林磊
- 作品数:31 被引量:44H指数:3
- 供职机构:军事医学科学院微生物流行病研究所更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金北京市自然科学基金国家重点实验室开放基金更多>>
- 相关领域:医药卫生农业科学生物学更多>>
- EV-71型病毒蚀斑纯化方法
- 本发明公开了一种EV-71型病毒蚀斑纯化的方法。该方法包括下述步骤:1)制备单层vero细胞,加入含病毒的样品液,吸附1小时;2)将吸附后的细胞表面覆盖一层MEM固体培养基培养至病毒蚀斑出现;3)挑取病毒蚀斑获得病毒液。...
- 常国辉吴晓燕林磊罗彦军户义李靖杨银辉康晓平祝庆余
- H-NS对副溶血弧菌泳动能力的调控研究被引量:1
- 2015年
- 目的研究H-NS对副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus,VP)泳动能力的调控作用。方法将VP接种于泳动实验平板上,37℃静置培养4.5 h后,通过比较不同菌株间菌苔直径的差异来判定H-NS对泳动表型的影响。提取WT和hns基因突变株(Δhns)的总RNA,采用实时定量RT-PCR方法研究H-NS对极鞭毛蛋白基因fla A的转录调控关系。将fla A启动子区DNA克隆入p HRP309质粒的β-半乳糖苷酶基因上游,构建Lac Z重组质粒,并将该重组质粒转入WT和Δhns中,通过比较二者中β-半乳糖苷酶活性的差异研究H-NS对fla A的调控关系。结果与结论动力表型结果显示,H-NS可促进VP的泳动能力;实时定量RT-PCR和Lac Z报告基因融合实验结果表明H-NS正调控fla A的转录。这表明H-NS至少可通过激活fla A的转录而促进VP的泳动能力。
- 王洁林磊孙凤军董新波侯书宁周冬生殷喆张义全
- 关键词:副溶血弧菌
- 新型阳离子基因传递载体PEI-PBLG的细胞转染研究被引量:7
- 2007年
- 对新型阳离子聚合物PEI(10kD)-PBLG进行研究,重点考察其基因转染效率与细胞毒性,探讨其作为基因载体的可能性。通过粒径分析及扫描电镜(SEM)观察PEI(10kD)-PBLG与质粒pEGFP自组装形成的颗粒形态及粒径,预测其进入细胞的可能性。使用MTT比色法分析PEI(10kD)-PBLG、PEI(25kD).PBLG、PEI(10kD)和PEI(25kD)的细胞毒性差异。选用表达增强型绿色荧光蛋白的质粒pEGFP作为报告基因模型,将其与PEI(10kD)-PBLG自组装后,分别转染真核细胞株Hela、COS-7、Vero-E6和ECV304,应用流式细胞术检测细胞转染效率,并比较了血清、缓冲液、细胞谱等多种因素对基因转染效率的影响。PEI(10kD)-PBLG可包裹质粒形成粒径100—120nm的纳米复合物,适合介导质粒进入细胞。该纳米粒复合物对转染缓冲液的敏感度较低,并能够在10%血清存在的条件下,转染全部实验用细胞株,尤其对Hela的转染效率最高,其次是COS-7、Vero-E6和ECV304;其中PEI-PBLG(10kD)/pEGFP复合物转染Hela细胞的比率为45.02%,高于Pri(10kD)/pEGFP的29.16%;PEI(10kD)-PBLG的细胞毒性作用显著低于PEI(25kD)、PEI(10kD)和PEI(25kD)-PBLG。新型阳离子多聚物PEI(10kD)-PBLG在提高PEI介导的基因转染效率的同时降低了其细胞毒性,提高了生物相容性,有望成为基因转移的有效载体。
- 尉继征林磊熊伟祝庆余
- 关键词:基因传递转染效率
- 肠道病毒及其应用
- 本发明公开了一株肠道病毒及其应用。该肠道病毒,其名称为肠道病毒EV71型(Enterovirus 71)河南分离株2,保藏登记号为CGMCC №.3675。该肠道病毒具有较强的致病性,可以用于手足口病动物模型的建立和疫苗...
- 常国辉吴晓燕林磊罗彦军祝庆余
- 一种以痘苗病毒载体为基础的反向遗传学系统建立及应用
- 本发明涉及以痘苗病毒载体为基础的反向遗传学系统建立及应用,尤其涉及一种重组冠状病毒及其应用。本发明提供的蛋白,来源于含鼠肝炎冠状病毒(mouse hepatitis virus,MHV)A59株,命名为mNSP1,是如下...
- 常国辉林磊吴晓燕柳洪涛李靖户义罗彦军张雨孙伟康晓平杨银辉祝庆余
- 新甲型H1N1流感病毒及疫情分析被引量:31
- 2009年
- 新甲型H1N1流感疫情正在从北美洲向全球逐步蔓延,引起了全世界的关注。本文介绍了此次新甲型H1N1流感的流行概况及特点,分析了病毒的遗传学特征,并尝试性地对新甲型H1N1流感的国际流行态势及对我国的影响进行了初步评估。初步分析认为,新甲型H1N1流感病毒极有可能引发一次全球范围的流感大流行,但其对人类健康造成的危害程度会比1918、1957和1968年3次流感要低;在中国不可避免地会出现一些散发病例甚至小规模的局部暴发流行,但近期造成大规模暴发流行的可能性较小。
- 林磊童贻刚祝庆余
- 关键词:进化
- 痘苗病毒载体基因修饰系统的建立及重组冠状病毒的应用
- 本发明涉及以痘苗病毒载体为基础的反向遗传学系统建立及应用,尤其涉及一种重组冠状病毒及其应用。本发明提供的蛋白,来源于含鼠肝炎冠状病毒(mouse hepatitis virus,MHV)A59株,命名为mNSP1,是如下...
- 常国辉林磊吴晓燕柳洪涛李靖户义罗彦军张雨孙伟康晓平杨银辉祝庆余
- 文献传递
- SARS微胶囊疫苗的制备及其免疫原性研究
- 目的:将灭活 SARS 冠状病毒微胶囊化,改进现有疫苗的剂型和投递方式。方法:用可生物降解的合成高分子材料聚乙二醇-聚丙交酯乙交酯(MPEG-PLGA) 作载体,通过膜乳化-液中干燥法,制备基质型 SARS 微胶囊疫苗。...
- 熊伟林磊李佳明祝庆余
- 文献传递
- 痘苗病毒载体基因修饰系统的建立及重组冠状病毒的应用
- 本发明涉及以痘苗病毒载体为基础的反向遗传学系统建立及应用,尤其涉及一种重组冠状病毒及其应用。本发明提供的蛋白,来源于含鼠肝炎冠状病毒(mouse hepatitis virus,MHV)A59株,命名为mNSP1,是如下...
- 常国辉林磊吴晓燕柳洪涛李靖户义罗彦军张雨孙伟康晓平杨银辉祝庆余
- 一株肠道病毒及其应用
- 本发明公开了一株肠道病毒及其应用。该肠道病毒,其名称为肠道病毒EV71型(Enterovirus 71)重庆分离株1,保藏登记号为CGMCC №.3674。实验证明,本发明的肠道病毒EV71型(Enterovirus 7...
- 常国辉吴晓燕林磊罗彦军祝庆余
- 文献传递