王晓佳
- 作品数：5 被引量：24H指数：3
- 供职机构：南方医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 基于病种成本的病种定价模型研究
- 长期以来，我国医疗机构一直采取按医疗服务项目付费的方式。随着国情的不断变化，我国社会经济发展已由计划经济转变为市场经济，按项目付费方式与控制医药费用增长不相适应，与规范医院和医生的医疗行为不相协调。且按项目付费更是目前所...
- 王晓佳
- 大剂量甲基强的松龙对大鼠急性损伤脊髓Nogo-A表达量影响的研究被引量：8
- 2006年
- 目的:研究大剂量甲基强的松龙对急性脊髓损伤大鼠脊髓Nogo-A蛋白表达量的影响。方法:采用allen’s打击方法,将大鼠分为正常组、急性脊髓损伤组(对照组)和急性脊髓损伤+大剂量MP组,损伤大鼠T8-T10节段,分别于术后3、7、14d取受损节段大鼠脊髓,运用Western-blot方法测定各时相点Nogo-A表达量及其变化,并以HE染色和免疫组化染色对受损脊髓进行形态学观察。结果:Nogo-A蛋白在各组大鼠脊髓组织中均呈阳性表达,损伤后对照组与MP组各个时相点Nogo-A表达均显著高于正常组(P<0.05),7d时最高,后逐渐下降,但14d的表达量仍高于正常组。其中大剂量MP组与对照组在各个时间点的表达量具有显著差异(P<0.05),MP组在各个时间点的表达量显著低于对照组。结论:Nogo-A是SCI后脊髓神经纤维再生的主要抑制因子,大剂量MP对Nogo-A的表达具有明显的抑制作用。
- 王宏闫慧博廖华邱小忠鲁凯伍江建明余磊赖桂华王晓佳
- 关键词：脊髓损伤NOGO-ASD大鼠
- 大鼠嗅鞘细胞体外培养及免疫组化研究被引量：8
- 2006年
- 目的:建立体外纯化培养嗅鞘细胞(olfactoryensheathingcells,OECs)的稳定方法并观察培养嗅鞘细胞(OECs)形态学特征。方法:原代培养成年雄性SD大鼠嗅球的嗅神经层和颗粒层中提取的OECs,利用差速贴壁和阿糖胞苷(Ara-c)抑制法除去混杂的成纤维细胞和星形胶质细胞以获得纯化的OECs。用P75抗体免疫组织化学染色鉴定OECs,计算纯化度。结果:此方法获得的OECs纯度可达93%以上。OECs的外形主要以突起细长的双极和三极为主,或无突起呈“煎蛋样”,随时间延长细胞生长排列呈现一定方向性。结论:此方法稳定易复制,可获得高纯度的OECs。
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- 关键词：嗅鞘细胞细胞培养纯化免疫组化
- 胶质细胞源性神经营养因子慢病毒载体体外转染嗅鞘细胞MOI值的研究被引量：2
- 2010年
- 目的 探讨胶质细胞源性神经营养因子（GDNF）慢病毒载体（lentivirus vector）体外转染嗅鞘细胞（OECs）并能稳定表达目的 蛋白的最佳感染复数（MOI）.方法 构建GDNF-lentivirus,体外转染293T细胞,获得高滴度的慢病毒浓缩液,测定病毒滴度达2×108 TU/ml.不同MOI的情况下,GDNF-lentivirus体外转染OECs,Western blot检测GDNF的表达.结果 相差显微镜明视野下动态观察转染后的OECs生长状态良好,荧光显微镜下见大量绿色荧光蛋白（GFP）标记的转染成功的OECs.MOI=100时,OECs的转染率最高,约为75%,MOI=50时约为68%,MOI=10和MOI=1时分别为25%和13%,阴性对照组未见有绿色荧光表达.转染后第5天,收集OECs进行Western blot检测,MOI=100和MOI=50时GDNF表达最强,两者差异无统计学意义（P＞0.05）,MOI=10表达较少,而MOI=1表达最少,对照组无GDNF表达.结论 GDNF-lentivirus在体外既能高效转染OECs又不影响细胞活性,且转染后的OECs可以长期稳定表达GDNF的适宜MOI为50～100之间.
- 闫慧博鲁凯伍张忠民王晓佳金大地
- 关键词：GDNF慢病毒载体嗅鞘细胞
- GDNF基因修饰的嗅鞘细胞移植联合IN-1注射修复大鼠急性脊髓损伤被引量：4
- 2009年
- 目的研究胶质细胞源性神经营养因子（GDNF）基因修饰的嗅鞘细胞（OECs）移植联合轴突生长抑制蛋白抗体（IN-1）局部持续注射对大鼠急性横断性脊髓损伤（SCI）的修复作用。方法构建载有GDNF基因的慢病毒（Lentivirus）载体并体外转染OECs，WesternBlot检测GDNF的表达。用50只成年雌性SD大鼠建立胸脊髓全横断损伤模型，随机分为A（对照组）、B（IN-1微泵注射组）、c（OECs组）、D（GDNF-OECs组）和E（GDNF-OECs＋IN-1组）5组各10只。应用神经丝蛋白200（NF200）单抗免疫组化、生物素化的葡聚糖胺（BDA），顺行神经追踪对SCI区神经纤维再生进行形态学观察。采用BBB评分评估大鼠后肢功能恢复情况。结果术后共有13只大鼠死亡。术后8周可观察到Hoechst标记的OECs在体内存活并在脊髓内迁移；E组和D组可见SCI区杂乱无序的再生轴突，有连续性神经纤维通过损伤区；C组可见少量无序的再生轴突，可疑连续性神经纤维通过损伤区；B组和A组脊髓残端萎缩，未见轴突再生。A、B、C、D和E组后肢功能运动平均BBB评分分别为7．70±0．24、7．89±0．15、10．50±0．25、11．43±0．23和12．81±0．40。结论GDNF-OECs移植联合IN-1抗体注射可有效促进损伤脊髓神经轴突的存活、再生，促进损伤脊髓的修复。
- 闫慧博张忠民金大地王晓佳鲁凯伍
- 关键词：细胞移植胶质细胞源性神经营养因子脊髓损伤
