杨鹏
- 作品数：7 被引量：25H指数：3
- 供职机构：石河子大学医学院第一附属医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金新疆生产建设兵团博士基金兵团博士基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- Neuritin对大鼠蛛网膜下腔出血后早期脑损伤影响的研究被引量：3
- 2016年
- 目的探究Neuritin对大鼠蛛网膜下腔出血(SAH)后早期脑损伤过程中内质网应激因子GRP78及血-脑脊液屏障通透性的影响。方法 2014年4月—2015年9月选取成年健康雄性SD大鼠144只,按照随机数字表法分为对照组、假手术组(Sham组)、SAH组、Neuritin组,各36只。再依据简单随机抽样法分别于3、6、12、24、48、72 h抽取每组6只大鼠处死,Neuritin组于处死前1 h采用立体定向技术向侧脑室注射Neuritin。建模后6、12、24、48、72 h处死大鼠前,记录各组大鼠Garcia神经功能评分;建模后3、6、12、24、48、72 h处死大鼠后,采用HE染色观察SAH建立情况,侧脑室微量注射亚甲蓝鉴定Neuritin注射情况;采用Western blotting法检测大鼠大脑皮质内质网应激因子GRP78表达水平;采用甲酰胺浸泡法检测大鼠脑内伊文蓝(EB)含量以评价血-脑脊液屏障通透性。结果 SAH组、Neuritin组建模后6、12、24、48、72 h大鼠Garcia神经功能评分均低于对照组和Sham组(P<0.05);Neuritin组建模后6、12、24、48、72 h大鼠Garcia神经功能评分均高于SAH组(P<0.05)。SAH组大鼠大脑表面弥散分布积血,其中在willis环、小脑延髓池及脑干腹侧有大量积血存在。Neuritin组大脑腹面有亚甲蓝循环存在,大脑背面无亚甲蓝,Neuritin侧脑室注射成功。SAH组建模后3、6、12、24、48、72 h GRP78表达水平高于对照组、Sham组(P<0.05);Neuritin组建模后6、12、24、48、72 h GRP78表达水平低于SAH组(P<0.05)。SAH组大鼠建模后3、6、12、24、48、72 h脑组织EB含量均高于对照组、Sham组(P<0.05);Neuritin组大鼠建模后3、12 h脑组织EB含量高于SAH组,建模后6、48、72 h脑组织EB含量低于SAH组(P<0.05)。结论 SAH后早期脑损伤过程中存在内质网应激反应,神经营养因子Neuritin可显著改变内质网应激因子GRP78表达水平,改善早期脑损伤过程中大鼠的神经行为学评分,并对血-脑脊液屏障通透性产生影响。
- 李晓天赵冬代林志朱立仓田卫东唐仕军朱文学杨鹏王业忠
- 关键词：蛛网膜下腔出血脑损伤神经生长因子类血脑屏障NEURITINGRP78
- 蛛网膜下腔出血后GRP78和CHOP的表达与大鼠海马区神经元凋亡的关系被引量：2
- 2015年
- 目的 探讨内质网应激标志性因子GRP78、CHOP的表达与蛛网膜下腔出血（SAH）后神经元凋亡的关系.方法 108只雄性SD大鼠随机分为对照组、假手术组与手术组.第1、6、12、24、48和72 h用神经功能缺陷评分法对大鼠神经行为学评分,TUNEL法检测神经元凋亡,Western blot检测GRP78和CHOP蛋白表达.结果 神经行为学评分显示,第12、24、48和72 h手术组比对照组及假手术组均明显降低,差异有统计学意义（P＜0.05）;神经元凋亡结果显示,手术组比对照组、假手术组明显增多,差异有统计学意义（P＜0.01）,手术组1h凋亡细胞较少,6h增多,24 h达到峰值,不同时间点凋亡细胞数比较差异有统计学意义（P＜0.01）;GRP78蛋白表达显示,第1、6、12、24和48 h手术组比对照组、假手术组均明显升高,差异有统计学意义（P＜0.01）,手术组1h开始上升,12h达到峰值,不同时间点比较差异有统计学意义（P＜0.01）;CHOP蛋白表达显示,手术组比对照组、假手术组明显增多,差异有统计学意义（P＜0.05）,手术组1h上升,24 h达到峰值,不同时间点比较差异有统计学意义（P＜0.01）;GRP78、CHOP与神经元凋亡之间均存在正相关（r=0.723、r=0.909,P＜0.01）.结论 GRP78和CHOP在SAH后早期脑损伤的病理过程中发挥了重要作用.
- 刘祺赵冬许健黄啸元杨鹏王业忠雷霆
- 关键词：蛛网膜下腔出血脑损伤神经元
- 长托宁对脂多糖引起的人脐静脉内皮细胞损伤的保护作用及其机制被引量：2
- 2012年
- 目的观察长托宁（PHC）对脂多糖（LPS）引起的人脐静脉内皮细胞（HUVEC）损伤的保护作用，并探讨其机制。方法将体外培养HUVEC分为5组：空白对照组、LPS组、LPS／PHC（10μg/L）组、LPS／PHC（25μg/L）组、LPS／PHC（50μg/L）组。噻唑蓝（MTT）比色法测定内皮细胞的存活率；化学比色法测定乳酸脱氢酶（LDH）浓度；硝酸还原酶法测定一氧化氮（NO）浓度；定量逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）检测诱导型一氧化氮合酶（iNOS）mRNA表达；Western blot法检测iNOS蛋白质含量；酶联免疫吸附试验（ELISA）测定核因子-κB（NF—κB）和信号转导和转录激活因子3（STAT3）活性。结果与空白对照组比较，LPS组细胞存活率[（60．31±8．76）％比（100．00±0．00）％]明显下降、LDH含量[（326±52）μmol／L比（125±25）μmol／L]和NO浓度[（55．49±10．16）μmol／L比（12．13±11．02）μmol／L]明显增加（P〈0．01）；而PHC可以逆转上述效应（P〈0．05）。同时PHC可以降低LPS导致的内皮细胞iNOS转录和蛋白质表达水平，下调NF—κB和STAT3的表达（P〈0．05）。结论长托宁可以减轻LPS对内皮细胞的损伤，其作用可能是通过抑制NF—κB和STAT3信号系缔．减少NO生成宴王Ⅲ的．
- 罗金龙谢艾妮刘环芹杨鹏李树生杨光田
- 关键词：长托宁脂多糖人脐静脉内皮细胞诱导型一氧化氮合酶一氧化氮
- 一种简便的皮层神经元原代培养方法的建立及其培养结果分析被引量：3
- 2015年
- 目的建立一种简便的皮层神经元原代培养方法,并鉴定其培养效果。方法取出生24 h内的SD大鼠大脑皮层组织,采用胰酶消化法获取神经元细胞悬液,用10%FBS+DMEM高糖培养基接种在经多聚赖氨酸包被的培养板中,4 h后全量换用Neurobasal+2%B27+0.5 mmol/L谷氨酰胺培养液。培养后采用倒置相差显微镜观察神经元形态变化,连续观察8天。神经元培养7~8天进行免疫荧光染色,于激光共聚焦显微镜下对神经元进行鉴定,计算神经元密度和纯度。结果皮层神经元接种时体积小,透亮,呈圆形,单个散在分布。接种后有少量细胞开始贴壁,2 h左右贴壁较多,少量细胞伸出短小的突起;4 h左右已基本贴壁,大量细胞伸出突起,周围光晕明显;培养3天时神经元突起明显伸长,相互交织,细胞透亮,立体感强,呈圆形、椭圆形、梭形;培养5~6天时神经元体积增大,突起交织成网状;培养7~8天时,神经元细胞体饱满,细胞质透亮,细胞核大而明显,细胞体周围折光性强,立体感好,突起交织成致密的网络结构。经免疫荧光染色后鉴定,分离培养的是神经元,密度1.5×106个/m L,纯度>90%。结论成功建立了一种操作简便的皮层神经元培养方法,该方法培养的神经元纯度高、密度大,可为今后的相关学科研究提供良好的细胞模型。
- 唐仕军赵冬朱立仓李晓天朱文学杨鹏杨鹏
- 关键词：皮层神经元原代培养B27细胞模型新生大鼠
- 氨基胍对氧-糖剥夺大鼠皮质神经元一氧化氮及半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3表达的影响研究被引量：2
- 2016年
- 目的探讨氨基胍对氧-糖剥夺大鼠皮质神经元一氧化氮(NO)及半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Caspase-3)表达的影响。方法 2014年11月—2015年7月选取新生24 h内SD大鼠12只,分离及培养大鼠皮质神经元,取原代培养8 d的皮质神经元,分为3组:正常对照组、氧-糖剥夺组、氨基胍组。正常对照组皮质神经元采用Neurobasal培养液+2%B27培养液添加剂培养,氧-糖剥夺组皮质神经元缺氧、缺糖处理45 min后,换Neurobasal培养液+2%B27培养液添加剂培养;氨基胍组皮质神经元缺氧、缺糖处理45 min后,换Neurobasal培养液+2%B27培养液添加剂培养的同时加入终浓度为10 mmol/L的氨基胍溶液。各组培养2、6、12 h,采用硝酸还原法检测细胞上清液中NO表达水平,采用Western blotting法检测Caspase-3表达水平。结果各组培养2、6、12 h时细胞上清液中NO、Caspase-3表达水平比较,差异均有统计学意义(P<0.05);其中氧-糖剥夺组、氨基胍组不同时间点细胞上清液中NO、Caspase-3表达水平较正常对照组升高(P<0.05);氨基胍组不同时间点细胞上清液中NO、Caspase-3表达水平较氧-糖剥夺组降低(P<0.05)。结论氨基胍可抑制氧-糖剥夺大鼠皮质神经元NO及神经元凋亡相关基因Caspase-3表达水平,从而抑制皮质神经元的凋亡,对皮质神经元具有保护作用。
- 唐仕军赵冬朱立仓李晓天朱文学杨鹏王业忠
- 关键词：神经元一氧化氮半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3氨基胍
- 氨基胍在大鼠蛛网膜下腔出血后早期脑损伤中的作用被引量：4
- 2015年
- 目的近期研究表明早期脑损伤是蛛网膜下腔出血患者死亡的首要原因,文中初步探讨氨基胍(aminoguanidine,AG)在蛛网膜下腔出血后早期脑损伤中起的作用。方法雄性SD大鼠68只,按照随机数字法分为4组:对照组(仅钻孔)、假手术组、蛛网膜下腔出血组、氨基胍组(分别钻孔并注入等渗盐水、股动脉血、股动脉血+AG),每组17只。视交叉前池注血法建立24 h大鼠蛛网膜下腔出血模型,HE染色鉴定模型。进行神经行为学评分(Garcia法),TUNEL法测神经元凋亡情况,Western blot检测诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,i NOS)蛋白、神经元特异性烯醇化酶(neuron-specific enolase,NSE)蛋白的表达。结果 HE染色结果显示蛛网膜下腔有较多红细胞存在。神经行为学评分显示蛛网膜下腔出血组分值[(14.47±0.62)分]较对照组[(17.94±0.24)分]、假手术组[(17.59±0.51)分]、氨基胍组[(15.71±0.47)分]显著降低(P<0.05)。TUNEL结果显示蛛网膜下腔出血组阳性细胞率[(42.38±2.38)%]较对照组[(6.35±0.94)%]、假手术组[(6.85±0.69)%]、氨基胍组[(30.48±2.89)%]显著升高(P<0.01);氨基胍组、对照组、假手术组阳性细胞率差异有统计学意义(P<0.05)。蛛网膜下腔出血组i NOS、NSE相对表达[(3.86±0.07)、(1.59±0.06)]较假手术组[(2.96±0.34)、(0.38±0.08)]、氨基胍组[(3.41±0.04)、(0.70±0.12)]、对照组[0,(0.35±0.09)]均显著升高(P<0.05)。各组i NOS、NSE蛋白表达量与TUNEL染色阳性细胞率均呈正相关(r=0.879、0.935,P<0.01)。结论在蛛网膜下腔出血后早期脑损伤中,AG可改善SD大鼠神经行为学功能,抑制神经元凋亡并下调i NOS、NSE的表达,具有减轻早期脑损伤的作用。
- 杨鹏赵冬刘祺姬云翔朱立仓戴晶许晖唐仕军朱文学李晓天王业忠
- 关键词：蛛网膜下腔出血早期脑损伤氨基胍神经元特异性烯醇化酶凋亡
- 穿心莲有效成分对巨噬细胞MMP-2、MMP-9表达和活性的影响被引量：9
- 2011年
- 目的探讨穿心莲有效成分(API0134)是否具有抑制小鼠腹腔巨噬细胞基质金属蛋白酶-2和基质金属蛋白酶-9(MMP-2,MMP-9)活性及其mRNA表达的作用。方法用腹腔冲洗的方法收集小鼠腹腔巨噬细胞,使用氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)刺激巨噬细胞,同时分别以不同浓度的API0134对巨噬细胞进行干预。采用免疫荧光方法、明胶酶谱法和RT-PCR的方法检测ox-LDL和API0134对巨噬细胞MMP-2、MMP-9活性和表达的影响。结果与对照组相比,ox-LDL组MMP-2及MMP-9活性和mRNA表达显著升高(均P<0.01)。与ox-LDL组相比,加入50μg/mL API0134组MMP-2及MMP-9的活性和mRNA表达变化不明显(均P>0.05),而加入100、200μg/mL API0134组的MMP-2及MMP-9的活性和mRNA表达均有不同程度的下降(均P<0.05)。结论穿心莲有效成分能够抑制ox-LDL对巨噬细胞MMP-2及MMP-9活性和mRNA表达的上调作用,因此可能具有维护粥样斑块稳定,减少斑块破裂危险的作用。
- 曹好好刘环芹杨鹏李树生
- 关键词：动脉粥样硬化穿心莲基质金属蛋白酶-2基质金属蛋白酶-9
