyte-deriveddendriticcells,Mo-DC)共刺激分子的表达及其功能。方法:选取11例肺癌、卵巢癌和胃癌患者及10例正常志愿者,分别经粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(gran-ulocytemacrophagecolonystimulatingfactor,GM-CSF)和白细胞介素4(IL-4)诱导外周血单个核细胞来源的DC,通过免疫荧光标记和流式细胞术分析、混合淋巴细胞反应(MLR)、FITC-dextran吞噬实验、微孔迁徙实验以及酶联免疫吸附试验(ELISA)等方法比较肿瘤患者和健康志愿者外周血单个核细胞来源DC的表型及功能差异。结果:肿瘤患者来源的Mo-DC在体外诱导早期持续高表达编程死亡-1配体1(programmeddeath-1ligand1,PD-L1),而PD-L2及CCR7、CXCR4的表达则较正常人低(P<0.05);患者来源的Mo-DC分泌高水平的IL-10,体外激发自体T细胞增殖及趋化T细胞尤其是趋化活化T细胞的能力明显低于正常人(P<0.05)。结论:肿瘤患者来源的Mo-DC可能由于自分泌高水平的IL-10和高表达PD-L1而影响其功能的行使。
- 朱一蓓张学光黄勇陈成李文香戴俊夏瑜吴明媛
- 关键词：树突状细胞白细胞介素10肿瘤免疫
- CD40配基化的肿瘤特异性树突状细胞介导Th1细胞分化的研究
- 2006年
- 目的:探讨CD40配基化的肿瘤特异性DCs在介导Th1细胞分化中的作用。方法:采用GM-CSF和IL-4联合方案体外诱导小鼠髓系DCs,并利用mCD40L-CHO和TNF-α分别刺激凋亡肿瘤细胞负载的DCs制备DCs瘤苗;3H-TdR掺入试验检测DCs对T淋巴细胞的促增殖效应;ELISA测定细胞培养上清中IL-10、IFN-γ、IL-12的含量;胞内染色和流式细胞术检测经成熟DCs活化的T细胞中CD4+IFN-γ+T和CD4+IL-4+T的比例。结果:体外刺激T细胞增殖能力在CD40配基化DCs组最高(P<0.05),CD40配基化DCs能更有效地促进活化T细胞分泌IFN-γ和介导CD4+IFN-γ+T细胞的分化(P<0.05),同时,CD40配基化DCs分泌IL-12的量也明显高于TNF-α组(P<0.05)。结论:CD40配基化的肿瘤特异性DCs体外能有效介导Th1细胞的分化。
- 陈成朱一蓓瞿秋霞周桓王勤於葛华李文香张学光
- 关键词：树突状细胞CD40TH1细胞
