李禾
- 作品数：27 被引量：39H指数：4
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- 复合探针荧光定量PCR检测土拉弗朗西斯菌
- 2011年
- 目的:建立检测土拉弗朗西斯菌复合探针荧光定量PCR方法。方法:对土拉弗朗西斯菌的FopA基因设计引物和探针,用荧光定量PCR检测,并对特异性、灵敏度和重复性进行评价。结果:本方法对所试验的土拉弗朗西斯菌纯培养物的最低检测浓度为100 CFU/ml,定量的检测变异系数小于5%。在模拟的污染血液样品中的检出限为1×103 CFU/ml。结论:本文建立的复合探针荧光定量PCR方法能高效、敏感、特异地检测土拉弗朗西斯菌。
- 吕沁风郑伟吴忠华罗鹏何蕾孟军李禾
- 关键词：土拉弗朗西斯菌荧光定量PCR
- 转基因大米安全性评价方法
- 本发明公开了一种转基因大米安全性评价方法，该方法通过人淋巴细胞系传代培养，将转基因大米全蛋白提取物作用于人淋巴细胞，通过检测人淋巴细胞损伤程度及遗传损伤程度来评价其安全性，评价方法周期短，费用低，简便易行，检测敏感度高、...
- 郑伟吕沁风吴忠华李禾
- 不同加热方式对嗜肺军团菌环介导等温扩增检测法的影响
- 2011年
- 目的:研究不同的加热方式对嗜肺军团菌环介导等温扩增检测法的影响方法:用已知的13株嗜肺军团菌样本,采用空气浴、水浴和PCR仪同时进行环介导等温扩增,观察沉淀反应、荧光反应以及产物电泳结果。结果:水浴和PCR仪加热LAMP反应的沉淀产物较多,荧光反应较强,电泳检测结果较为明显。空气浴的3种检测结果均较弱。结论:采用水浴和PCR仪进行环介导等温扩增反应的效果较好,从仪器设备的成本及实验条件考虑,采用水浴是环介导等温扩增反应首选的加热方式。
- 吕沁风吴忠华郑伟徐琦孟军李禾
- 关键词：嗜肺军团菌水浴
- 嗜肺军团菌环介导等温扩增检测法的建立被引量：6
- 2010年
- 目的:建立一种快速简便的嗜肺军团菌分子检测方法。方法:运用环介导等温扩增技术(loop-mediated isothermal amplification,LAMP),设计一套引物特异性识别嗜肺军团菌毒力基因——mip基因的6个特殊区域,在恒温条件下,对8株嗜肺军团菌和5株其它细菌进行检测,并与普通PCR方法进行比对,验证该方法的特异性和灵敏度。结果:所有嗜肺军团菌扩增产物均产生肉眼可见的白色沉淀,而其它不同菌株均不产生沉淀;加入荧光染料smart green后,嗜肺军团菌扩增产物均产生强绿色荧光,其它菌株呈弱荧光。与普通PCR(检出限约为57.6 pg,)比,LAMP扩增反应的灵敏度大100倍左右,基因组DNA检出限为576 fg,阳性水样检出限为8 cfu/ml。结论:LAMP技术可在简易的实验环境中快速、特异、灵敏地检测嗜肺军团菌。
- 吕沁风郑伟罗鹏吴忠华李禾沈建根
- 关键词：基因扩增
- 抗结核菌糖脂抗原抗体及抗阿拉伯甘露糖抗原抗体并联检测在口岸肺结核病快速诊断中的应用
- 2010年
- 〔目的〕研究抗结核菌糖脂抗原(TBGL)抗体及抗阿拉伯甘露糖抗原(LAM)抗体并联检测在结核病血清学诊断中的价值。〔方法〕采集结核病患者及健康对照者血清,用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测抗TBGL抗体,用胶体金法检测抗LAM抗体。〔结果〕91例结核患者TBGL抗体、LAM抗体总阳性率均为62.6%,其中活动性肺结核病人的TBGL阳性率为65.3%,LAM阳性率为69.4%;非活动性结核病人TBGL阳性率为59.5%,LAM阳性率为54.8%,两组间差异不明显。肺结核病人两抗体并联检测阳性率为89.0%,明显高于单独抗体检测阳性率(P<0.05),特异性达85.7%。〔结论〕抗TBGL、LAM抗体并联检测敏感性、特异性高,方法快速简便,对口岸结核病预防控制有较高的实用价值。
- 郑伟李禾吴忠华吕沁风罗鹏孟军
- 关键词：血清结核
- 检测布鲁氏菌的试剂及复合探针荧光定量PCR检测布鲁氏菌的方法
- 本发明提供了一种检测布鲁氏菌的试剂，它包括以下上游引物、下游引物、荧光探针和淬灭探针；上游引物的基因序列为：5′-caagggcaaggtggaagatt-3′；下游引物的基因序列为：5′-ctgcgaccgatttga...
- 吴忠华吕沁风郑伟黄建可李禾
- 用于检测猴痘病毒的NASBA试剂盒及其应用
- 本发明公开了一种用于检测猴痘病毒的NASBA试剂盒及其应用。本发明所提供的NASBA试剂盒中含有用于检测猴痘病毒的组合物，所述组合物由一个引物对和一个探针组成；所述引物对由序列表中序列1和序列2所示的两条单链DNA分子组...
- 吕沁风郑伟吴忠华罗鹏徐琦何蕾李禾
- 文献传递
- 同时检测4种传染病病原体的蛋白质微阵列研究被引量：2
- 2008年
- 〔目的〕建立1种用蛋白质微阵列法可同时检测血清中艾滋病病毒(HIV)抗体、丙型肝炎病毒(HCV)抗体、梅毒螺旋体(TP)抗体和乙型肝炎病毒表面抗原的方法。〔方法〕将基因工程HIV、HCV、TP重组抗原和乙肝病毒单克隆抗体共价结合于固相载体玻片上,制成蛋白质微阵列。血清样本经稀释、加样、孵育、洗涤后,加上Cy3荧光标记物,用激光芯片扫描系统对蛋白质微阵列进行扫描成像。将获得的图像用Imagene专用分析软件进行分析,所获数据根据cutoff值自动生成判断结果。用此蛋白微阵列系统检测了100份4个项目皆阴性的血清标本,确定了其cutoff值。检测了经酶联免疫吸附试验(ELISA)筛选出4个项目皆阴性的标本40例;艾滋病病毒抗体阳性标本30例;乙肝表面抗原、丙肝抗体、梅毒特异性抗体阳性血清各100份。〔结果〕蛋白质微阵列法检测艾滋病病毒抗体、丙肝抗体和乙型肝炎表面抗原的阳性和阴性标本的符合率皆为100%,梅毒特异性抗体阳性符合率为97%,阴性符合率为100%。〔结论〕蛋白质微阵列法检测HIV、HCV、TP和HBsAg与ELISA法检测结果具有高度的符合率。该法具有高通量、快速、特异性强、操作简便等特点,适用于大规模样本的分析,在卫生检疫传染病检测方面具有应用和推广价值。
- 李禾吴忠华杨宁敏
- 关键词：HIV
- 逆转录-环介导等温扩增检测登革2型病毒的试剂及检测方法
- 本发明提供一种等温扩增检测登革2型病毒的试剂及其检测方法，能高效准确地检测登革2型病毒。试剂包括外引物F3、外引物B3、内引物FIP、内引物BIP；检测方法的逆转录-环介导的等温扩增RT-LAMP反应体系为引物混合物、模...
- 吕沁风吴忠华郑伟罗鹏李禾
- 文献传递
- 蛋白芯片技术在卫生检疫中的应用前景被引量：1
- 2008年
- 阐述了蛋白芯片技术基本原理、制备及分析过程、技术特点,应用领域存在的问题。结合卫生检疫工作的内容和特点,对蛋白芯片技术应用于出入境人员传染病监测方面进行探讨。由于出入境人群具有复杂多样、流动性高的特点,并有快速通关的要求,这就要求传染病的检测必须快速、高效、高通量和准确。蛋白芯片技术能进行传染病的检测和特异性分析,具有高通量、快速、高效、操作简单、结果准确、灵敏度高等特点,在卫生检疫传染病检测方面具有很好的应用前景。
- 吴忠华李禾杨宁敏
- 关键词：蛋白芯片检疫
