汪铮 作品数:25 被引量:51 H指数:4 供职机构: 上海交通大学医学院附属仁济医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 上海市浦江人才计划项目 上海市科学技术委员会资助项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
磁性纳米簇标记小鼠胚胎干细胞的体外研究 2009年 通过制备表面带正电荷(Cationic Magnetic Nanoclusters,CMNCs)和负电荷(Anionic Magnetic Nanoclusters,AMNCs)的磁性纳米簇,分别在体外对小鼠胚胎干细胞(mouse Embryonic Stem Cells,mESC)进行标记.采用Prussianblue染色、电镜观察鉴定2种磁性纳米簇对mESC标记率的结果表明:CMNCs细胞标记组铁浓度在0.03~0.09mmol/L和AMNCs细胞标记组铁浓度在0.3~0.9mmol/L时,90%以上细胞被标记,透射电镜可见磁性纳米簇颗粒位于胞浆中.用7-AAD和CCK-8试剂盒分别检测标记后mESC的活力和增殖能力,结果显示:CMNCs细胞标记组在低于0.3mmol/L浓度标记后,对mESC的增殖能力与正常未标记组比较,差异无统计学意义(P〉0.01);AMNCs细胞标记组在高于0.06mmol/L浓度标记时与对照组比较,差异有统计学意义(P〈0.01).与AMNCs相比,CMNCs在mESC标记方面表现出了优良的特性. 李金辉 李海 程昌明 张春富 古宏晨 汪铮关键词:小鼠胚胎干细胞 核磁共振成像 脐带间充质干细胞移植治疗帕金森病8例 被引量:13 2011年 背景:中枢神经系统的神经细胞是一种终末细胞,任何病理过程导致的神经元丢失都将是一个不可逆过程。目的:观察间充质干细胞移植治疗帕金森病患者神经功能的效果。方法:选择2010-08/11上海455医院干细胞移植中心收治的帕金森病患者8例,男4例,女4例,年龄50~78岁。所有患者均住院治疗,自第2周起应用脐带间充质干细胞进行颈动脉穿刺移植治疗,采用帕金森病统一评分量表(Unified Parkinson's Disease Rating Scale,UPDRS)对患者移植前后神经功能进行评定,分值越高表示神经功能缺损越严重。结果与结论:8例患者均进入结果分析。与移植前相比,8例患者移植后1个月帕金森病统一评分量表分值均明显降低(P〈0.05),主要集中在对震颤、强直的改善,而运动迟缓、姿势不稳等临床症状无明显改善。8例患者均未出现移植物抗宿主病。提示脐带间充质干细胞移植可以一定程度地改善帕金森病患者的临床症状,提高患者生活质量。 邱云 汪铮 路红社关键词:脐带间充质干细胞 细胞移植 帕金森病 神经变性 震颤 强直 口腔鳞癌抑癌基因表达的研究 该文运用免疫组化、原位杂交等技术研究口腔鳞癌P53、P16抑癌基因的表达及其在临床病理上的意义.结果表明P53和P16在口腔鳞癌中有异常改变,但两者的发生为非相关事件.P53的改变和肿瘤的浸润与淋巴转移有关,而P16与肿... 汪铮关键词:口腔鳞癌 癌前病变 P16 PCNA 原位杂交 肿瘤干细胞学说与结直肠癌的形成和多药耐药 2010年 对化疗药物耐药是肿瘤化疗失败的主要原因,肿瘤干细胞理论为重新认识肿瘤化疗药物的耐药机制提供了新思路。近年,许多学者从结直肠肿瘤组织中分离出肿瘤干细胞,并提出肿瘤干细胞致瘤模型和耐药模型学说,很好地解释了药物治疗后肿瘤复发的最根本原因。本文就肿瘤干细胞与结直肠癌的形成和多药耐药作一综述,旨在为进一步研究肿瘤干细胞与结直肠癌的内在联系提供参考。 徐锡涛 童锦禄 汪铮 冉志华关键词:肿瘤干细胞 结直肠肿瘤 抗药性 肿瘤 人胚胎成纤维细胞的培养及饲养层的制备 被引量:2 2008年 目的从人胚胎躯干中分离、培养人胚胎成纤维细胞,建立人胚胎成纤维细胞饲养层用于人精原干细胞的培养。方法利用酶消化法从孕5~9周龄人胚胎躯干中分离培养人胚胎成纤维细胞,制作饲养层,使用不同浓度丝裂霉素C处理,以细胞形态、生长曲线作为胚胎成纤维细胞和饲养层的评价指标。结果从人胚胎中成功分离培养出人胚胎成纤维细胞,该细胞可传代15代以上,且经过传代及冷冻复苏后生物学特性无改变。12.5mg/L丝裂霉素C作用2h可达到较好处理效果。结论成功分离和培养人胚胎来源的成纤维细胞,用于人精原干细胞饲养层的制作。 王毓斌 陈斌 张志玲 王颖超 王鸿祥 向祖琼 卢永宁 胡凯 杨怡珂 韩银发 汪铮 王益鑫 黄翼然关键词:成纤维细胞 胚胎 细胞培养技术 脂肪组织血管基质部分中克隆形成细胞治疗膝骨关节炎的能力 2015年 背景:脂肪组织消化后得到的血管基质部分是多种细胞的混合体,其中以克隆样生长的细胞组分可能是真正具有"干性"维持能力的脂肪间充质干细胞。目的:分离、传代、培养脂肪组织血管基质部分中的克隆形成细胞,并检测其在动物模型中修复膝关节软骨的能力。方法:培养新鲜分离得到的脂肪组织血管基质部分,挑选其中以克隆样生长的贴壁细胞,消化、传代、培养至第3代。通过手术建立骨关节炎兔模型,将第3代克隆形成细胞移植入模型兔关节腔,与未进行细胞移植治疗的模型兔进行比较,观察兔膝关节软骨的再生情况。结果与结论:脂肪组织中血管基质部分细胞接种后第3天,贴壁细胞中出现克隆样生长的细胞集落,生长至第5天时,克隆样生长的细胞集落数和周围的单个细胞数均增加,传代至第3代时,仍然呈克隆样的集落生长,梭形形态。大体观察和MRI检查此类克隆形成细胞能在关节腔内帮助软骨修复,增加滑液分泌,同时有助于控制炎症,溃疡面积呈缩小趋势。实验结果有助于优化脂肪间充质干细胞的体外分离、培养体系,并为临床上治疗骨关节炎提供了新的思路。 吕品雷 苏约翰 曹蕴 汪铮关键词:干细胞 脂肪干细胞 脂肪间充质干细胞 体外扩增 体外模拟干细胞微环境培养扩增脐血及脐带基质源性间充质干细胞 被引量:1 2012年 背景:建立稳健的扩增体系,在体外扩增时最大限度地获得治疗剂量的干细胞数,同时保存干细胞的特性是临床实验室亟待解决的问题。目的:建立体外模拟干细胞微环境细胞外基质扩增脐血间充质干细胞及脐带间充质干细胞的方法,并与传统的2-D培养体系比较。方法:建立体外模拟干细胞微环境细胞外基质,体外分离脐血间充质干细胞及脐带间充质干细胞后分别接种到细胞外基质及传统的2-D塑料培养体系,分别从细胞计数及细胞表面标志物的变化,评估两种扩增体系对脐血间充质干细胞及脐带间充质干细胞体外扩增的优劣。结果与结论:使用骨髓源性的细胞外基质培养体系单位时间脐血间充质干细胞及脐带间充质干细胞产量是2-D体系的4~6倍,并且流式细胞仪检测显示细胞外基质体系能更好地保持干细胞的表面标记。因此,3-D较2-D培养系更接近生理环境,已建立的骨髓源性细胞外基质培养体系能保持间充质干细胞的特性,为短时间内快速获取更大数目同质、高活性的间充质干细胞提供了可能。 邱云 郑青 萧树东 汪铮关键词:脐血间充质干细胞 脐带间充质干细胞 细胞外基质 培养扩增 干细胞微环境的体外模拟 被引量:6 2011年 背景:细胞外基质是组织微环境的重要组分,为维持细胞功能提供了关键的生化和物理信号。目的:对体外模拟骨髓干细胞微环境的研究进展进行综述,着重于介绍体外再造细胞外基质。方法:应用计算机检索Pubmed(1999-01/2010-10)、Embase(1999-01/2010-10)数据库中关于干细胞微环境的文章,以"mesenchymal stem cells;extracellular matrix;niche;growth factor modulation;culture in vitro"为检索词进行检索。初检得到321篇文献,根据纳入标准选择关于干细胞微环境的23篇文献进行综述。结果与结论:骨髓源性的细胞外基质培养体系能保持间充质干细胞的特性,对纯化这些细胞和形成更多数量的同质间充质干细胞提供了便利。使用3D合成材料建立一个独特的骨架,包被组织特异性的间充质干细胞蛋白,并添加正确的生长因子组合,有利于调控间充质干细胞的分化方向。 邱云 郑青 萧树东 汪铮关键词:微环境 间充质干细胞 细胞外基质 生长因子调控 体外培养 脐带间充质干细胞治疗脊髓小脑性共济失调12例(英文) 2012年 背景:目前尚未见应用脐带间充质干细胞治疗脊髓小脑性共济失调的报道。目的:观察脐带间充质干细胞治疗脊髓小脑性共济失调的临床效果。方法:选择 2010-09/12 解放军 455 医院干细胞移植中心收治的 12 例脊髓小脑共济失调患者,给予脐带间充质干细胞鞘内注射, 每次 10 7 个细胞,1 次/周,4 次为 1 个疗程。结果与结论:患者治疗后 1 个月与治疗前比较国际合作共济失调评分量表评分及日常生活量表评分均明显降低(P < 0.05),提示患者的神经功能显著改善,总有效率为 16.7%。说明脐带间充质干细胞鞘内注射治疗可以在一定程度上改善脊髓小脑性共济失调患者的临床症状,提高患者生活质量。 邱云 汪铮 路红社 许鹏 陈文怡 路延光 丁永红关键词:脊髓小脑性共济失调 间充质干细胞 诱导多能干细胞建系及体外造血祖细胞定向分化体系的建立 被引量:5 2014年 背景:目前,大量文献报道了诱导多能性干细胞系的建立,但大规模体外诱导分化造血祖细胞的研究还缺乏深入的探讨。目的:建立诱导多能性干细胞体外定向诱导形成造血祖细胞的方法。方法:采用慢病毒感染的方法将含有Oct4、Sox2、Nanog和Lin28全能性基因的慢病毒颗粒转导人皮肤成纤维细胞,获得了诱导多能性干细胞;在诱导分化体系中添加了Y-27632,克服干细胞扩增中的凋亡现象;运用OP9细胞产生的条件培养液建立诱导多能性干细胞体外定向分化形成造血祖细胞的分化体系。结果与结论:①前3代细胞克隆传代时,诱导多能性干细胞发生凋亡的现象很多,很难大规模扩增培养。培养基中添加阻断ROCK活化的抑制剂,能够明显抑制胚胎干细胞的凋亡。②诱导多能性干细胞在OP9细胞条件培养液作用下,经过体外诱导分化,形成CD34+造血祖细胞。 沈洁 李金辉 阮静 邱云 朱殷 崔大祥 范志宏 汪铮关键词:干细胞 造血祖细胞 体外分化