王报贵
- 作品数：14 被引量：47H指数：5
- 供职机构：南昌大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家科技支撑计划江西省主要学科学术和技术带头人培养计划更多>>
- 相关领域：轻工技术与工程生物学医药卫生化学工程更多>>
- 豆豉中主要分离细菌对小鼠生化指标及肠道菌群的影响被引量：6
- 2014年
- 采用豆豉样品进行细菌分离培养和细菌16S rDNA基因PCR扩增、测序分析,并将分离所得细菌进行小鼠灌胃实验。结果显示,豆豉中的主要分离细菌为枯草芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌、类肠膜魏斯氏菌、乳酸片球菌、戊糖片球菌、发酵乳杆菌、表皮葡萄球菌。并且,各菌对小鼠丙氨酸转氨酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、总胆红素(TBIL)、直接胆红素(DBIL)、肌酐(CREA)、尿素氮(BUN)、尿酸(UA)、血糖(GLU)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)各项生化指标基本无影响。然而,其中解淀粉芽孢杆菌DC02能极显著性地降低小鼠血糖(GLU)水平,该菌有望成为治疗糖尿病的潜在菌株。活菌计数结果表明,除表皮葡萄菌以外,豆豉中分离所得其它细菌均能改善肠道菌群结构。可见,豆豉中分离所得主要细菌对正常机体安全、无致病性。
- 董素琴武晓丽王报贵李胜杰王玉莲徐锋
- 关键词：豆豉细菌生化指标肠道菌群
- 副溶血弧菌胶体金检测试纸条的改进被引量：9
- 2014年
- 研制一种快速、灵敏、简便的胶体金免疫试纸条,用于改进副溶血弧菌的检测。通过胶体金与特异性针对于副溶血弧菌的单抗偶联,同时在NC膜上包被兔多抗、驴抗鼠的IgG分别作为检测线和质控线,制备免疫层系试纸条,测定试纸条的灵敏性与特异性。结果表明,当加入由胶体金标记的羊抗鼠二抗,能将显色强度提高5倍,明显有利于肉眼的观察。在纯培养物中试纸条的灵敏度为106CFU/mL,且与3株不同的副溶血弧菌均有阳性反应,与26株常见的菌均无交叉反应。同时在添加阪崎肠杆菌、志贺氏菌的鱼肉样本中,检测限为107CFU/mL。改良的副溶血弧菌胶体金免疫层系试纸条的建立,有助于加强食品中该菌的检测,提供了一种快速、灵敏、简便的方法。
- 王报贵王广峰武晓丽董素琴明星魏华徐锋
- 关键词：副溶血弧菌单克隆抗体多克隆抗体胶体金
- 抗肠炎沙门氏菌单链抗体制备及其特异性分析被引量：2
- 2013年
- 目的:利用基因工程技术制备抗肠炎沙门氏菌的单链抗体。方法:从抗肠炎沙门氏菌单克隆抗体的杂交瘤细胞中纯化RNA,反转录后扩增出抗体的重链可变区(VH)和轻链可变区(VL)基因片段,采用重叠延伸的方法,用柔性多肽Linker接头(Gly4Ser)3按VL-Linker-VH方式将VH基因和VL基因拼接成单链抗体基因片段后,连接到pGEX-4T-1载体上,进行重组转化。挑取阳性克隆,经IPTG诱导后,通过GST柱进行亲和层析,最后利用ELISA检测抗体的活性。结果:成功构建了表达抗肠炎沙门氏菌单链抗体的基因工程菌株,经SDS-PAGE和ELISA检测结果表明,诱导表达的单链抗体scFv分子量约为60 kDa,其能特异与肠炎沙门氏菌结合,但与副甲伤寒沙门氏菌、鸭沙门氏菌、鼠伤寒沙门氏菌有轻度交叉反应。结论:成功构建了抗肠炎沙门氏菌单链抗体的表达菌株,表达的单链抗体scFv可作为沙门氏菌的检测的候选抗体分子。
- 王报贵武晓丽董素琴甘敏陈星星陈飞明星徐锋
- 关键词：沙门氏菌单链抗体重链可变区轻链可变区
- 樟树籽仁蛋白的组成及功能性质研究被引量：7
- 2016年
- 采用以石油醚低温脱脂的樟树籽仁为原料,按照Osborne蛋白分级提取方法对樟树籽仁蛋白进行精细的分类,分别得到了樟树籽仁清蛋白、球蛋白、醇溶蛋白和谷蛋白四种组分,分别占总蛋白的25.64%、23.51%、2.32%和30.14%。在此基础上,研究了各蛋白组分的功能性质,包括溶解性、吸水性、吸油性、乳化性和乳化稳定性以及起泡性和起泡稳定性。结果表明,樟树籽仁清蛋白的溶解性、吸水性、乳化性及乳化稳定性和起泡性及其稳定性较好,分别为59.15%、2.5 g/g、72.92%、80%和123%。樟树籽仁球蛋白的吸油性最好,为4.19 g/g。
- 李露敏代红发王报贵陈绪军肖彦骏曾哲灵
- 关键词：蛋白功能性质
- 利用双标记PCR产物的量子点检测副溶血性弧菌被引量：4
- 2015年
- 副溶血弧菌是一种能引起食源性疾病的重要病原菌,为了对该细菌进行检测,研制一种快速、灵敏、简便的量子点免疫层析试纸条。通过磁珠富集DNA后用双标记的特异性引物（上游引物5’用地高辛标记,下游引物5’用生物素标记）扩增不耐热溶血毒素基因（TLH）,进行量子点免疫试纸条的检测。结果表明,荧光定量PCR检测磁珠（Si-MNPs）的捕获率在浓度102~106 CFU/m L均在50%以上,浓度为102 CFU/m L时达到最高捕获率（64%）。在纯培养物及模拟检测中试纸条的检测限均为4×100 CFU/m L,但在模拟检测中T线的显色强度弱于纯培养物的检测,说明鱼肉糜样本的复杂成分对检测灵敏度有一定的影响,但添加高浓度杂菌（阪崎肠杆菌、志贺氏菌）不影响该方法的特异性。方法具有特异性强、灵敏度高,并且操作简便、检测成本低的特点,2 h即可完成,为副溶血弧菌的快速检测提供了有效手段。
- 许海波魏华张勇王报贵
- 关键词：副溶血弧菌量子点
- 副溶血弧菌的磁珠捕获及检测被引量：6
- 2013年
- 建立结合免疫磁珠和PCR快速检测副溶血性弧菌的新方法。本研究选用副溶血弧菌作为抗原免疫日本大耳兔制备了多克隆抗体,用ELISA法检测抗体效价。利用辛酸硫酸铵沉淀结合逆向吸附对多抗血清进行纯化,经SDS-PAGE和斑点杂交检测验证纯化后抗体的特异性。将纯化后的抗体偶联于羧基化修饰的纳米磁珠表面,用来进行菌体的捕获。结果表明,抗体的效价达到106,纯化获得只与副溶血弧菌发生反应的高纯度抗体。制备的免疫磁珠捕获率在55%～70%之间,且稳定性较好,盐离子浓度(3.5%NaCl、4.5%NaCl)对捕获率的影响不大,在pH5～9之间,磁珠捕获差异也较小。在对纯培养物的检测实验中,本方法最低检测限为102cfu/mL;而在鱼肉糜样本中的检测限为103cfu/mL,且样品中高浓度杂菌的存在不影响检测灵敏度。免疫磁珠结合PCR用于副溶血性弧菌的检测具有很高的灵敏度和特异性,具有广阔的前景。
- 王报贵武晓丽董素琴陈飞陈星星甘敏明星徐锋
- 关键词：副溶血弧菌多克隆抗体免疫磁珠PCR
- 樟树籽仁蛋白的物理性质及安全性的研究被引量：2
- 2016年
- 开发樟树籽仁蛋白作为一种新型植物蛋白资源。以石油醚低温脱脂的樟树籽仁为原料,采用Osborne法对樟树籽仁蛋白进行分级,得到清蛋白、球蛋白、醇溶蛋白和谷蛋白4种组分。为了较全面系统地了解樟树籽蛋白进行理化性质及动物毒性的测定。结果表明,樟树清蛋白、球蛋白、醇溶蛋白和谷蛋白分别占总蛋白的25.64%,23.51%,2.32%和18.39%;等电点分别为3.1,3.5,3.3和4.5;变性温度分别为45.35℃,46.15℃,43.53℃和52.56℃;清蛋白、球蛋白和谷蛋白的必需氨基酸含量丰富,醇溶蛋白含量较低;清蛋白和谷蛋白表面较规则,球蛋白和醇溶蛋白表面发亮;清蛋白、球蛋白和谷蛋白的二级结构主要为β-折叠,醇溶蛋白主要为无规卷曲。MTT和ELISA测定结果表明,在推荐膳食浓度(1.2 g/kg)下不会对BALB/c小鼠肝细胞和脾细胞引起凋亡及免疫炎症的反应,说明在动物水平上樟树籽仁蛋白是安全无毒的。试验对樟树籽仁分离蛋白的研究,为樟树籽仁蛋白质资源的开发利用奠定基础,也为其他植物蛋白质的研究提供理论依据。
- 许海波代红发李露敏肖彦骏王报贵
- 关键词：功能性质
- 双歧杆菌原生质体的制备和转化方法
- 本发明属于微生物领域，提供了一种双歧杆菌原生质体的制备与转化方法，将长双杆菌接种到MRS琼脂培养基厌氧培养，转种于MRS液体培养基中培养后以2.5-3.5%的接种量转接于新鲜MRS液体培养基中，36-38℃，厌氧培养18...
- 万翠香魏华夏慧玲章昭琳熊勇华许恒毅徐锋赖卫华王报贵
- 文献传递
- 副溶血弧菌的磁珠捕获及检测
- 建立结合免疫磁珠和PCR 快速检测副溶血性弧菌的新方法.本研究选用副溶血弧菌作为抗原免疫日本大耳兔制备了多克隆抗体,用ELISA 法检测抗体效价.利用辛酸硫酸铵沉淀结合逆向吸附对多抗血清进行纯化,经SDS-PAGE 和斑...
- 王报贵武晓丽董素琴陈飞陈星星甘敏明星徐锋
- 关键词：副溶血弧菌多克隆抗体免疫磁珠PCR
- 双歧杆菌原生质体的制备和转化方法
- 本发明属于微生物领域，提供了一种双歧杆菌原生质体的制备与转化方法，将长双杆菌接种到MRS琼脂培养基厌氧培养，转种于MRS液体培养基中培养后以2.5-3.5%的接种量转接于新鲜MRS液体培养基中，36-38℃，厌氧培养18...
- 万翠香魏华夏慧玲章昭琳熊勇华许恒毅徐锋赖卫华王报贵
- 文献传递
