段华新
- 作品数：50 被引量：171H指数：7
- 供职机构：湖南师范大学更多>>
- 发文基金：湖南省自然科学基金国家自然科学基金中国博士后科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 人脐血造血干／祖细胞的生物反应器大规模扩增及移植实验被引量：2
- 2009年
- 目的利用生物反应器大规模扩增人脐血造血干／祖细胞，并通过动物移植实验检验该方法的有效性。方法采集抗凝脐血10份，分离出单个核细胞（MNC），分别进行生物反应器扩增培养和静态扩增培养。检测扩增前后细胞表面CD34、CD38、CD133、CD184和CD62L分子的表达，并进行造血干／祖细胞集落的培养。取非肥胖糖尿病重症联合免疫缺陷小鼠，以X射线照射后，分为4组，其中MNC组小鼠注射未经扩增培养的MNC；静态扩增组小鼠注射经过静态扩增培养的细胞；反应器扩增组小鼠注射经过生物反应器扩增培养的细胞；空白对照组小鼠注射生理盐水。移植后6周处死存活小鼠，收集骨髓细胞，检测其中CD45^＋、CD3^＋、CD19^＋和CD33^＋细胞的含量以及人特异的Cart—I和Alu基因的表达。结果生物反应器扩增前MNC为（1．2～2．8）×10^8个，扩增后为（3．7～12．6）×10^8个，扩增后的细胞数明显高于静态扩增培养者（P〈（0.01）。经生物反应器扩增后所形成的红系集落形成单位、粒一巨噬细胞集落形成单位数明显高于经静态扩增者（P〈0．05）。移植6周后，空白对照组小鼠均死亡，MNC组存活率为35％，静态扩增组存活率为30％，反应器扩增组存活率为62．9％，后者明显高于前二者（P〈0．05）。各组存活小鼠骨髓细胞中均检测到Alu基因和Cart—I基因的表达以及人源CD33^＋、CD45^＋、CD3^＋及CD19^＋细胞。结论利用生物反应器可大规模扩增人脐血造血干／祖细胞，所得细胞能植入小鼠体内，并能获得造血功能重建。
- 毛平段华新王彩霞李迎霄邓婷芬许艳丽罗畅如
- 关键词：脐血干细胞移植细胞培养技术生物反应器小鼠SCID
- 感染所致104例血小板减少的临床研究被引量：15
- 2014年
- 目的:探讨感染因素导致血小板减少患者的临床特点。方法:收集2011年1月~2013年12月期间,湖南省人民医院收治的明确由感染导致的血小板减少的104例患者的病例资料,回顾性分析患者血小板减少程度、感染部位、感染病原生物、白细胞计数、血红蛋白、骨髓细胞学、降钙素原、C反应蛋白、乳酸脱氢酶、血沉及出血情况。结果:(104例患者中Ⅰ度血小板减少26例,占25.0%,Ⅱ度血小板减少42例,占40.4%,Ⅲ度血小板减少16例,占15.4%,Ⅳ度血小板减少20例,占19.2%;降钙素原检测68例,其中63例升高,均数为1.08+0.52ng/mL,与血小板数目负相关(r=-0.643,P<0.01)。C反应蛋白检测89例,76例升高,平均34.7+21.6 mg/L,与血小板数目负相关(r=-0.660,P<0.01)。乳酸脱氢酶检测44例,29例升高,均数为628.21+223.42U/L,与血小板数目负相关(r=-0.818,P<0.01)。血沉检测96例,86例升高,平均46.8+30.2mm/h,与血小板数目负相关(r=-0.700,P<0.01)。57.6%(60例)伴有贫血,22.4%(23例)伴有白细胞减少,11.7%(12例)同时伴贫血和WBC减少,25.0%(26例)伴有白细胞升高。本组患者有48例行骨髓检查,增生活跃以上39例、增生低下9例;6例巨核细胞总数大于150个,7例小于7个,35例巨核细胞总数在7~150个之间;21例有临床出血。结论:感染所致的血小板减少患者血小板数目与降钙素原、C反应蛋白、乳酸脱氢酶和血沉负相关。
- 段华新彭浪杨扬杨扬庄鑫周明肖佩玲周明周明李薇
- 关键词：血小板减少
- LFA-1和VLA-4参与人高增殖潜能内皮祖细胞与血管内皮的黏附和跨内皮迁移被引量：7
- 2008年
- 为了了解淋巴细胞功能相关抗原1(lymphocyte function-associated antigen 1,LFA-1)和极迟反应抗原4(very late antigen 4,VLA-4)在高增殖潜能内皮祖细胞(high proliferative potential endothelial progenitor cells,HPP-EPCs)归巢过程中与血管内皮的黏附和跨内皮迁移中的作用,利用流式细胞术检测HPP-EPC中整合蛋白β1和β2的表达以及小鼠骨髓内皮细胞相应的受体的表达。利用体外黏附和迁移实验研究经过功能级别的中和抗体阻断VLA-4和LFA-1后HPP-EPC黏附和迁移细胞数目的变化。结果表明,HPP-EPC表达整合蛋白β1和β2,活化后小鼠骨髓内皮细胞表达细胞间黏附分子1(intercellular adhesion molecule 1,ICAM-1)和血管细胞黏附分子1(vascular cell adhesion molecule 1,VCAM-1);加CD11a抗体组黏附细胞或CD49d抗体组黏附和迁移细胞均较同型对照抗体组少,而且加CD11a和CD49d两种抗体联用组黏附和迁移细胞明显减少,其细胞数较任何单一抗体组少。结论:LFA-1和VLA-4在HPP-EPC与血管内皮的黏附和跨内皮迁移中发挥了重要的作用。
- 段华新卢光琇程腊梅
- 关键词：LFA-1VLA-4
- MMP-9蛋白及mRNA在乳腺癌组织中的表达被引量：3
- 2014年
- 目的:探讨基质金属蛋白-9(MMP-9)蛋白及mRNA在乳腺癌中的表达。方法:采用免疫组化和半定量RT-PCR的方法检测45例乳腺癌及20例乳腺良性病变中MMP-9蛋白及mRNA的水平。结果:MMP-9蛋白及mRNA在乳腺良性病变组织中几乎不表达,乳腺癌中表达率显著增高,各组间差异有显著性,而且MMP-9过表达与淋巴结转移有关。结论:MMP-9在乳腺癌侵袭和转移中发挥重要作用,有可能作为判断乳腺癌浸润转移能力的参考指标之一。
- 杨扬段华新
- 关键词：乳腺癌基质金属蛋白酶-9免疫组织化学逆转录聚合酶链反应
- SPECT骨显像对多发性骨髓瘤诊断的应用被引量：9
- 2002年
- 目的 :研究SPECT骨显像对多发性骨髓瘤 (multiplemyeloma ,MM)的诊断价值。方法 :4 6例经临床确诊为MM的患者 ,均行SPECT骨显像、X线平片检查、骨髓穿刺涂片或活检及相关实验室检查 ,结合骨穿及其它检查结果 ,分析SPECT骨显像对MM的诊断意义 ,并用SPECT骨显像对部分患者进行追踪观察 ,评价SPECT骨显像对MM治疗效果的动态监测作用。结果 :4 6例MM患者中 ,有 4 4例SPECT骨显像表现为全身骨骼多处骨质代谢异常 ,大部分患者表现为全身多处骨质代谢异常 ,其中以脊柱、双肋、骨盆骨质代谢异常为多见。对 2例患者进行追踪 ,1例治疗后复查SPECT骨显像示骨质代谢异常的范围缩小 ,骨髓穿刺证实病情好转 ;1例复查SPECT骨显像示骨质代谢异常的范围明显扩大 ,患者病情加重 ,不久死亡。结论 :SPECT骨显像是MM极重要的辅助检查之一 ,其灵敏度高 ,但诊断必须结合临床。
- 胡硕邓豪余李新辉段华新梁昌华
- 关键词：SPECT骨显像放射性核素显像
- 人脐血造血干／祖细胞的磁力搅拌悬浮培养及移植实验被引量：1
- 2009年
- 目的探讨磁搅拌大规模培养体系对人脐血造血祖细胞的扩增效果以及扩增的人造血祖细胞植入动物体内后的造血重建情况。方法从新鲜抗凝脐血中分离出单个核细胞（MNC），以添加干细胞因子、酪氨酸激酶受体3配基及血小板生成素的无血清培养体系进行培养。静态扩增组的细胞置于T25培养瓶中培养，磁搅拌悬浮扩增组（磁搅拌扩增组）的细胞采用Celstir装置进行培养，培养体系为50～100ml。培养7d后进行细胞计数、集落培养检测和细胞表面分子表达的测定。以不进行培养者为对照组。非肥胖糖尿病重症联合免疫缺陷（NOD／SCID）小鼠在接受2．5Gy的亚致死剂量X射线照射后分别从尾静脉输入上述静态扩增组、磁搅拌扩增组和对照组的MNC（5×10^6个），另设不移植的空白对照组。观察小鼠的存活情况，6周后处死存活小鼠，检测骨髓细胞中CD34^＋细胞、CD3^＋细胞、CD19^＋细胞、CD33^＋细胞及CD45^＋细胞的含量以及人特异的Cart—I和Alu基因的表达。结果经过7天的培养，磁搅拌扩增组的造血祖细胞扩增倍数为（2．8±0．45）倍，明显高于静态扩增组的（2．1±0．48）倍（P〈0．01）。磁搅拌扩增组形成的红系集落、粒-巨噬细胞集落数均明显高于静态扩增组（P〈0．05）。静态扩增组扩增后的CD34^＋细胞、CD34^＋CD38^-细胞和CD133^＋细胞含量均高于磁搅拌扩增组（P〈0．05），而CD184^＋细胞和CD62L^＋细胞含量低于磁搅拌扩增组（P〈0．01）。移植后6周，对照组、静态扩增组和磁搅拌扩增组分别有3、4、5只小鼠存活，三组间两两比较，6周存活率的差异无统计学意义（P〉0．05）。存活6周的小鼠，其骨髓中能检出人特异性CD34^＋细胞，以及CD3^＋细胞、CD19^＋细胞、CD33^＋细胞及CD45^＋细胞，也检测到人Alu基因和Cart—I基因的表达。结论磁搅拌培养能大规模扩增脐�
- 段华新毛平罗畅如许艳丽谢健晋张玉平
- 关键词：脐血造血干细胞细胞培养技术磁力学
- 磁力搅拌悬浮培养大规模扩增脐血造血祖细胞被引量：2
- 2008年
- 为了利用磁力搅拌悬浮培养装置大规模体外扩增脐血造血祖细胞,从脐血分离单个核细胞,以无血清培养基stem span添加干细胞因子、FLT-3配基及血小板生成素为培养体系进行培养。先研究磁场(25和50mT)对静态扩增培养的造血祖细胞生长和集落形成能力的影响,再研究磁力搅拌悬浮大规模培养对造血细胞总数扩增、造血集落形成和表面分子标志表达变化。结果表明,在0,25和50mT磁场组和磁转子组,细胞总数扩增倍数和造血集落形成数在各组间均无明显区别(p>0.05)。经过7天的扩增培养,磁力搅拌悬浮大规模培养细胞总数扩增倍数为2.8±0.45,高于静态培养细胞总数扩增倍数(2.1±0.48)(p<0.01);磁力搅拌悬浮培养组形成的红系集落数(1983.5±582.6)、粒-巨噬细胞集落数(186.4±62.7)明显高于静态培养形成的相应的造血集落数(分别为1396.2±425.7和136.5±40.8)(p均<0.05)。磁力搅拌悬浮扩增后造血干细胞(CD34+、CD34+/CD38-或CD133+)比例分别为(0.9±0.34)%、(0.7±0.21)%和(1.1±0.35)%,低于静态培养的干细胞比例[分别为(1.4±0.35)%、(1.2±0.34)%和(1.6±0.68%)](p均<0.05);但是,归巢相关分子CD184和CD62L高于静态扩增培养。结论:磁力搅拌悬浮装置可能有利于脐血造血祖细胞规模扩增,本研究结果还有待于动物实验及临床移植试验进一步验证。
- 段华新毛平邓婷芬罗畅如许艳丽张玉平
- 关键词：造血祖细胞细胞扩增脐血
- IL-21和IL-18对脐血来源的CIK细胞体外作用研究被引量：1
- 2010年
- 探讨了IL-2l和IL-18对脐血来源CIK细胞增殖和抗肿瘤活性的影响.用淋巴细胞液从新鲜脐血分离单个核细胞,在传统CIK细胞培养基础上采用添加重组人细胞因子IL-2l和IL-18的方法体外培养CIK细胞.实验共设4组,A组为对照组:IL-2+anti-CD3mAb+IFN-γ;B组:IL-2+anti-CD3mAb+IFN-γ+IL-2l;C组:IL-2+anti-CD3mAb+IFN-γ+IL-18;D组:IL-2+anti-CD3mAb+IFN-γ+IL-21+IL-18.在培养第3、6、9、12、14 d,应用血球计数仪进行细胞计数;在培养第14 d,应用流式细胞术检测各组脐血来源CIK细胞CD3CD56阳性表达;应用酶联免疫吸附试验检测培养上清IFN-γ的浓度;以白血病细胞系K562细胞为靶细胞,用MTT法检测各组CIK细胞对K562细胞的杀伤活性.细胞培养第6 d时,D组细胞数较A组细胞数多,差异有显著性(P<0.05),但其余各组间细胞数无明显差异(各P>0.05).其余各天计数时各组间细胞数无明显差异(各P>0.05).培养第14 d,CD3+CD56+细胞占细胞总数比例在B组、C组和D组均高于对照组(各P<0.01),且CD3+CD56+细胞占细胞总数比例在D组均高于B组和C组(P<0.05),但B组与C组间无统计学差别(P>0.05).B组、C组和D组培养液上清IFN-γ的浓度均明显高于A组培养上清IFN-γ的浓度(各P<0.01),而且D组均高于B组和C组(各P<0.05),且B组高于C组(P<0.05).B组、C组和D组对K562细胞的杀伤活性均高于A组(各P<0.01),而且D组杀伤活性均高于B组和C组(各P<0.05),且B组高于C组(P<0.01).IL-21和IL-18能显著提升CIK细胞培养上清IFN-γ浓度、CD3+CD56+细胞比例和细胞杀伤活性.
- 杨新宇肖佩玲方亦兵段华新周明
- 关键词：脐血
- 西乐葆对鼻咽癌CNE-1细胞增殖和凋亡的影响被引量：1
- 2010年
- 目的探讨鼻咽癌CNE-1细胞中环氧化酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)的表达及其选择性抑制剂通过抑制CNE-1细胞增殖和诱导其凋亡从而起抗肿瘤作用。方法细胞免疫化学法检测COX-2在鼻咽癌CNE-1细胞中的表达,对鼻咽癌CNE-1细胞以不同的西乐葆浓度0、1.25、2.50和5.00μM设A、B、C、D4个实验组药物干预,再分别行四唑盐(MTT)比色试验、克隆形成实验、流式细胞仪计数检测细胞的增殖能力、克隆形成能力及早、晚期凋亡4项指标。结果COX-2在CNE-1细胞内高表达;MTT法测得A组OD值与C、D组之间差异有显著性,A组与B组之间差异无显著性(P>0.05),B、C、D组两两比较差异有显著性,提示1.25μM西乐葆对CNE-1细胞增殖无影响,2.50～5.00μM西乐葆明显抑制CNE-1细胞增殖,且抑制作用随西乐葆剂量增加而增强,克隆形成及早、晚期凋亡率A组与B、C、D组比较差异均有显著性(各P<0.05),B组与C组差异无显著性(P>0.05),B组与D组之间差异有显著性(P<0.05);C、D组之间的差异无显著性(P>0.05)。提示西乐葆对CNE-1细胞的克隆形成能力有抑制作用,对CNE-1细胞早、晚期凋亡有明显的诱导作用,其作用与西乐葆浓度存在相关性,5.00μM较1.25μM西乐葆对CNE-1细胞增殖抑制和诱导凋亡作用明显增强,而在1.25μM与2.50μM间、2.50μM与5.00μM间比较,其对CNE-1细胞增殖抑制和诱导凋亡作用差异无显著性。结论①CNE-1鼻咽癌细胞为COX-2阳性表达细胞。②西乐葆对CNE-1细胞的增殖、克隆形成能力具有抑制作用,并能诱导早、晚期凋亡,从而对CNE-1细胞存在抗肿瘤作用。③西乐葆对CNE-1细胞的抗肿瘤作用与西乐葆浓度存在剂量相关性。
- 戴幼艺刘保安段华新
- 关键词：鼻咽癌增殖凋亡
- IMRT联合高压氧治疗中晚期非小细胞肺癌的疗效观察被引量：4
- 2020年
- 目的探讨调强放射治疗(intensity-modulated radiation therapy,IMRT)联合高压氧治疗中晚期非小细胞肺癌的临床疗效。方法选取2015年1月—2019年12月就诊于湖南省人民医院肿瘤科的非小细胞肺癌患者64例,采取随机数字表法将其分成联合治疗组和单纯治疗组,各32例,二组患者均在同步化疗基础上予以肺部原发灶及淋巴结累及野放疗,但联合治疗组在放疗期间联合高压氧治疗。比较二组患者近期临床疗效、放射性肺损伤以及生活质量情况。结果联合治疗组和单纯治疗组患者的近期疗效比较,联合治疗组患者其疾病控制率优于单纯治疗组(90.6%vs.71.9%,P=0.05),但二组患者总体有效率比较差异无统计学意义(62.5%vs.59.4%,P=0.80)。且通过二组患者追踪随访发现总体生存率差异无统计学意义(Log Rank=1.77,P=0.18)。二组患者临床疗效比较,联合治疗组患者急性放射性肺损伤和慢性放射性肺损伤均低于单纯治疗组(Z=-2.07,P=0.04和Z=-2.13,P=0.03)。二组患者治疗半年后生活质量评分均较治疗前有明显改善,但与单纯治疗组患者比较,高压氧联合治疗对于改善患者气促、胸痛更为明显(均P<0.05)。结论 IMRT联合高压氧治疗中晚期非小细胞肺癌患者虽无法提高患者总体生存率,但能明显降低放射性肺损伤发生率,并能改善患者气促、胸痛等症状,从而提高患者生活质量。
- 骆晴晴刘劲段华新符佳江金琼刘舟唐黎
- 关键词：IMRT高压氧非小细胞肺癌放射性肺损伤
