柏芸
- 作品数：3 被引量：7H指数：2
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- 人端粒酶hTERT可诱导RNAi系统的建立及其对TREx-HeLa细胞生长的影响被引量：4
- 2008年
- 目的:建立可诱导性沉默hTERT的RNA干扰系统,并初步探讨端粒酶与细胞增殖调控之间的关系。方法:构建沉默端粒酶催化亚基hTERT的Tet-on可诱导性RNAi载体psiRNA-hH1/TO-hTERTshRNA,并稳定转染表达TR的TREx-HeLa细胞,用半定量RT-PCR检测hTERT的转录后水平,TRAP法检测端粒酶活性。MTT法检测细胞的增殖,流式细胞仪和Hoechst33342染色法观察细胞凋亡。结果:构建了可诱导性沉默端粒酶催化亚基hTERT的重组体psiRNA-hH1/TO-hTERTshRNA,并建立了可诱导性沉默hTERT的TREx-HeLa细胞株。短期内的端粒酶活性降低后TREx-HeLa细胞生长增殖有下降趋势,而其凋亡情况则未见明显变化。结论:本研究建立了可诱导沉默hTERT的RNAi系统,为研究端粒酶活性与细胞增殖和衰老的关系提供了实验基础。
- 柏芸杜贻鹏骆晓枫米洋袁广卿何霞陈展辉周俊宜
- 关键词：RNA干扰端粒末端转移酶
- 端粒酶锤头状核酶抑制肺癌细胞端粒酶活性及细胞增殖的实验研究被引量：3
- 2007年
- 目的:探讨端粒酶特异性核酶对A549肺癌细胞端粒酶活性、增殖和凋亡的影响。方法:构建人端粒酶锤头状核酶真核表达质粒,稳定转染人A549肺癌细胞株。RT-PCR法检测核酶的表达以及hTERT mRNA、hTR的含量,TRAP法测定细胞端粒酶活性,MTT法、流式细胞仪等测定细胞增殖及凋亡。结果:稳定转染核酶重组体的细胞克隆,均可以检测到核酶的表达,端粒酶活性被抑制,clonehTERT1～6和clonehTR(1、3、5)的平均端粒酶活性分别是空白对照组的(27±18)%和(36±13)%,P值分别为0.000和0.013;clonehTERT1～6hTERT mRNA及clonehTR1～6hTR含量下降,分别是空白对照组的(30±19)%和(49±17)%,P值分别为0.000和0.001;clonehTERT1、clonehTR3生长较空白对照组及阴性对照组减缓,凋亡率增加;而clonehTERT1又较clonehTR3生长慢,凋亡率高(凋亡率分别为21.5%和16.1%)。结论:端粒酶特异性核酶能明显抑制端粒酶活性和细胞增殖,促进细胞凋亡;端粒酶hTERT mR-NA可能是比端粒酶RNA更为理想的端粒酶抑制剂的靶点。
- 何霞周俊宜朱振宇黄小荣谢金卫王于柏芸米洋陶莎
- 关键词：端粒末端转移酶端粒
- 人端粒酶hTERT可诱导RNAi系统的建立及其对TREx-hela细胞生长状态的影响
- 端粒(telomere)是真核生物染色体线性DNA分子末端的特殊结构，对维持染色体稳定性和DNA完整复制具有重要作用。端粒酶是一种能以自带RNA为模板，逆转录合成端粒DNA并加于染色体末端的核糖核蛋白。端粒酶调节亚单位h...
- 柏芸
- 关键词：RNA干扰端粒酶细胞增殖细胞凋亡
- 文献传递
