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王裕: 作品数：14 被引量：43H指数：5; 供职机构：山西医科大学实验动物中心更多>>; 发文基金：山西省回国留学人员科研经费资助项目国家自然科学基金山西省软科学研究计划更多>>; 相关领域：医药卫生生物学哲学宗教更多>>

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氟对大鼠肝组织caspase-3和caspase-9mRNA表达的影响被引量：1: 2014年; 目的研究氟中毒大鼠肝组织中caspase-3、caspase-9 mRNA表达的变化。方法将48只健康清洁级SD雄性大鼠随机分为4组,分别为对照(去离子水)组和低(50 mg/L)、中(100 mg/L)、高剂量(200 mg/L)氟染毒组,每组12只。采用自由饮水方式进行染毒,连续染毒120 d。采用荧光定量PCR法检测肝组织中caspase-3、caspase-9 mRNA的表达水平。结果与对照组相比,高剂量氟染毒组caspase-3、caspase-9 mRNA的表达水平明显升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论过量氟从基因水平促进大鼠肝脏组织中caspase-9、caspase-3的表达。; 宋国华刘茂林高继萍王裕; 关键词：氟荧光定量PCR CASPASE-3 CASPASE-9

氟对大鼠肾小管上皮细胞的毒性作用及硒干预机制的研究: 目的：　　本课题主要以大鼠肾小管上皮细胞为研究对象，采用单氟、单硒及硒氟联合培养细胞，旨在探讨硒对氟诱导大鼠肾小管上皮细胞的拮抗作用和相关机制的研究。　　方法：　　肾小管上皮细胞经不同浓度氟、硒和硒氟联合染毒培养48和7...; 王裕; 关键词：肾小管上皮细胞毒性作用

相对定量2^(-△△CT)法分析Caspase-3和Caspase-9在氟诱导大鼠肾脏中的表达被引量：7: 2014年; 目的检测caspase-3和caspase-9基因在氟诱导大鼠肾脏组织中的表达。方法 48只雄性SD大鼠分为4组(对照组、低氟组、中氟组和高氟组),每组12只,分别加入不同浓度的氟化钠染毒(0、50、100和200 mg/L)。120 d后,处死大鼠,提取各组大鼠肾组织总RNA,实时荧光定量PCR法检测各染氟组caspase-3、caspase-9基因的表达,选择β-actin作为内参基因,使用相对定量2-△△CT法分析。结果对照组和3个染氟组(低、中和高氟组)caspase-3基因表达量分别是1.01±0.01、1.41±0.68、2.31±0.95和2.69±0.49,其中中氟组和高氟组表达显著增高(P<0.05)。caspase-9的基因表达量分别是1.01±0.01、1.30±0.26、2.63±0.56和3.97±0.60,中氟组和高氟组表达显著增高(P<0.01)。结论氟诱导大鼠肾脏后caspase-3和caspase-9基因表达增高,为氟中毒发病机制的研究提供一定的理论依据。; 宋国华高继萍王春芳刘茂林王裕; 关键词：氟中毒 CASPASE-3 CASPASE-9 荧光定量PCR 肾脏

中国地鼠线粒体DNA 16S rRNA基因序列分析及分子系统发育研究被引量：2: 2013年; 目的通过克隆分析中国地鼠16S基因的部分序列,对中国地鼠16S基因的结构和功能进行初步探索和揭示。方法从GenBank中已报道的啮齿动物16S基因保守区设计一对引物,进行PCR扩增,测序。用Blastn与GenBank中七种啮齿类动物的16S基因进行序列比较,分析其碱基组成及变异情况,并用邻接法(NJ)、非加权组平均法(UPGMA)构建分子系统树,在分子水平上探讨中国地鼠和其他啮齿类动物的进化关系,对中国地鼠的种属地位进行了进一步验证。结果获得了中国地鼠线粒体16S基因的部分序列,其碱基组成A、T、C、G分别为40.5%、24.5%、18.7%、16.3%,与其他七种啮齿类动物的碱基含量相比,各碱基含量基本相似。NJ进化树表明,中国地鼠、金黄地鼠与欧洲仓鼠先聚为一支,小鼠与大鼠先聚为一支,东方田鼠、台湾田鼠与东欧田鼠先聚为一支。结论中国地鼠和金黄地鼠的亲缘关系最近,与传统的分类地位基本吻合。; 宋国华高继萍王裕王春芳刘田福; 关键词：中国地鼠线粒体DNA

氟对大鼠肝组织细胞凋亡与DNA损伤的影响被引量：7: 2013年; 目的研究大鼠染氟后肝组织细胞凋亡及DNA损伤情况。方法 SD大鼠随机分为对照组、低氟组、中氟组、高氟组,每组12只,分别饮用含氟化钠为0、50、100、200 mg/L的去离子水,均饲标准营养大鼠饲料,染氟120 d。肉眼观察牙齿的变化,采用氟离子选择电极法测定大鼠尿氟,HE染色观察组织病理学变化,彗星实验检测细胞DNA损伤,流式细胞术检测肝脏组织细胞凋亡率。结果低氟组、中氟组、高氟组大鼠尿氟分别为(23.52±2.91)、(30.16±4.78)、(61.23±3.98)mg/L,均显著高于对照组(0.07±0.02)mg/L,差异有统计学意义(P<0.01)。不同剂量染氟大鼠肝组织细胞呈现不同程度肿胀,肝组织内出现多种灶状病变。各染氟组大鼠肝细胞拖尾率及拖尾长度与相应的对照组相比,差异均有统计学意义,并且肝细胞拖尾率及拖尾长度随染氟剂量的加大而增大。不同剂量染氟组细胞凋亡率与对照组相比,均明显增高,而且高、中氟组肝细胞凋亡率显著高于低氟组(P<0.01)。结论氟化物可导致大鼠肝细胞DNA损伤,诱导细胞凋亡,一定浓度的氟化物诱导大鼠肝细胞凋亡与DNA损伤之间存在着相关性。; 刘茂林宋国华高继萍樊林花王裕; 关键词：氟细胞凋亡 DNA损伤

氟化钠诱导大鼠肾脏细胞DNA损伤及细胞凋亡的实验研究被引量：2: 2013年; 目的研究氟对大鼠肾脏细胞DNA损伤和细胞凋亡的影响。方法 48只SD大鼠随机分为4组(对照组、低氟组、中氟组和高氟组),每组12只,分别饮用含氟化钠为0、50、100和200 mg/L的去离子水,染毒120 d。动物处死后,用单细胞凝胶电泳技术(SCGE)检测氟化物对大鼠肾细胞DNA损伤,流式细胞术(FCM)检测细胞凋亡。结果彗星实验表明,各染氟组肾细胞拖尾率明显高于对照组(P<0.01)。染氟组大鼠肾细胞DNA迁移长度均高于对照组,高氟组与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.01),中氟组与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。流式细胞术结果表明低氟组肾细胞凋亡率较对照组显著增高(P<0.05),中氟组、高氟组较对照组显著增高(P<0.01)。大鼠肾细胞DNA损伤与细胞凋亡之间存在明显的正相关关系(r=0.959,P<0.01)。结论氟可导致大鼠肾细胞DNA损伤,诱导肾细胞凋亡,氟诱导的大鼠肾细胞凋亡可能与氟所导致的DNA损伤有关。; 宋国华高继萍刘茂林王裕杨霞; 关键词：氟 DNA损伤细胞凋亡

小鼠肾小管上皮细胞的培养和鉴定被引量：2: 2014年; 目的建立小鼠肾小管上皮细胞培养方法,为有关肾损伤体外研究提供实验平台。方法分别采用肾小管节段贴块法、胰蛋白酶和胶原酶Ⅰ法消化分离肾小管节段,用含10%血清的培养基培养,然后用含EDTA的0.25%胰蛋白酶消化,对原代和传一代肾小管上皮细胞进行鉴定。结果三种培养方法培养细胞3 d基本贴壁,胶原酶Ⅰ法3-4 d长满瓶底,肾小管节段贴块法4-5 d长满瓶底,胰蛋白酶7 d左右。细胞均鹅卵石铺路样生长,经细胞免疫组织化学染色鉴定cytokeratin 18呈阳性。结论肾小管节段贴块法和胶原酶Ⅰ消化都可以得到较理想的肾小管上皮细胞,后者细胞生长较快,为研究肾损伤的发生原因和机制提供实验基础。; 王裕杨霞高继萍皇甫冰宋国华; 关键词：肾小管上皮细胞原代培养 CK18 小鼠

氟诱导大鼠肾脏细胞凋亡与Caspase蛋白表达关系的研究被引量：7: 2014年; 目的探究死亡受体途径、线粒体途径与氟诱导肾脏细胞凋亡的关系。方法48只SD大鼠随机分为4组:对照组、低氟组、中氟组和高氟组,每组12只,分别饮用含氟化钠浓度为0、50、100和200 mg/L的去离子水,染毒120天,观察氟斑牙形成情况,称体重,测尿氟含量。制备肾脏细胞悬液,流式细胞术(FCM)检测肾脏细胞凋亡。免疫组化检测肾脏组织中Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9及细胞色素C(Cyt C)蛋白表达。结果与对照组比较,低氟组、中氟组、高氟组肾脏细胞凋亡率显著增高(P<0.05)。与对照组比较,中氟组、高氟组Caspase-8、Cyt C、Caspase-9、Caspase-3阳性表达的平均光密度值明显增高(P<0.05)。结论死亡受体途径、线粒体途径可能同时参与了氟诱导大鼠肾脏细胞凋亡的过程。; 高继萍宋国华刘茂林王裕杨霞; 关键词：氟中毒肾脏细胞 CASPASES

硒对氟诱导NRK-52E细胞凋亡干预作用机制被引量：1: 2017年; 目的探讨硒对氟诱导NRK-52E细胞凋亡的拮抗作用。方法实验设对照组、染氟组、染硒组、硒干预组,培养NRK-52E细胞,染毒72 h,采用流式细胞仪检测细胞凋亡,Western blot检测AMPK及线粒体通路相关蛋白表达水平。结果与对照组[(5.97±0.09)%]比较,5、20 mg/L Na F组细胞凋亡率[分别为(7.92±0.24)%、(11.06±0.17)%]明显升高(P<0.05);与20 mg/L Na F组比较,17.1、34.2μg/L硒干预组细胞凋亡率[分别为(8.46±0.09)%、(9.88±0.08)%]明显降低(P<0.05);与对照组比较,20 mg/L Na F组细胞AMPK磷酸化蛋白、bax、Cyt-C蛋白表达[分别为(0.73±0.16)、(0.99±0.16)、(0.73±0.08)]、活性caspase-9和caspase-3蛋白表达[分别为(1.17±0.17)、(1.51±0.42)]均升高(P<0.05);与20 mg/L Na F组比较,17.1、34.2 g/L硒干预组AM PK磷酸化蛋白表达量[分别为(0.46±0.12)、(0.48±0.15)]、bax、Cyt-C蛋白表达量[分别为(0.55±0.09)、(0.61±0.16)与(0.30±0.06)、(0.34±0.05)]及活性caspase-9、caspase-3蛋白表达量[分别为(0.76±0.11)、(0.40±0.12)与(0.35±0.12)、(0.27±0.04)]均降低(P<0.05)。结论 AMPK介导的线粒体通路参与了硒拮抗氟诱导NRK-52E细胞凋亡过程。; 高继萍王裕杨霞皇甫冰陈朝阳郭民宋国华; 关键词：硒氟中毒细胞凋亡 AMPK 线粒体通路

氟对大鼠肾脏组织中caspase-3和caspase-9蛋白表达影响被引量：5: 2014年; 目的探讨氟对大鼠肾脏组织细胞凋亡过程中caspase-3和caspase-9蛋白表达的影响。方法 48只SD大鼠分为对照组和低、中、高染氟组(氟化钠50、100、200 mg/L),每组12只,120 d后测尿氟含量,处死大鼠,称体重及肾脏脏器重量,计算肾脏脏器系数,肾病理切片观察及caspase-3和caspase-9免疫组化测定。结果与对照组比较,高氟组大鼠体重降低(P<0.01),中氟组肾脏脏器系数降低(P<0.05),各染氟组大鼠尿氟含量均升高(P<0.01),且尿氟含量与染氟浓度呈剂量-效应关系(r=0.925,P<0.01);染氟组肾小球体型变大,肾小管排列结构紊乱、疏松,肾小球内皮细胞和肾小管上皮细胞发生变形、坏死、空泡、萎缩;与对照组比较,中、高剂量染氟组大鼠肾脏caspase-3、caspase-9蛋白表达量[(0.37±0.05)、(0.40±0.02)和(0.41±0.07)、(0.46±0.06)]均明显增高(P<0.01)。结论氟中毒诱导大鼠肾脏组织中caspase-3和caspase-9蛋白表达增强,促进肾脏细胞凋亡。; 高继萍宋国华王裕刘茂林郭民杨霞; 关键词：氟化钠 CASPASE-3 CASPASE-9 肾脏

王裕

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