王为先
- 作品数：10 被引量：12H指数：2
- 供职机构：中国科学院遗传与发育生物学研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生农业科学更多>>
- 金鱼母体因子β-catenin cDNA的克隆及在胚胎发育中的作用被引量：3
- 2004年
- 核质相互作用一直是动物胚胎发育领域的研究焦点,母体因子对于脊推动物胚胎发育的启动具有决定性作用。在已有的研究中,直接研究母体因子β-catenin基因的时空表达规律与其功能的相关性还较少见,因此,我们对该基因在金鱼胚胎发育全程中的作用进行了时空性的跟踪研究。报道了金鱼β-catenin cDNA全基因序列,并与斑马鱼的β-catenin cDNA序列和氨基酸序列进行了比较,结果表明,两者具有很高的同源性,分别为93％(2227/2384 bp)和98.5％(768/780 aa);系统地研究了β-catenin基因在金鱼胚胎发育全过程中的表达规律;用反义RNA和绿色荧光蛋白基因共注射技术,直接活体考察了β-catenin基因活性对金鱼胚胎发育的影响,结果证明,β-catenin在胚胎中的分布是动态的,主要定位于体轴和背部组织,以及头尾结构。β-catenin活性的丧失,导致胚胎背部结构严重缺损和沿前后轴组织发育受阻,并在幼体形成前死亡,说明该基因是胚胎启动和发育的必要因子之一。
- 张靖溥王为先朱少侠
- 关键词：Β-CATENIN核质相互作用
- 体节图式形成中Hensen’s结的作用
- ＜正＞脊椎动物胚胎发育早期一非常显著的结构就是体节,它在神经管和脊索两侧定时定点形成两串对称的分节结构.为什么体节能如此整齐定时和两侧对称地形成?这一直是科学家探索的问题.过去我们用完整的体节板和分散的体节板进行细胞移植...
- 郑瑞珍朱少侠王为先
- 文献传递
- 携带人衰变加速因子基因转基因小鼠的建立被引量：2
- 2000年
- 目的 通过建立转人衰变加速因子 (DAF)基因小鼠 ,为研究异种器官移植的超急性排斥反应提供有效的研究手段。方法 采用受精卵显微注射技术 ,将人DAF基因导入小白鼠受精卵的原核中。Dot blot及Southern blot杂交确定阳性转基因小鼠。以Northern杂交法检测人DAF基因的表达情况。结果 基因注射后共生出小鼠 2 4只 ,4只为转基因小鼠 ,人DAF基因在其中 1只小鼠体内得到表达。结论 所导入的人DAF基因在小鼠的基因组中实现整合及表达。
- 王剑鹏马腾骧王广有李光三王为先沈玉于建康
- 关键词：衰变加速因子
- 转hDAF基因小鼠的构建
- 2000年
- 本工作构建了含有hDAF基因的转基因小鼠，以便研究hDAF基因能否消除异种器官移植中的排斥反应。采用DNA重组的方法构建hDAF基因的表达载体pSP64HP（Fig.1)。通过受精卵显微注射，将其中的目的的基因片段，转移到小鼠体内，建立转基因小鼠。再通过Dot blotting和Southern blotting杂交方法对出生小鼠的基因组特征进行查证。连续两次对直接裂解菌液做PCR扩增，筛选出重组质粒（Fig.2&3)，酶切图谱（Fig.4)和Southern杂交（Fig.5)分析结果与预期吻合，出现预期条带；小鼠受精卵注射后存活比率为77．9％，受精卵的发育率为3．4％，出生小鼠中，10．5％出现清晰杂交信号。表明：hDAF基因表达载体构建成功；并整合入小鼠基因组中。
- 王剑鹏王为先等
- 关键词：转基因小鼠移植免疫
- 全文增补中
- 鲤鱼、鲫鱼和鲤鲫移核鱼DNA的复性动力学研究与比较被引量：1
- 1990年
- 才文报道鲤鱼、鲫鱼DNA复性动力学研究结果。它们均由快、中、慢速复性3个组份构成。鲤鱼DNA中Cot<1×10(-1)的复性组份占7.5％,1×10(-1)1×10~2的复性组份占75％;鲫鱼DNA中Cot<5×10^(-1)的复性组份占22％;5×10^(-1)1×10~2的复性组份占70％。它们都没有明显百分数的迥折序列组份;快速复性组份的拷贝数低于10~6,相当于中度重复序列1;中、慢速复性组份则分别为中度重复序列Ⅱ和原拷贝序列。在快速复性部份,鲤鱼与鲫鱼之间表现出较大差异。此外,本文还就鲤鱼和鲫鱼的DNA复性动力学与鲤鲫移核鱼(cyc(?))F_3进行了比较。鲤鲫移核鱼DNA的复性动力学特征与其细胞核供体鱼(即鲤鱼)是相似的。这说明异源细胞核与胞质的结合没有导致核内DNA基因组结构出现明显变化。
- 王为先莫鑫泉严绍颐
- 关键词：鲤鱼鲫鱼DNA基因组结构
- 金鱼垂体细胞谱系基因切除研究
- 1997年
- 将大鳞大麻哈鱼的垂体细胞特异性表达的生长激素基因（ＧＨ）的启动子与白喉毒素基因的Ａ链相连，构建成融合基因ＧＨ－ＤＴＡ。通过显微注射导入金鱼（Ｃａｒａｓｉｕｓａｕｒａｔｕｓ）受精卵内，获得的实验鱼经Ｓｏｕｔｈｅｒｎｂｌｏｔ分子杂交检测表明，少数实验鱼染色体ＤＮＡ中含有导入的外源基因。胚胎的原位分子杂交和垂体的组织切片观察发现，转基因鱼和正常鱼之间存在差异。
- 常华沈玉王为先于建康余来宁
- 关键词：转基因鱼金鱼生物技术
- 芽孢杆菌β-淀粉酶基因在大肠杆菌中的克隆与表达被引量：1
- 1993年
- 本工作采用新设计的营养缺陷型淘汰筛选法,从本实验室筛选的芽孢杆菌Bacillus R2中分离到能够水解生淀粉的β-淀粉酶基因。该基因所在的DNA片段为5.25kb,在大肠杆菌(E.coli)中的表达产物具有与供体菌相同的淀粉酶特性,实验室条件下酶产量为500IU/ml以上,RDA值为57%,并且可以全部分泌到培养基中。
- 王为先张沁申同健
- 关键词：Β-淀粉酶基因克隆芽孢杆菌
- 斑马鱼shh启动子指导绿色荧光蛋白基因在脊索中的表达被引量：5
- 2004年
- 体外实验业已证明shh基因的启动子受HNF3β蛋白直接调控。为研究斑马鱼shh启动子在体内的作用模式 ,构建了由 5 38bp斑马鱼shh启动子 (包含两个HNF3β结合位点 )与绿色荧光蛋白EGFP组成的表达载体 ,命名为pShh EGFP。将pShh EGFP注射到斑马鱼 1 细胞期内的受精卵中 ,定期在倒置荧光显微镜下观察GFP的表达。GFP在原肠作用期就开始表达 ,主要发生在中轴下胚层中 ;在体节形成期 ,GFP在脊索细胞中表达 ,但未发现在神经底板细胞中表达。由此可见 ,含两个HNF3β结合区域的 5
- 滕鹏曹莹王为先朱少侠孟安明张靖溥
- 关键词：SHH启动子脊索斑马鱼绿色荧光蛋白
- 体节图式形成中Hensen’s结的作用
- 郑瑞珍朱少侠王为先
- 关键词：胚胎发育
- 文献传递
- 适用于核酸复性动力学分析的微机程序
- 1990年
- 核酸复性动力学分析对于研究真核生物的基因组结构、生物的进化、基因的表达具有重要的意义。该反应结果的分析,国外一般采用Britten的、适于PDP-10型计算机的程序做数据处理。但是,该程序存在如下缺点:首先,该程序只适于PDP-系列的小型计算机,而不能用于目前国内广泛普及的IBM微型计算机;其次。
- 王为先莫鑫泉史瀛仙陈剑
- 关键词：核酸
