游嘉
- 作品数：5 被引量：20H指数：3
- 供职机构：中日友好医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省医学科学技术研究基金全球变化研究国家重大科学研究计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 糖基化终末产物对胰岛β细胞的损伤及作用机制研究进展被引量：7
- 2015年
- 胰岛β细胞的功能障碍和凋亡是糖尿病病程中持续高糖的主要原因。糖基化终末产物(AGEs)作为糖毒性的重要作用机制与胰岛β细胞的损伤关系密切。今年来研究指出AGEs通过氧化应激反应可引起胰岛β细胞胰岛素合成功能障碍,胰岛素释放功能障碍,并促使胰岛β细胞凋亡;除此之外,AGEs还可抑制胰岛β细胞发生自噬作用从而促胰岛β细胞凋亡。因此,明确AGEs对胰岛β细胞损伤机制对于糖尿病发病机制的研究起着重要作用,并将对糖尿病的治疗提供新的方向。
- 游嘉张文健娄晋宁
- 关键词：糖基化终末产物胰岛Β细胞凋亡
- RNA干扰下调HE4基因表达对人卵巢癌SK-OV-3细胞增殖和侵袭的影响被引量：3
- 2014年
- 目的应用RNA干扰技术下调人附睾蛋白HE4基因表达水平,观察HE4对人卵巢癌SK-OV-3细胞增殖和侵袭能力的影响。方法化学合成3对HE4特异性小分子干扰RNA(siRNA),脂质体法转染人卵巢癌细胞系SK-OV-3(HE4-siRNA组),同时以非特异序列siRNA转染的SK-OV-3细胞(阴性对照组)和正常培养的SK-OV-3细胞(正常对照组)为对照,于转染后48 h,采用实时荧光定量PCR技术(RT-qPCR)和Western blot方法分别检测HE4 mRNA及蛋白表达水平。采用CCK8试剂盒检测卵巢癌细胞增殖活性的变化,穿膜小室模型测定HE4对细胞侵袭能力的影响。结果与正常对照组相比,HE4-siRNA转染卵巢癌SK-OV-3细胞48 h后,HE4 mRNA的表达水平显著下降,仅为正常对照组的12.7%(P<0.01),与之相应HE4蛋白表达也显著下降,而转染非特异序列的阴性对照组与正常对照组之间的差异无统计学意义(P>0.05)。HE4-siRNA下调卵巢癌SK-OV-3细胞HE4表达后,细胞增殖受到明显抑制,细胞增殖活性仅为正常对照组的60%,阴性对照组细胞增殖未见明显变化。体外侵袭实验显示,HE4-siRNA组穿膜细胞数为每视野(21.8±2.86)个,显著低于正常对照组(187.4±11.17)个(P<0.01)和阴性对照组(177.8±9.76)个(P<0.01),而阴性对照组和正常对照组两组之间差异无统计学意义(P>0.05)。结论 HE4特异性siRNA能成功下调SK-OV-3细胞中HE4基因的表达,显著降低卵巢癌细胞增殖和侵袭能力,HE4有可能成为人卵巢癌侵袭转移防治的重要靶点。
- 房青王在游嘉詹雪梅杨爱莲魏继红房昭
- 关键词：卵巢肿瘤RNA干扰细胞增殖HE4
- 抑制腺苷酸活化蛋白激酶活性对MCAO大鼠血脑屏障的保护作用及机制研究被引量：7
- 2015年
- 目的初步探索抑制腺苷酸活化蛋白激酶（AMPK）的活性对脑缺血再灌注损伤血脑屏障（BBB）的保护作用及其作用机制。方法按照随机数字表法将200只雄性SD大鼠分为假手术组、模型组（脑缺血2h再灌注0，24和72h1及CompoundC给药组（缺血即刻腹腔注射20mg／kgAMPK特异性抑制剂Compoundc），每组40只。采用大脑中动脉线栓法建立大鼠急性局灶性大脑中动脉闭塞（MCAO）模型，用ZeaLonga法存缺血再灌注0，24和72h时分别对大鼠的神经功能进行评分；TTC染色法测定大鼠脑梗死体积和水肿程度；伊文思蓝（EB）染色对血脑屏障的渗漏进行检测，Westernblotting对脑组织中基质金属蛋白酶（MMPs）、核因子-KB（NF-kB）信号通路蛋白表达情况以及炎性因子的释放情况进行检测。结果缺血再灌注损伤后0、24和72h，CompoundC给药组较模型组相比，大鼠的神经功能评分显著降低，差异有统计学意义（P〈O．05）。与模型组相比，CompoundC治疗组大鼠缺血再灌注损伤72h后的脑梗死体积、水肿程度、EB渗漏量显著降低，差异有统计学意义（P〈0．05）。模型组MMP-2、MMP-9的表达（52．58±8．12、33．15±6．45）明显高于CompoundC给药组（21．20±3．39、15．46±4．71），差异有统计学意义（P〈0．05）。与模型组比较，CompoundC给药组NF-kB通路蛋白、炎性因子的表达显著降低，差异具有统计学意义（P〈O．05）。结论抑制AMPK对脑缺血诱导的BBB损伤具有一定的保护作用，可能通过抑制NF-kB通路介导的炎性反应，抑制MMP-2／MMP-9的表达，降低细胞外基质的降解，进而维护BBB完整性，最终改善动物的神经缺血症状，降低脑含水量，减少梗死体积。
- 李锐张黎于炎冰张思迅袁越游嘉房青
- 关键词：腺苷酸活化蛋白激酶脑缺血再灌注血脑屏障基质金属蛋白酶
- 糖基化终末产物上调人胰岛微血管内皮细胞黏附分子的表达和白细胞黏附被引量：1
- 2014年
- 目的 研究糖基化终末产物（AGEs）对人胰岛微血管内皮细胞（HIMVEC）黏附分子表达和白细胞黏附的影响.方法 HIMVEC细胞在200 mg/L的AGEs刺激后,用细胞基础的酶联免疫吸附法（ELISA）和Western blotting法检测细胞表面黏附分子的表达;并与BCECF标记的白细胞共培养检测与白细胞的黏附能力.采用实时荧光定量聚合酶链反应（RT-PCR）和Western blotting分别检测HIMVEC细胞上AGEs受体（RAGE）、蛋白激酶Cβ（PKC β）和蛋白激酶A（PKA）的mRNA表达情况.随后给予PKC β抑制剂LY333531或PKA激活剂8-Br-cAMP,观察对HIMVEC黏附分子表达的影响及和白细胞黏附的影响.两组间比较采用t检验进行分析.结果 与对照组相比,AGEs处理后HIMVEC表达P选择素、E选择素和血管细胞黏附分子1（VCAM-1）均上调（分别为1.10 ±0.13比0.64±0.14,0.83 ±0.06比0.47 ±0.05,0.87 ±0.09比0.43±0.07,t =4.93、9.40、7.61,均P＜0.05）,并且与白细胞的黏附较对照组明显增加（54 ±4比23 ±3,t=12.69,P＜0.05）.与AGEs组比较,RAGE抗体组P选择素、E选择素和VCAM-1的表达明显降低,组间差异具有统计学意义（t=5.69、6.89、5.43,均P＜0.05）.RAGE抗体组白细胞黏附明显少于AGEs组（54±4比31 ±4,t=8.22,P＜0.05）.与对照组相比,AGEs处理HIMVEC 4 h和18h,在mRNA水平和蛋白质水平均检测到RAGE和PKCβ的表达上调,但PKA的表达下调（t=10.94、7.76、21.82、5.85、10.96、11.47,均P＜0.05）.与AGEs组相比,在AGEs处理时给予PKCβ抑制剂LY333531或PKA激活剂8-Br-cAMP,均可降低HIMVEC上P选择素、E选择素和VCAM-1的表达水平（=7.60、6.60、6.25、11.58、4.08、3.47,均P＜0.05）,并减少白细胞的黏附（t=7.67、8.89,均P＜0.05）.结论 AGEs通过RAGE受体上调PKCβ和下调PKA增加HIMVEC上黏附分子的表达,促进白细胞的黏附,可能是糖尿病状态下胰岛中白细胞浸润的机制之一.
- 刘虹麟许世清王在彭亮房青邓婷婷游嘉娄晋宁张文健
- 关键词：糖基化终末产物黏附分子白细胞
- C肽对晚期糖基化终末产物诱导的大鼠肾小球系膜细胞氧化应激的影响被引量：3
- 2015年
- 目的研究C肽对晚期糖基化终末产物（AGEs）诱导的大鼠肾小球系膜细胞氧化应激的影响及其机制。方法将大鼠。肾小球系膜细胞按照下列分组培养：对照组：正常培养基培养；AGEs组：培养基中含有200mg／LAGEs；AGEs＋C肽组：培养基中含有200mg／LAGEs和5μmol／LC肽；AGEs＋C肽＋H89组：预先用含有H89（终浓度10μmol／L）的培养基培养30min后加入AGEs（终浓度200mg／L）和c肽（终浓度5μmol／L）。采用荧光法检测细胞内活性氧的水平，应用格里斯反应检测细胞一氧化氮（NO）的生成水平，采用实时荧光定量聚合酶链反应（RT-PCR）或Western blotting检测晚期糖基化终末产物受体（RAGE）、蛋白激酶A（PKA）、尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶4（NOX4）和诱导型一氧化氮合酶（iNOS）的表达水平。采用非参数检验（Kruskal—WallisH检验）进行组间比较，采用Mann-WhitnevU检验进行两两比较。结果AGEs组系膜细胞生成ROS和NO较对照组增多（分别为193．7±6．4比136．1±4．9和27．2±4．7比15．5±0．7，均U=0，P〈0．05），C肽可以抑制ROS和NO的产生，AGEs＋C肽组的ROS和NO水平与AGEs组差异有统计学意义（分别为136．9±14．3比193．7±6．4；16．0±2．1比27.2±4．7；均U=0，P〈0．05）。与对照组相比，AGEs上调RAGE的表达，下调PKA的表达，并且AGEs可上调NOX4和iNOS的表达（分别为0．565±0．027比0．148±0．006，0．085±0．035比0．518±0．019，0．912±0．055比0．105±0．012，0．279±0．003比0．126±0．004，均U=0，P〈0．05）；C肽处理组较AGEs组RAGE的表达下调，PKA的表达上调，NOX4和iNOS的表达下调（分别为0．159±0．003比0．565±0．027，0．594±0．079比0．085±0．035，0．085±0．005比0．912±0．055，0．071±0．016比0．279±0．003，均U=0，P〈0．05）。与C肽组比较，H89组阻断PKA激活后，ROS和NO生成增多（分别为195．7±9．3比149
- 许世清刘虹麟娄晋宁王在彭亮房青游嘉邓婷婷郭彬张文健
- 关键词：C肽系膜细胞氧化应激蛋白激酶A晚期糖基化终末产物
