王改平
- 作品数:20 被引量:33H指数:2
- 供职机构:河南师范大学生命科学学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划河南省科技攻关计划更多>>
- 相关领域:生物学医药卫生文化科学更多>>
- BRAF和TP53基因热点突变的构建被引量:1
- 2014年
- 目的:构建BRAF和TP53基因多个位点的点突变质粒,为进一步研究其在肿瘤形成中的作用奠定基础。方法:以HEK-293T基因组DNA为模板构建含BRAF600、TP53175和TP53248位点的野生型质粒,利用MutanBESTTM定点突变方法获得含BRAFV600E、TP53R175C和TP53R248W等突变位点的突变型质粒,并进行DNA测序鉴定。结果:DNA测序结果显示构建的三个点突变与实验设计完全一致。结论:成功构建了BRAFV600E、TP53R175C和TP53R248W三个具有不同突变位点的突变型质粒,MutanBESTTM定点突变技术是一种简单、快速、高效的基因定点突变方法。
- 张环宇王改平李晓芳姚谨陈倩倩樊路娟
- 关键词:定点突变BRAFTP53反向PCR
- 肝脏炎症反应与肝再生关系的研究进展被引量:13
- 2015年
- 肝脏作为最大的消化腺,一方面容易受到各种各样由代谢物、毒性物质、微生物等引起的损伤,导致肝细胞死亡并诱导炎性细胞的募集,诱发炎症反应。另一方面,肝脏具有强大的再生能力。肝切除手术或毒物造成肝损伤后,残肝细胞能迅速由静止状态进入细胞周期,通过DNA合成和有丝分裂补偿丢失的肝组织,恢复肝脏功能。在多种肝脏炎性疾病,如暴发性肝炎和肝硬化中,肝再生是肝组织的急、慢性炎症反应引起细胞损伤后的结果。
- 王改平李晓芳陈莎莎靳伟徐存拴
- 关键词:肝再生肝脏炎症肝细胞凋亡肝切除手术炎性疾病细胞损伤
- 骨桥蛋白对细胞生存的多重作用被引量:2
- 2016年
- 骨桥蛋白(osteopontin,OPN)作为一种分泌性蛋白质广泛存在于多种组织细胞中,不仅调控肿瘤细胞的转移、侵袭和增殖,也在炎症反应、血管再生等生理过程中发挥作用。OPN通过与受体结合直接或间接地激活细胞内信号途径,介导细胞与细胞、细胞与细胞外基质之间的相互作用,从而参与调控细胞的生存。大量实验证实,OPN能够促进细胞的增殖,抑制细胞凋亡,尤其是对于肿瘤细胞。但在有些细胞中,OPN对细胞命运的影响却恰恰相反。本文综述了OPN在不同条件下对细胞存活、活化和增殖,细胞自噬和细胞凋亡的多重作用及其作用途径,为进一步研究OPN对不同细胞作用的受体及其信号网络机制提供重要理论基础。
- 王改平赵聪聪徐存拴
- 关键词:骨桥蛋白细胞存活细胞活化细胞增殖细胞自噬
- 大鼠肝再生中肝细胞基因表达与DNA裸露的相关性研究
- 2013年
- 为了解大鼠肝再生中肝细胞的基因表达与DNA裸露的相关性,分离大鼠肝细胞,提取裸露DNA,用SOLEXA方法对DNA测序,用BWA软件拼装测序片段,用IPA软件分析拼装的基因种类和作用,用Rat Genome230 2.0芯片检测基因的转录情况.研究表明,大鼠肝再生的12h(PH后12h),肝细胞的裸露DNA涉及16 912个基因,1 701个基因发生了有意义裸露量变化.其中,25个基因的裸露量上调,1 676个基因的裸露量下调.与Rat Genome 230 2.0芯片的检测的基因转录比对表明,肝细胞的AKR7A3,BMYC,CDC25B等26个基因的裸露量和表达量均下调,表明大鼠肝再生12h时,这些基因的表达可能受染色体结构调控.
- 张亚磊秦丹王改平徐存拴
- 关键词:大鼠肝细胞大鼠肝再生基因转录
- 大鼠急性肝衰竭肝脏的基因表达分析
- 2012年
- 目的从基因转录水平了解急性肝衰竭(AHF)发生的基因组学基础。方法 36只SD成年大鼠分为模型组和对照组,模型组采用CCl4(4ml/kg)一次性灌胃法建立大鼠AHF模型,于建模3、6、12、24、48和72h时采集血清,检测谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)、总蛋白(TP)、总胆红素(TBIL)等生化指标,并固定肝脏组织制作成石蜡切片,进行HE染色分析。用大鼠Genome 230 2.0芯片检测上述时间点肝脏细胞的基因表达谱,用系统生物学方法分析基因表达谱预示的生理活动。结果发现1 022个基因与大鼠AHF发生相关。其中,建模3、6、12、24、48、72h时有意义表达的基因数分别为131、302、350、539、349、177,有意义表达上调、下调和上下调的基因总数分别为634、382和6。用生物信息学和系统生物学等方法分析肝脏细胞基因表达谱与AHF发生的相关性,结果表明,AHF发生共涉及23种生理活动变化。其中,基因转录、糖类、脂类等代谢、内环境稳定、细胞增殖、生长、建成、迁移等8种生理活动增强。信号转导、核酸、有机酸、毒物等代谢、氧化还原、细胞黏附等6种生理活动减弱。炎症反应、细胞分化、发育等生理活动在AHF发生前期增强,后期减弱。结论 AHF发生与多种基因表达变化和多种生理活动改变密切相关。
- 郝云鹏王撒王改平张文学徐存拴
- 关键词:急性肝衰竭基因表达谱HE染色
- 去肝交感神经对部分肝切除大鼠肝细胞增殖的影响
- 2013年
- 目的:探讨去肝交感神经对肝部分切除大鼠肝细胞增殖的影响.方法:将84只♂SD大鼠随机分为对照组和实验组,每组42只.对照组大鼠行部分肝切除,实验组大鼠去肝交感神经后进行部分肝切除.两组大鼠分别在手术后12、24、36、48、72、120和168h(每个时间点6只大鼠)处死取材,测量各时间点肝/体质量比;用银染法显示肝细胞核仁组织区相关嗜银蛋白(argyrophilic nucleolar organizer region-associated proteins,AgNORs);用免疫组织化学法检测肝细胞增殖细胞核抗原(proliferation cell nuclear antigen,PCNA)的表达.结果:实验组大鼠的肝/体质量比在术后48、168h(分别为0.0311±0.0011和0.0500±0.0056)显著高于对照组(分别为0.0267±0.0008和0.0412±0.0061)(P<0.05),其余各时间点两组间无明显差异;实验组肝细胞AgNORs颗粒平均数在术后36、48、120h(分别为1.82±0.10、2.01±0.14和2.08±0.12)显著低于对照组(分别为2.79±0.08、2.57±0.26和2.46±0.07)(P<0.05);从术后24-168h实验组肝细胞PCNA的表达显著低于对照组(P<0.05).结论:去肝交感神经对肝切除后肝细胞的增殖可能有抑制作用.
- 张新胜赵丹丹王改平徐存拴
- 关键词:肝再生去交感神经部分肝切除
- 哺乳动物雷帕霉素靶蛋白信号通路相关基因对大鼠再生肝8种细胞生长过程的调节作用被引量:1
- 2012年
- 目的从基因转录水平了解哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路对大鼠再生肝8种细胞的生长调节作用。方法在本实验室建立大鼠2/3肝切除模型,分离和鉴定再生肝8种细胞,采用大鼠Genome230 2.0芯片检测、数据处理及实时荧光定量PCR等方法,构建mTOR的信号通路网络,分析mTOR信号通路的相关基因在以上8种细胞中的表达谱,用系统生物学方法分析基因表达谱预示的细胞生长活动。结果 mTOR信号通路涉及110个基因和25条途径,99个基因含于大鼠Genome 230 2.0芯片,82个基因与大鼠肝再生相关。其中,在启动阶段,mTOR信号通路主要参与激活、促进肝细胞、陷窝细胞、库普弗细胞、树突状细胞、肝星形细胞和窦内皮细胞的生长过程;在进展阶段,mTOR信号通路明显地促进肝细胞、胆管上皮细胞、卵圆细胞、肝星形细胞、库普弗细胞、陷窝细胞和树突状细胞的生长过程;在终止阶段,mTOR信号通路的大多数途径对肝细胞、库普弗细胞和树突状细胞的生长过程的促进作用减弱,而途径25却对肝细胞、窦内皮细胞、肝星形细胞和陷窝细胞的生长过程有明显的抑制作用。结论 mTOR信号通路的25条途径和82个基因参与大鼠再生肝8种细胞的生长调控。
- 段丽娟王改平杨献光李德明徐存拴
- 关键词:肝再生MTOR信号通路GENOME
- PI3K等5条信号通路对NIH3T3细胞周期进程的调节作用研究
- 2015年
- 为从基因转录水平解析信号通路对NIH3T3细胞周期进程的调控作用,用小鼠基因表达谱芯片Mouse Genome 4 302.0检测信号通路相关基因表达丰度发现,PI3K,STAT3,钙蛋白酶,Rho家族鸟苷酸激酶和VEGF等5条信号通路的105个基因在该细胞的细胞周期中发生有意义的表达变化.分析基因表达变化预示的信号通路作用表明,上述5条信号通路依次促进G1期、G1/S转换期、S期、G2/M转换期和M期进程.结论:上述5条信号通路促进NIH3T3细胞的细胞周期进程.
- 王一雯王改平耿小芳秦丹张继红和婷婷徐存拴
- 关键词:NIH3T3细胞信号通路基因转录细胞周期
- 大鼠再生肝8种细胞的丝氨酸族氨基酸代谢相关基因的转录谱被引量:2
- 2010年
- 为了解大鼠肝再生中8种肝脏细胞的丝氨酸族氨基酸代谢相关基因转录谱,文章用Percoll密度梯度离心结合免疫磁珠分选分离大鼠的8种再生肝细胞,用Rat Genome 230 2.0芯片等检测它们中丝氨酸族氨基酸代谢相关基因的表达变化,用Cluster和Treeview等软件分析上述基因在肝再生中表达模式,用生物信息学和系统生物学等方法分析上述细胞中丝氨酸族氨基酸代谢活动。结果表明,在27个发生有意义表达变化的基因中,肝细胞、胆管上皮细胞、卵圆细胞、肝星形细胞、窦内皮细胞、库普弗细胞、陷窝细胞、树突状细胞的基因数分别为13、16、11、14、13、11、12、14,相应细胞的上调、下调和上/下调的基因数分别为7、6和0,2、10和4,2、8和1,8、3和3,6、5和2,4、6和1,2、10和0,6、6和2。总的来看,肝再生中各细胞的表达下调基因占优势,但在肝再生启动阶段,肝星形细胞和窦内皮细胞的表达上调基因占优势。上述丝氨酸族氨基酸代谢相关基因转录谱预示丝氨酸族氨基酸的合成主要在肝再生启动阶段的肝细胞、肝星形细胞、窦内皮细胞和库普弗细胞中增强,它们的降解主要在肝再生进展阶段的肝细胞、胆管上皮细胞、陷窝细胞和树突状细胞中进行。
- 常翠芳王改平朱秋实王磊张富春马纪徐存拴
- 关键词:肝再生丝氨酸半胱氨酸
- 分流培养模式下改善分子生物学教学效果的思考被引量:10
- 2013年
- 分子生物学是高等师范院校生命科学类专业开设的主干课程之一,为使分子生物学教学更适合分流培养模式的要求,总结了几年来从事分子生物学教学的体会,分析了影响分子生物学教学效果的原因,提出针对分流培养模式下改善教学效果的措施,集中在优化教学内容体系、建立多样化教学方法、采取多样化考核方式等几个方面,最终为促进学生就业和学生全面发展。
- 王改平夏晓华梁卫红常翠芳
- 关键词:分子生物学分流培养模式教学效果