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野生型p53基因对人胆囊癌细胞生长及致瘤性的抑制作用被引量：2: 2005年; 目的：研究野生型p53(wtp53)基因对人胆囊癌细胞生长及致瘤性的影响。方法：应用免疫细胞化学染色、PCR产物直接测序方法分析细胞系遗传背景,在脂质体介导下将含有wtp53的真核表达质粒pCMV-p53,导入GBC-SD细胞中。用G418筛选,建立转染克隆细胞系。以PCR,RT-PCR和蛋白印迹证实外源p53基因的整合与表达；以细胞生长曲线和集落形成实验反映细胞增殖状况；以裸鼠移植瘤试验检测体内致瘤性的影响。结果：GBC-SD细胞P53蛋白过表达；直接测序发现第5外显子126位密码子存在TAC→AAC的碱基突变。外源p53基因已整合入转染后的GBC-SD细胞并获稳定表达。表达外源Wtp3的GBC-SD-wtp53细胞生长速率减慢、集落形成能力下降及裸鼠致瘤性受到显著抑制。结论：野生型p53基因可有效抑制人胆囊癌GBC-SD细胞的体内、外生长。; 乌新林王占民杨凤辉李明颖马道新; 关键词：P53基因胆囊肿瘤致瘤性

原发性肝细胞癌HBsAg、Fas和PCNA抗原的表达及其意义被引量：1: 2006年; 目的:通过检测原发性肝细胞癌(HCC)及其癌周肝组织HBsAg、Fas抗原和增殖细胞核抗原(PCNA)的表达,探讨其表达的规律和意义以及HBV感染与HCC的相关关系,HCC发生的机制。方法:对52例肝癌标本及42例癌周肝组织应用免疫组织化学方法检测HBsAg、Fas和PCNA的表达,并结合血清甲胎蛋白(AFP)水平进行分析。结果:癌周肝组织高度表达HBsAg和Fas,阳性率均达78.6%,癌组织表达阳性率分别为21.2%和30.8%,阳性表达仅限于分化良好者,差异有统计学意义(P均<0.005)。癌组织和癌周组织HBsAg和Fas的表达具有相关性。癌组织的PCNA标记指数(54.8±25.9),显著高于癌周组织(11.6±9.7)(P<0.001),其中HBsAg阳性者标记指数又低于HBsAg阴性者(41.4±28.5vs58.4±24.2,P<0.05)。在癌周组织PCNA阳性细胞常常位于肝小叶周边部,体积较小,核圆形或卵圆形。结论:由于高分化癌具有低水平表达HBsAg的能力,推测HBsAg在癌组织中的表达消失或低表达应归因于癌细胞的低分化状态。癌周组织持续发生肝细胞的凋亡,但在癌组织尤其是低分化癌组织中则减弱或消失,可能归因于癌细胞不能表达病毒抗原。卵圆形细胞的异常增殖可能是肝癌发生的前提条件。; 姜润德宗宁李占元王占民; 关键词：增殖细胞核抗原

Fas、Fas配体和IFN-γ在胃癌中的表达被引量：11: 2003年; 目的 :研究Fas、Fas配体 (FasL)和干扰素 γ(IFN γ)在胃癌中的表达规律及可能的意义。方法 :在石蜡包埋的 5 8例胃癌组织和其中相对应的 5 3例癌旁正常组织中 ,采用免疫组化方法检测Fas、FasL蛋白的表达 ,采用原位杂交方法检测IFN γmRNA的表达。结果 :胃癌组织中胃癌细胞和癌旁组织中胃上皮细胞Fas阳性率分别为19 .0 %和 6 4 .2 % ,胃癌组阳性率明显低于癌旁组 (χ2 =2 3.4 6 ;P =0 .0 0 )。胃癌组织中胃癌细胞和癌旁组织中胃上皮细胞FasL阳性率分别为 6 3.8%和 4 5 .3% ,胃癌组阳性率明显高于癌旁组 (χ2 =3.83;P =0 .0 5 )。癌旁组织中胃上皮细胞IFN γ阳性率为 4 9.1% ,而胃癌组织中未发现一例阳性。结论 :胃癌细胞Fas -FasL系统平衡失调 ,本研究中胃癌细胞不表达IFN γ ,可能与胃上皮细胞癌变及免疫逃逸有关。; 李昭辉王占民赵志伦张勇柯杨; 关键词：FAS FAS 配体 IFN-Γ 胃癌

肝癌患者外周血中白蛋白mRNA检测的意义: 2003年; 目的:探讨肝癌患者外周血中白蛋白mRNA在血行播散中的意义。方法:抽取30例肝癌患者外周静脉血5ml,应用RT-PCR技术对血中白蛋白mRNA进行扩增检测。结果:敏感性实验中,健康人血中存在102以上个肝癌细胞时可测出。30例HCC患者中,白蛋白mRNA的阳性率为60%(18/30);白蛋白mRNA的检出率与肝癌的TNM分期、肿瘤大小、有无门脉癌栓及有无肝外转移有显著的相关性(P<0.05),而与血清AFP值无关(P>0.75)。结论:白蛋白mRNA是反映原发性肝癌患者血中是否存在肝癌细胞的灵敏指标。; 孙国瑞王占民吴小鹏董孝媛; 关键词：肝肿瘤白蛋白MRNA 聚合酶链反应

自展不锈钢支架在肝门部胆管癌治疗中的应用被引量：1: 1997年; 肝门部胆管癌早期诊断困难，手术切除率低，多采用外引流的方法，存在引流不畅。逆行感染，生活不便等缺点。作者自行选材制成“Ｚ”形不锈钢自展支架，对４例无法手术切除的肝门部胆管癌病人行胆道支架放置术，术后短期随访效果良好。文章对胆道支架的种类、放置途径及优缺点、手术操作注意事项、技巧、并发症等问题进行了讨论。认为自制的不锈钢自展支架支架价格便宜，效果满意，是可供选择的方法之一；但由于本组病例少，尚需进一步积累经验。; 孙学英张鹏李克王占民李彩霞; 关键词：肝门部胆管肿瘤胆道支架

人胆囊癌裸鼠原位移植瘤模型的建立及初步观察被引量：7: 2004年; 胆囊癌恶性程度较高,临床预后较差.为了寻找一种能更接近人体内胆囊癌特性的动物模型,我们通过瘤组织块原位接种建立了裸小鼠的胆囊癌原位移植瘤模型,现报告如下.; 常新忠王占民李志伟孙建芝马道新赵志伦刘博; 关键词：胆囊癌原位移植瘤裸鼠恶性程度瘤组织裸小鼠

逆转录病毒载体介导TK/GCV与CD/5FC双自杀基因治疗肝细胞肝癌的研究被引量：2: 2003年; 目的　探讨TK与CD双自杀基因对肝癌细胞的杀伤作用及旁观者效应 ,并在前药用量、杀伤效力及旁观者效应强弱等方面 ,与单自杀基因比较。方法　将TK与CD双自杀基因导入肝细胞肝癌细胞系HCC 990 3,用不同浓度更昔洛韦 (GCV)及 5氟胞嘧啶 (5FC)、不同混育比例及不同混育时间分别作用于细胞 ,观察在这些条件下的杀伤效应及旁观者效应。结果　GCV与 5FC的有效浓度范围分别是大于 10 -2 μg/ml及大于 2mmol/L ,混育 96h杀伤作用明显高于 2 4h。HCC 990 3/TK +CD细胞占 5 %以上 ,即可观察到旁观者效应。结论　以脂质体介导成功将双自杀基因TK与CD感染肝细胞肝癌细胞系HCC 990 3,双自杀基因具有强大杀伤作用 ,较单自杀基因更为明显 ,其前药用量减少 ,降低了药物的毒副作用 ,旁观者效应更为强大。其杀伤作用与前药浓度、混育比例及混育时间呈正相关。; 刘军王占民李东华吴小鹏刘春生马道新赵志伦刘博; 关键词：逆转录病毒载体介导 TK/GCV 双自杀基因肝细胞肝癌

甲状腺肿瘤DNA倍体检测及其临床价值被引量：1: 2001年; 采用细针穿刺涂片的方法取材 ,用 DNA图像细胞仪对 73例甲状腺肿瘤和结节性甲状腺肿患者进行检测分析。结果显示 ,甲状腺恶性肿瘤细胞与良性肿瘤细胞 DNA倍体类型有非常显著性差异。甲状腺肿瘤细针穿刺涂片 DNA定量分析可为判断肿瘤的生物学特性提供重要信息。; 李东华王占民张丽华; 关键词：甲状腺肿瘤脱氧核糖核酸异倍体预后 DNA

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王占民