王大江
- 作品数：10 被引量：35H指数：4
- 供职机构：石河子大学农学院更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金教育部“新世纪优秀人才支持计划”更多>>
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- 新疆主栽杏品种自交不亲和SFB基因的检测被引量：9
- 2011年
- 为系统鉴定新疆主栽杏品种自交不亲和SFB基因型,以新疆25个主栽杏品种为试材,利用蔷薇科保守序列设计引物对叶片基因组DNA进行SFB基因特异PCR扩增,筛选出有效的扩增引物;对成功扩增的杏品种的特异条带克隆测序,在GenBank上进行BLASTN比对,确定各品种的SFB基因型。结果显示:引物组合Ⅱ-1、Ⅳ-2,1-Ⅰ、1-Ⅱ对新疆杏品种的扩增效果最好,成功地在18个品种上扩增出了5种大小不同的条带,14种不同的基因型,其中两个基因(SFB-36,SFB-42)与GenBank上已经登录的SFB-13(the Accession No.EF062342)为同一基因,其余12个为新基因,暂命名为:SFB-30、SFB-31、SFB-32、SFB-33、SFB-34、SFB-35、SFB-37、SFB-38、SFB-39、SFB-40、SFB-41和SFB-43。对扩增出的SFB氨基酸序列进行比较,发现3个保守区和两个高变区;将试验所得基因与李属果树62个SFB基因构建系统进化树,显示李属果树SFB基因的种内相似性并不高于种间相似性。
- 刘月霞冯建荣王大江樊新民姜新
- 关键词：自交不亲和
- 新疆杏品种自交不亲和SFB基因的检测
- 通过筛选有效鉴定新疆地区主栽杏品种SFB基因的引物,系统鉴定新疆地区主栽杏品种SFB基因型,为从SFB基因序列上探讨杏自交不亲和机理、研究栽培杏的起源演化提供重要的理论依据,同时为科学合理地配置杏授粉品种,提高杏产量提供...
- 刘月霞冯建荣王大江樊新民姜新
- 关键词：自交不亲和
- 文献传递
- 2D-DIGE技术研究自交不亲和杏品种‘新世纪’花柱表达蛋白被引量：4
- 2011年
- 【目的】从蛋白质组水平探索杏树自交不亲和的分子遗传机制。【方法】采用双向差异凝胶电泳和质谱检测技术,对自交不亲和杏品种‘新世纪’在小蕾期、大蕾期、自花授粉后24 h及异花授粉(‘新世纪’ב巴旦水杏’)后24 h的花柱进行差异性蛋白质组学研究。【结果】在‘新世纪’杏的小蕾期、大蕾期、自花授粉后24 h、异花授粉24 h后的花柱中共检测到约1 500个蛋白点,其中有66个差异表达的蛋白点。自交不亲和杏柱头对自体与异体花粉感应在蛋白质组水平有差异,其中异花授粉后花柱中特异表达的蛋白点1个,异花授粉后表达丰度明显升高的蛋白点4个,表达丰度明显降低的蛋白点29个;质谱分析只有13个蛋白质点得到归属鉴定。【结论】明确‘新世纪’杏花花柱对自体与异体花粉感应在蛋白质组水平上有差异。
- 曹晓艳冯建荣王大江白茹刘月霞
- 关键词：自交不亲和花柱蛋白质组
- 自交亲和/不亲和杏花柱发育过程中差异表达蛋白分析
- 从蛋白质组水平探索杏树自交(不)亲和的分子遗传机制,找出可能与杏自交不亲和表达相关的蛋白,为探索杏花柱与花粉亲和与不亲和相互作用的机制提供捷径,并为更完整地揭示果树自交不亲和性的本质提供参考。
- 曹晓艳冯建荣王大江孙军利刘怀锋
- 关键词：蛋白质组
- 文献传递
- 新疆杏品种自交不亲和S-RNase基因PCR扩增体系的优化
- 2010年
- 以3个新疆杏品种的叶片为试材,以其叶片基因组DNA为模板,分别对PCR扩增体系中的10×Buffer(含Mg2+)、dNTP、上下游引物、TaqDNA聚合酶和退火温度5个因素设计6个梯度,研究了新疆杏品种自交不亲和S-RNase基因PCR扩增条件,建立其优化的PCR扩增体系。研究结果表明:其扩增程序为94℃预变性5min,94℃变性45s,52℃退火45s,72℃延伸2min,35个循环后72℃延伸10min,25μL反应体系10×Buffer(含Mg2+)2.5μL,dNTP0.08mmol/L,上下引物0.16μmol/L,DNA80ng,DNA聚合酶1μL,此为最优的反应体系。
- 姜新冯建荣姜俊卿王大江刘月霞
- 关键词：自交不亲和S-RNASE基因
- 南疆杏品种自交不亲和S-RNase基因型的鉴定被引量：10
- 2012年
- 【目的】为鉴定新疆主栽杏品种自交不亲和S-RNase基因型,【方法】以新疆27个主栽杏品种的叶片为试材,利用蔷薇科通用引物组合:EM-PC2consFD+EM-PC3consRD、PaConsⅡ-F+PaConsⅡ-R和PruC2+PruC5对其基因组DNA进行了特异等位PCR扩增,将克隆测序结果在GenBank上进行同源性比对。【结果】结果表明,27个新疆杏品种成功扩增出54个基因片段,其核苷酸序列共包括19个不同的S-RNase基因,其中4个为GenBank上登陆的已知杏属S-RNase基因,分别定名为S24(588 bp)、S14(708 bp)、S23(972 bp)、S21(971bp),15个为新的S-RNase基因,暂时分别命名为S40(572 bp,登陆号:HQ342870、S41(401 bp,登陆号:HQ342871)、S42(357 bp,登陆号:HQ342872)、S43(493bp,登陆号:HQ342873)、S44(657 bp,登陆号:HQ342874)、S45(1 294 bp,登陆号:HQ342875)、S46(830 bp,登陆号:HQ342876)、S47(575 bp,登陆号:HQ342877)、S48(594 bp)(登陆号:HQ342878)、S49(653 bp,登陆号:HQ342879)、S50(659 bp,登陆号:HQ342880)、S51(768 bp,登陆号:HQ342881)、S52(1 520 bp,登陆号:HQ342882)、‘赛买提’S65(594 bp,登陆号:JQ327151)、‘小白杏’S66(709 bp,登陆号:JQ327152)。鉴定的27个新疆杏品种的S-RNase基因型分别为:S23S14(‘晚熟胡安娜’、‘何谢克’、‘贝新纳尔’);S52S14(‘乔尔胖’、‘馒头玉吕克’);S14S47(‘克孜阿恰’、‘元旦杏’、‘辣椒杏’);S23S4(‘莎车黑叶杏’、‘库车托咏’、‘安江胡安娜’);S52S23(‘索格佳娜丽’);S52S51(‘冬杏’);S52S50(‘苏陆克’);S52S40(‘卡巴克胡安娜’);S43S41(‘贾格达玛依桑’、‘洪得克’、‘脆佳娜丽’、‘拉胡安娜’、‘克孜佳娜丽’);S45S42(‘毛拉肖’);S45S46(‘托乎提’);S45S44(‘赛来玉吕克’);S49S24(‘库尔勒托咏’、‘黄肉油杏’);S21S65(‘赛买提’);S52S66(‘小白杏’)。【结论】研究鉴定出27个新疆杏品种自交不亲和雌蕊的S基因型,为杏品种商业化栽培配置适宜授粉树提供了理论依据。
- 姜新曹晓艳王大江冯建荣刘月霞樊新民
- 关键词：自交不亲和S-RNASE基因
- 杏花粉总RNA的提取被引量：2
- 2011年
- 【目的】获得一个快速、简洁的提取杏花粉RNA方法。【方法】以新疆杏品种托乎提的花粉为试材,通过3种提取方法和2种材料处理,提取花粉总RNA,并利用电泳和核酸蛋白仪检测其纯度和浓度。【结果】改良的方法M提取花粉得到的RNA产率高,电泳条带整齐、清晰,测得A260/A280在1.8~2.0,反转录后的cDNA可扩增出清晰的特异条带。【结论】该方法既快速简洁,又可获得高质量的RNA,同时也满足花粉中特异表达基因的克隆和鉴定的需要。
- 王大江冯建荣姜新刘月霞姜俊卿
- 新疆杏品种SFB基因的克隆及实时定量表达被引量：10
- 2012年
- 以新疆杏27个品种花粉为材料,进行转录水平SFB基因的克隆与测序;选取冬杏、苏陆克、库尔勒托拥3个杏品种,对其进行花粉离体培养,分析SFB基因在不同时期的表达特性。结果表明,在27个品种中扩增出4种大小不同的条带,引物组合1在26个品种中扩增出条带,其中品种贝新纳尔,赛买提的片段大小为447 bp;大优佳的片段大小为446 bp,其余品种的大小为434 bp。引物组合2在品种托乎提中扩增出大小为660 bp大小的条带。序列比对显示27个品种的SFB基因为20种基因序列,与其他物种SFB基因序列比对显示20种基因序列均为新SFB基因序列,在GenBank上的登录号为:HQ148064-HQ148083;SFB基因在3个杏品种花粉离体培养不同培养时期均有表达,其表达丰度的变化趋势一致,呈先增后减的趋势,均在培养24 h时表达丰度最高,但是每个品种的表达峰值不同。
- 王大江冯建荣刘月霞姜新曹晓艳赵宝龙
- 关键词：自交不亲和实时定量PCR
- 新疆杏品种自交不亲和S-RNase基因特异PCR扩增引物的筛选被引量：1
- 2010年
- 【目的】筛选鉴定新疆杏自交不亲和相关S-RNase基因的有效引物。【方法】以新疆30个杏品种为试材,选用已报道的蔷薇科李属通用的5对引物组合进行S-RNase基因特异PCR扩增,并依据扩增系数和扩增成功率两个指标对扩增效果进行评价。【结果】(1)5对引物组合对30个杏品种均扩出了条带,除了洛浦2号只扩出1条带之外,其余的29个品种都扩增出了两条带;(2)5对引物组合对新疆主栽杏的扩增效果差异较大,其中EM-PC2consFD+EM-PC3consRD的扩增成功率和扩增系数均为最高(86.67%,95.00%),扩增出两条带的品种有25个;其次,引物组合PaConsⅡ-F+PaConsⅡ-R的扩增成功率达66.67%,扩增系数达83.33%,扩出两条带的品种有20个。【结论】5对引物中EM-PC2consFD+EM-PC3consRD对新疆杏品种S-RNase基因的鉴定效果最好。
- 姜新冯建荣姜俊卿王大江刘月霞
- 关键词：自交不亲和引物筛选
- 2个中亚杏品种自交不亲和SFB基因的克隆及序列分析被引量：12
- 2013年
- 【目的】为了获得杏中亚生态品种群中自交不亲和花粉特异表达的SFB基因全长,探讨SFB基因序列多态性,【方法】以中亚生态品种群‘馒头玉吕克’和‘索格佳娜丽’2个杏品种为材料,利用RT-PCR及RACE技术和DNAMAN软件分析,克隆得到了2个新的SFB基因的全长cDNA,SFB33(HQ148064)和SFB50(HQ148074)。【结果】SFB33全长1 378 bp,SFB50全长1 313 bp,两个基因开放阅读框均为1 131 bp,编码376个氨基酸;与GenBank上已登录的SFB基因核苷酸序列进行Blast比对,SFB33基因与SFB-c(FJ362527)同源性为79%;SFB50基因与SFB23(EU652886)同源性为99%。在两个基因上均找到F-box区域和两个变异区及两个高变区。李亚科SFB氨基酸序列同源性比对显示SFB50与李亚科其他SFB基因亲缘关系较近,而SFB33与李亚科其他SFB基因亲缘关系较远。【结论】杏中亚生态品种群中SFB基因显示明显的序列多态性。
- 刘月霞冯建荣王大江曹晓艳张虎平
- 关键词：自交不亲和
