王延亮
- 作品数：7 被引量：28H指数：4
- 供职机构：军事医学科学院放射与辐射医学研究所更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生化学工程生物学更多>>
- Epo A、B的制备及微生物转化研究
- 天然产物埃博霉素(epothilone)是由粘细菌(Myxobacteria)纤维堆囊菌(Sorangium cellulosum)产生的次级代谢产物,是一类16元大环内酯类的细胞毒性化合物。该类化合物与目前临床应用的抗...
- 王延亮
- 关键词：埃博霉素分离纯化微生物转化
- 文献传递
- 高效液相色谱法分析微生物代谢物埃博霉素B的含量被引量：4
- 2008年
- 目的建立检测黏细菌纤维堆囊菌发酵液中代谢物埃博霉素B（EpoB）含量的方法。方法用高效液相色谱法测定EpoB的含量，色谱柱为C18柱，流动相为甲醇-水（60：40），流速为1．0mL／min，进样量为3pL，检测波长为247nm。结果平均回收率为99．55％，RSD为1．94％（n=9），精密度试验表明，日内RSD为0．94％（n=5），日间RSD为1．98％（n=5），EpoB在0.625～10mg／mL浓度范围内呈线性关系。最低检测限为1．25μg／mL。结论此法可以用于检测代谢产物的含量，具有良好的准确度和精密度。
- 王延亮卢育新丁小军王赫张庆林
- 关键词：粘细菌高效液相色谱
- 重组质粒pUDK-HGF的中试纯化工艺被引量：1
- 2011年
- pUDK-HGF是携带人肝细胞生长因子的裸质粒,目前已进入I期临床试验,因此需要大量符合药学规格的质粒DNA。文中建立了pUDK-HGF中试规模纯化制备的新工艺。流程包括:发酵、离心收获菌体、碱裂解、超滤浓缩碱裂解液、Sephacryl S-1000层析除去RNA并更换缓冲液、plasmidselect捕获超螺旋质粒DNA、琼脂糖凝胶6BFF除盐。新工艺可获得浓度为2.0 mg/mL、纯度在1.70以上的裸质粒原液,符合相关质量标准,并避免使用动物源性的酶及有毒试剂。
- 胡春生王延亮卢育新程晓晨刘琳张通张庆林
- 关键词：重组质粒纯化肝细胞生长因子
- 培养基组成对纤维堆壤菌产埃博霉素的影响被引量：6
- 2008年
- 埃博霉素(Epothilone)是粘细菌纤维堆壤菌(Sorangium cellulosum)产生的具有抗肿瘤活性的次级代谢产物。为了提高埃博霉素A和B的产量,以及B/A的比率,以G52培养基为基础培养基,研究了黄豆粉、酵母粉、酪蛋白胨和丙酸钠对纤维堆壤菌产埃博霉素的影响。结果表明:低脂黄豆粉和酪蛋白胨作为氮源,同时加入6.25 mmol/L丙酸钠作为前体物质,埃博霉素A和B的产量分别比原始条件平均提高1.47倍和2.88倍,B/A的比率比原始条件平均提高了1.97倍。
- 韩莉莉卢育新王赫王延亮丁小军刘丽华张庆林
- 关键词：埃博霉素氮源前体物质
- epothilone类构效关系及生物合成、转化的研究进展被引量：7
- 2007年
- epothilone类化合物大多数具有明显的抗肿瘤作用,并且在来源、合成方法、亲水性、抗肿瘤活性和抗肿瘤谱等方面均优于紫杉醇类药物,是一类新型抗肿瘤药物。近年来,对大量epothilone及其类似物进行了生物活性测定及药效学试验,并借助计算机分析,进行三维定量构效关系研究。在大规模发酵条件下,主要得到epothiloneA和B以及C,D,E等少量成分,其中epothiloneB和D被普遍认为是目前比较有效的抑瘤剂。这些化合物之间存在着某些生物转化关系,有可能会产生新的活性物质。本文主要叙述了该类化合物的构效关系、生物合成及相关转化的研究进展。
- 王延亮张庆林
- 关键词：生物转化EPOTHILONE
- 固相萃取-液相色谱法检测发酵液中埃博霉素被引量：4
- 2009年
- 目的建立固相萃取-液相色谱法检测纤维堆囊菌发酵液中代谢物埃博霉素含量。方法将树脂装填在固相萃取空柱管上,依次以2倍体积水和5倍体积50%甲醇溶液对树脂进行预处理,然后以15倍体积80%甲醇溶液浸泡10 min后,低流速提取,收集洗脱液旋转干燥,用高效液相色谱(HPLC)检测。结果在发酵终点(144 h),埃博霉素A(EpoA)和埃博霉素B(EpoB)的含量分别为1.84和2.64 mg/L。结论该法稳定性良好,可以用于检测代谢产物的含量。
- 韩莉莉卢育新王赫王延亮丁小军刘丽华张庆林
- 关键词：埃博霉素固相萃取
- 埃博霉素异源表达研究进展被引量：5
- 2009年
- 埃博霉素是继紫杉醇之后新一代的微管蛋白抑制剂,被认为是目前最有希望的抗癌药物之一。但是,目前发酵产量较低,化学合成步骤多,不能实现工业化生产。相比较而言,埃博霉素的异源表达有很多优点,比如异源宿主代时较短,易于基因工程操作等。在异源宿主中产生埃博霉素已经成为目前研究的一个热点。本文综述了近年来埃博霉素在天蓝色链霉菌(S.coelicolor),大肠杆菌(E.coli)和橙黄色黏球菌(M.xanthus)等宿主中表达的研究进展以及面临的机遇和挑战。
- 刘少斌王延亮张庆林吴祖泽
- 关键词：生物合成黏细菌
