李桂澜
- 作品数:10 被引量:22H指数:2
- 供职机构:北京大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域:生物学化学工程轻工技术与工程理学更多>>
- 高通量测序技术在食品微生物检测中的应用被引量:18
- 2019年
- 微生物超标及食源性致病菌引发的生物污染是影响国家公共卫生的主要因素.新一代的高通量测序技术因其高覆盖度、高灵敏度、高准确性和低成本等特点,已经作为食品安全检测最重要技术逐渐替代常规DNA诊断和微生物分型方法.本文通过综述测序的发展历史和二代测序原理及流程,着重论述以高通量测序为基础的16S rRNA、全基因组、宏基因组以及宏转录组分析在现代食品安全实验室中的应用,展现了高通量测序技术在食品微生物检测、食源性致病菌监控及食品发酵工艺等方面的巨大优势.
- 李桂澜匡华
- 关键词:高通量测序技术食品微生物检测RRNA全基因组测序
- 利用等温滴定量热仪测定胰蛋白酶活性
- 2023年
- 等温滴定量热技术可以直接测量化学反应吸收或者放出的热量。酶促反应伴随着吸放热过程,因此利用等温滴定量热仪可以测量酶活性。本文详细描述了等温滴定量热仪测定酶活性的原理、方法并对胰蛋白酶的活性进行了测试,研究了温度、转速、缓冲液等条件对胰蛋白酶活性的影响,并对实验过程中常见的滴定曲线形状进行了分析,结果表明温度变化导致k_(cat)、k_(m)有明显的变化,ΔH没有明显的变化。不同的缓冲液中k_(cat)、k_(m)没有明显的变化,但ΔH有明显的变化。对酶促反应的两种方法单次注入法和多次注入法进行了对比,结果表明单次注入法操作简单,多次注入法对酶浓度的变化更为敏感。
- 李辉张潇慧李桂澜
- 关键词:胰蛋白酶酶活性
- 一种用于测序的高通量扩增质粒的方法
- 本发明一种用于测序的高通量扩增质粒的方法,属于质粒扩增技术领域。包括:将10×phi29 DNA聚合酶缓冲液、Hexamer引物、待测样品和去离子水混合均匀,在95℃加热3分钟,然后置于冰上冷却,得到反应液(Ⅰ);在反应...
- 董志李桂澜
- 文献传递
- PCR产物的高通量测序方法及优化被引量:2
- 2016年
- PCR产物的高通量测序被广泛应用于功能基因筛选、肿瘤相关基因的突变和甲基化检测等。在高通量测序技术中,建库和上机测序实验一直是决定最终DNA数据质量的关键。作者优化了PCR产物样品的DNA文库制备条件和体系,设计了适合PCR产物特点上机测序方法,将已建库的PCR样品中混入一定量的基因组标准品后再上机测序,由此保证了测序数据的高质量和低冗余度。为低多样性DNA样品高通量测序技术方法运用提供方法上的参考。
- 李桂澜胥传来
- 关键词:PCR产物高通量测序技术
- 一种高通量的简便快速的测序产物磁珠纯化方法
- 本发明一种高通量的简便快速的测序产物磁珠纯化方法,属于遗传工程涉及的DNA或RNA的纯化方法技术领域。包括:将PCR产物置于96孔板中;在96孔板里加磁珠,再加酒精,振荡混匀;室温下静置,然后在磁力架上吸附,使溶液变清后...
- 董志李桂澜
- 文献传递
- 革兰氏阳性菌dUTPases及变形链球菌酮糖脱羧酶的结构和功能研究
- 本论文主要包括了两部分相对独立而且均比较完整的工作。第一部分内容主要是对来自革兰氏阳性菌的三个dUTPase的结构和生物功能的分析。尿嘧啶脱氧核苷三磷酸水解酶(dUTPase;EC3.6.1.23)主要在镁离子介导下将尿...
- 李桂澜
- 关键词:革兰氏阳性菌DUTPASE变形链球菌
- 表面活性剂对表面等离子体共振分析的影响被引量:2
- 2019年
- 利用等温滴定量热仪对表面活性剂聚山梨醇20的临界胶束浓度进行了分析,并利用表面等离子体共振分析仪分析了表面活性剂聚山梨醇20在分子间相互作用实验中的作用。分别利用添加表面活性剂与不添加表面活性剂的运行缓冲液进行分子间相互作用实验,对传感曲线进行了对比分析。结果表明,聚山梨醇20可以降低样品在管路及芯片表面的非特异吸附从而增强分子间的特异性结合。
- 李辉李桂澜董志
- 关键词:表面活性剂临界胶束浓度
- 基于动态光散射技术对样品溶液质量分析及实验优化
- 2019年
- 在生物分子相互作用研究和蛋白纯化等实验中,实验样品溶液质量、蛋白纯度和均一性一直是决定最终实验结果好坏的关键因素。该文利用动态光散射技术,测量溶液样品中分子的自相关函数曲线斜率,解析粒径大小分布,深入分析样品溶液质量的影响因素,优化实验方案。实验结果表明,动态光散射技术为分子生物学实验研究中的条件优化提供了有效的实验依据,大大提高了纯化实验后的蛋白质纯度,改进了生物分子相互作用研究中的实验数据质量。
- 李桂澜李辉董志
- 关键词:粒径
- 一种测序仪样品板基座
- 本实用新型公开了一种测序仪样品板基座,包括一板状基座,该基座具有网格状阵列式排布的96个孔,其特征在于,所述基座上设有磁珠分离装置,所述磁珠分离装置包括若干个环形柱状磁铁,阵列式排列分布在所述基座上,使每四个相邻孔之间至...
- 董志李桂澜李辉杜明
- 文献传递
- 一种适用于Sanger测序产物纯化的磁力架
- 本实用新型公开了一种适用于Sanger测序产物纯化的磁力架,包括环形磁铁、板体和背板,其中:所述板体的正面设置有96个孔,它们的位置和孔径对应于96孔PCR板;在板体的背面,96个正面孔的下方设有孔径和深度分别与环形磁铁...
- 董志李桂澜李辉杜明
- 文献传递