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李莉娟: 作品数：32 被引量：63H指数：3; 供职机构：华中农业大学水产学院更多>>; 发文基金：国家自然科学基金中央高校基本科研业务费专项资金国家教育部博士点基金更多>>; 相关领域：农业科学生物学医药卫生文化科学更多>>

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斑点叉尾鮰病毒实时荧光LAMP检测方法的建立被引量：2: 2021年; 斑点叉尾鮰病毒(Channel catfish virus, CCV)属于大DNA病毒,是一种能引起斑点叉尾鮰(Letalurus punetaus)病毒性疾病的重要病原。研究以编码产物为磷酸激酶的CCV ORF77基因为靶标,设计了能识别靶基因上的8个独立区域的6条特异引物,利用基于环介导等温扩增技术(Loop-mediated isothermal amplification, LAMP)建立了用于CCV的实时荧光LAMP快速检测方法。结果显示,建立的实时荧光LAMP检测方法在63℃恒温反应45min条件下,反应大约12min后出现明显的峰值,最低检测限度为100个拷贝的病毒质粒DNA,检出时间为35min;并且具有良好的特异性,与白斑综合症病毒(WSSV)、传染性皮下及造血组织坏死病毒(IHHNV)、锦鲤疱疹病毒(KHV)、真鲷虹彩病毒(RSIV)、传染性脾肾坏死病毒(ISKNV)和新加坡石斑鱼虹彩病毒(SGIV)等常见水生动物病原DNA均没有交叉反应;同一样品于试验内及试验间重复性试验发现,20个平行样品的扩增曲线基本重合,表现出良好的重复性。通过对实际样品的检测结果显示,实时荧光LAMP检测方法能够特异性的检出CCV。因此,研究建立的CCV实时荧光LAMP检测方法操作简单、检测快速、特异性好、灵敏度高、结果可靠,能为斑点叉尾鮰养殖现场和实验室的斑点叉尾鮰疱疹病毒病病原的快速诊断和实时监测方面提供技术支撑。; 郝凯刘洪岩陈校辉袁军法李莉娟边文冀赵哲; 关键词：环介导等温扩增技术

斑点叉尾鮰疱疹病毒PCR-ELISA检测方法的建立被引量：3: 2009年; 针对斑点叉尾鮰疱疹病毒(CCV)的ORF6基因设计引物和探针,PCR产物在扩增过程中标记地高辛,探针5′端用生物素标记,建立了CCV的敏感、快速、环保的PCR-ELISA检测方法。对反应条件进行了优化,并评估了该方法的特异性和敏感性。结果表明:该方法可特异性检测CCV DNA,与各对照均无交叉反应,具有高度特异性;该方法对CCV DNA的检测阈值为5 fg,敏感性是常规PCR检测方法的10倍。用此方法对人工感染样品进行检测,能够检测到感染组织中的CCV DNA。该方法能够定性和半定量检测CCV DNA,可用于斑点叉尾鮰疱疹病毒的检测、斑点叉尾鮰暴发性流行病的诊断。; 杜玉东陈孝煊吴志新王敏刘迁夏君王树云李莉娟; 关键词：PCR-ELISA 敏感性特异性

斑点叉尾鮰病毒（CCV）的纯化及其结构蛋白的质谱鉴定: 斑点叉尾鮰病毒病（CCVD）是造成斑点叉尾鮰养殖业重大经济损失最为严重的疾病之一。本文将斑点叉尾鮰病毒（CCV）感染斑点叉尾鮰卵巢细胞（CCO）后,采用蔗糖密度梯度离心法进行分离,可看到一条清晰的乳白色蛋白带。纯化后的病...; 毕鹏吴志新苏念李莉娟; 关键词：结构蛋白质谱; 文献传递

血红素加氧酶-1与病毒感染相互作用的研究进展被引量：1: 2013年; 血红素加氧酶-1(Heme oxygenase-1,HO-1)是血红素代谢的限速酶,也称为热休克蛋白32(Heat shock protein 32,HSP32),能被多种刺激因素诱导表达,具有细胞保护作用。研究发现病毒感染可调控HO-1的表达,HO-1的上调表达也可对抗病毒的感染,进而发挥其对细胞的保护作用。尽管HO-1与病毒相互作用的分子机制尚不清楚,但是HO-1与病毒感染的相关性研究已取得了一些成果,可为病毒性疾病的治疗提供新的方法。从病毒感染对HO-1表达的影响和HO-1的表达对病毒感染的影响两方面阐述了HO-1与病毒相互作用的研究进展。; 苏念袁军法李莉李莉娟; 关键词：病毒感染相互作用

鲤春病毒的感染下调血红素加氧酶1的表达: 血红素加氧酶1 (Heme oxygenase 1,HO-1)是血红素分解代谢的起始与限速酶,可将血红素分解为胆绿素,CO和铁.HO-1是一种热血克蛋白(Heat-shock protein 32,HSP32),可被多种...; 袁军法苏念王敏谢平石正丽李莉娟; 关键词：血红素加氧酶1

蛙病毒3介导棘胸蛙的暴发性死亡: 棘胸蛙(Quasipaa spinosa)，又名石蛙、石鸡，分布在中国南方的山溪水坑内或石洞岩隙中。随着环境的变化以及人为捕捞的影响，其种群数量持续减少。人工养殖石蛙既对保护生态环境有着重要的意义，又有很高的经济效益，现...; 李莉娟罗杨志顾泽茂袁军法; 关键词：棘胸蛙流行病学

大鳞鲃人工繁殖技术及胚胎发育观察被引量：4: 2018年; 从重庆引进大鳞鲃亲鱼进行了人工繁殖试验及胚胎发育观察。结果表明,注射LHRH-A23.5μg/kg、HCG 600 IU/kg、DOM 3.5μg/kg催产效果最佳,水温21~25℃,效应时间18 h,受精率68.0%,孵化率26.1%。雌性亲鱼相对产卵量7.7万/kg,卵为灰白色,漂浮性卵,无黏性,卵重360个/g,卵径1.5 mm,吸水后膨胀卵径达4.5 mm。孵化到仔鱼出膜需53~56 h,140 h后开口摄食。; 张棋黄敏李允朱文欢黄天乐刘子栋邵端李莉娟; 关键词：人工繁殖胚胎发育

蛙病毒3介导棘胸蛙的暴发性死亡: 棘胸蛙(Quasipaa spinosa),又名石蛙、石鸡,分布在中国南方的山溪水坑内或石洞岩隙中。随着环境的变化以及人为捕捞的影响,其种群数量持续减少。人工养殖石蛙既对保护生态环境有着重要的意义,又有很高的经济效益,现...; 李莉娟罗杨志顾泽茂袁军法; 关键词：棘胸蛙流行病学; 文献传递

Ⅱ型鲤疱疹病毒感染异育银鲫对鱼体血液中氧化应激指标的影响: 近年来病毒感染与氧化应激之间存在多种病理学关联受到广泛关注。病毒感染可引起机体广泛的氧化应激反应,并进一步加重疾病,严重甚至导致机体死亡。多种病毒感染机体后能使机体产生氧化应激,如人类HIV,HBV和流感病毒等,但水生动...; 袁军法李莉娟黄建; 关键词：异育银鲫氧化应激指标; 文献传递

Ⅱ型鲤疱疹病毒感染异育银鲫对鱼体血液中氧化应激指标的影响: 近年来病毒感染与氧化应激之间存在多种病理学关联受到广泛关注。病毒感染可引起机体广泛的氧化应激反应,并进一步加重疾病,严重甚至导致机体死亡。多种病毒感染机体后能使机体产生氧化应激,如人类HIV,HBV和流感病毒等,但水生动...; 袁军法李莉娟黄建; 关键词：异育银鲫氧化应激指标

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