陈华云
- 作品数：8 被引量：53H指数：2
- 供职机构：中山大学附属第一医院更多>>
- 发文基金：中国博士后科学基金国家自然科学基金广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 血管内皮生长因子C促进HeLa宫颈癌细胞粘着斑激酶活性的研究
- 2009年
- 目的探讨粘着斑激酶(focal adhesion kinase,FAK)介导血管内皮细胞生长因子C(vascularendothelial growth factor C,VEGF-C)促宫颈癌恶性进展的作用。方法提取不同病理分期的宫颈癌组织标本蛋白,采用Western-blot检测VEGF-C及FAK蛋白的表达情况。在体外培养宫颈癌细胞株HeLa细胞,采用Western-blot测定VEGF-C对FAK蛋白的表达和磷酸化的调控作用。结果随着宫颈癌恶性程度的增高,VEGF-C、FAK蛋白及磷酸化FAK蛋白表达水平均随之增加。与正常宫颈组织比较,宫颈原位癌(CIN)组织中VEGF-C、FAK、磷酸化FAK蛋白表达分别增加了(48±10)%、(78±14)%、(83±15)%,P<0.05;宫颈鳞癌Ⅰ期各蛋白增高幅度分别为(104±22)%、(121±28)%、(143±30)%(P<0.01);宫颈鳞癌Ⅱ期(未放疗、化疔)各蛋白表达增高更为显著,其幅度分别为(195±28)%、(186±22)%、(204±31)%,P<0.001。在培养的宫颈癌细胞株HeLa细胞上,VEGF-C(100μg/L)处理24 h后,可显著增高FAK蛋白、磷酸化FAK蛋白的表达,该作用可被VEGF-C单克隆抗体明显抑制。结论 VEGF-C、FAK蛋白表达与宫颈癌恶性程度密切相关,VEGF-C可能通过上调FAK表达及其磷酸化水平而促进宫颈癌的恶性进展。
- 王书刚程杨陈华云
- 关键词：宫颈癌血管内皮生长因子C粘着斑激酶
- 胃癌细胞株中NPRA基因启动子区CpG岛的甲基化分析被引量：1
- 2012年
- 目的NPRA-cGMP信号通路系统可激活cGMP依赖的蛋白激酶,活化的蛋白激酶调控离子转运蛋白和转录因子的表达,从而最终影响细胞生长、凋亡、增殖和炎症反应。本研究旨在研究NPRA基因在胃癌细胞中的甲基化状态及其对下游mRNA表达的影响。方法应用亚硫酸氢钠处理基因组DNA后PCR并测序,我们分析了6株胃癌细胞株NPRA基因的甲基化状态及去甲基化试剂对下游mRNA表达的影响。结果在胃癌细胞中发现NPRA基因启动子区存在甲基化畸变并导致下游mRNA表达减少或沉默。去甲基化试剂可逆转mRNA表达沉默。结论胃癌细胞中存在NPRA基因甲基化畸变。
- 陈华云杨东杰张常华宋武彭建军何裕隆
- 关键词：胃癌甲基化表观遗传学胃癌细胞株NPRA
- 半乳糖凝集素3在宫颈癌转移中的作用
- 2013年
- 目的检测宫颈癌样本中半乳糖凝集素3(Gal-3)的表达水平,研究其在宫颈癌转移中的作用。方法选取2009年6月1日至2010年6月1日于广州市第一人民医院妇产科诊治的宫颈癌患者为研究对象。癌组织活体取材,结合病理切片及临床诊断,将患者分为正常宫颈组织组(n=8),原位癌(CINⅢ)组(n=12),鳞癌I期组(n=10),鳞癌Ⅱ期组(n=9)。所取标本分别为正常对照宫颈组织和不同临床分期的宫颈癌组织标本。免疫印迹法检测Gal-3蛋白的表达情况。体外培养宫颈癌细胞株HeLa及SiHa细胞,转染siRNA(50nmol/L)抑制Gal-3表达后,采用MTT法、Transwell侵袭小室法观察其对宫颈癌细胞株增殖和侵袭的影响。结果随着宫颈癌临床分期升高,Gal-3蛋白表达水平随之增加,与正常宫颈组织组比较,CIN、鳞癌I期(S(I))、鳞癌Ⅱ期(S(Ⅱ))组Gal-3蛋白分别增加了(35.2±8.4)%、(97.6±18.2)%和(179.4±20.7)%,差异均有统计学意义(P<0.05)。在培养的宫颈癌HeLa、SiHa细胞株上,与转染对照siRNA比较,转染Gal-3siRNA48h后可明显抑制Gal-3蛋白表达,抑制率分别为(81.6±4.7)%、(87.5±6.8)%。转染特异性siRNA48h后,以普通培养液(含10%胎牛血清)继续培养细胞24h,与对照组(转染非特异性siRNA组)比较,HeLa及SiHa细胞增殖率分别降低(42.4±6.4)%、(50.6±7.2)%,差异均有统计学意义(P<0.01),侵袭细胞数目分别降低(48.6±5.8)%、(52.4±8.3)%,差异均有统计学意义(P<0.01)。结论 Gal-3蛋白表达与宫颈癌临床分期密切相关,Gal-3可能通过促宫颈癌增殖和侵袭能力,促进宫颈癌的恶性进展。
- 程杨张玉洁陈华云顾正田
- 关键词：宫颈癌半乳糖凝集素3增殖
- 胃癌患者预后与ALX4基因、增生性息肉蛋白基因和胰岛素样生长因子结合蛋白3基因高甲基化的关系
- 2014年
- 目的 观察ALX4基因、增生性息肉蛋白基因（HPP1）和胰岛素样生长因子结合蛋白3基因（IGFBP3）同时出现甲基化对胃癌预后的影响.方法 应用Methylight聚合酶链反应（PCR）分析200例胃癌患者ALX4、HPP1和IGFBP3的甲基化状态.结果 多因素分析显示,3个基因联合检测同时出现甲基化表型可作为独立预后因素[24.158（7.248 -31.611）,P＜0.01]；与患者淋巴结转移（P＜0.01）和TNM分期相关（P＜0.01）.结论 ALX4、HPP1和IGFBP3同时出现高甲基化表型与临床病理学特征相关,与患者预后较差有关.
- 王少川陈华云宋武陈泽锋陈剑辉何裕隆
- 关键词：胃癌甲基化预后
- 高迁移率族蛋白-1在缺氧诱导肝癌细胞侵袭中的作用
- 2012年
- 目的探讨高迁移率族蛋白-1(HMGB1)在缺氧诱导的肝癌细胞侵袭中的作用。方法在培养的Hepa1-6肝癌细胞系上,western blot法观察缺氧不同时间后对HMGB1蛋白表达的影响,细胞侵袭小室实验法观察缺氧对细胞侵袭的影响。以抗HMGB1抗体(a-HMGB1)预处理细胞后,观察缺氧对细胞侵袭效应的改变。结果与常氧组比较,缺氧3、6、12、24 h后均可呈时间依赖性促进HMGB1蛋白的表达。缺氧24 h后,Hepa1-6细胞的侵袭能力明显增强。以a-HMGB1中和HMGB1的作用后,细胞的侵袭能力显著降低。结论缺氧可通过诱导HMGB1分子表达而促进肝癌细胞的侵袭能力。
- 王健陈华云
- 关键词：肝癌细胞高迁移率族蛋白-1缺氧
- 快速康复外科促进结直肠癌患者术后康复及胰岛素敏感性恢复的前瞻性随机对照研究被引量：47
- 2012年
- 目的在改善患者临床结局的前提下，探讨快速康复外科对结直肠癌限期手术患者术后胰岛素敏感性的影响。方法2008年5-12月在中山大学附属第一医院就诊的70例拟接受开放限期手术的结直肠癌患者随机分为快速康复组和传统治疗组，每组35例，分别接受快速康复治疗及传统治疗，评价2组患者的临床指标、应激指标及胰岛素敏感性。结果共62例患者完成试验，其中快速康复组32例，传统治疗组30例。相对于传统治疗组，快速康复组患者术后胰岛素敏感性恢复快（术后第7天97％±9％，t=2．552，P=0．016），术后住院时间短（中位住院天数6d，Z=4．360，P=0．000），肠道功能恢复快（中位首次排气时间2d，Z=3．976，P=0．000），感染性并发症发生率低（2／32，P=0．040）。结论快速康复外科加速了结直肠癌限期手术患者术后胰岛素敏感性及术后肠道功能的恢复，降低了术后感染性并发症的发生率，缩短了术后住院时间。
- 杨东杰何伟玲张晟陈华云黄文起蔡世荣陈创奇马晋平张常华何裕隆詹文华
- 关键词：结直肠癌康复胰岛素抗药性随机对照试验
- 半乳糖凝集素3在血管内皮生长因子C促宫颈癌转移中的作用被引量：3
- 2013年
- 【目的】研究半乳糖凝集素3(Gal-3)在血管内皮生长因子C(VEGF-C)促宫颈癌转移中的作用。【方法】体外培养宫颈癌细胞株SiHa细胞,免疫印迹法检测不同浓度的Gal-3作用于细胞不同时间,对VEGF-C受体(VEGFR3)磷酸化的影响;以VEGF-C处理SiHa细胞10 min,免疫共沉淀法观察Gal-3与VEGFR3的蛋白交联变化;转染Gal-3 siRNA抑制Gal-3表达后,采用Transwell侵袭小室法观察VEGF-C对SiHa细胞侵袭的影响。【结果】Gal-3(10μg/mL)处理SiHa细胞2 min、5 min及10 min后,均能促进VEGFR3磷酸化,其增加幅度分别为(162.4±10.4)%(n=3,P<0.05)、(202.5±16.2)%(n=3,P<0.01)、(282.4±18.6)%(n=3,P<0.001)。不同浓度的Gal-3(2、5、10μg/mL)处理SiHa细胞10 min,均能促进VEGFR3磷酸化,其增加幅度分别为(144.6±6.5)%(n=3,P<0.05)、(192.8±12.4)%(n=3,P<0.01)、(263.6±15.4)%(n=3,P<0.001)。VEGF-C(100 ng/mL)处理SiHa细胞10 min后,与对照组比较,VEGFR3与Gal-3之间的蛋白交联明显增加。VEGF-C可明显促进SiHa细胞的侵袭,与对照组比较,其增加幅度为(263.6±32.8)%(n=5,P<0.01)。而在转染特异性Gal-3 siRNA 48 h抑制Gal-3表达后,VEGF-C促细胞侵袭的能力明显减弱,抑制率为(80.5±10.2)%(n=5,P<0.01)。【结论】Gal-3可介导VEGF-C促宫颈癌细胞侵袭的作用,这一效应可能与Gal-3交联VEGFR3蛋白,并进一步引发VEGFR3磷酸化有关。
- 程杨夏薇陈华云何勉
- 关键词：宫颈癌血管内皮生长因子C半乳糖凝集素3
- 表没食子儿茶素没食子酸酯下调胃癌细胞血管内皮生长因子表达的分子机制研究被引量：2
- 2011年
- 目的探讨表没食子儿茶素没食子酸酯（EGCG）通过抑制转录活化因子（Stat3）活性下调胃癌细胞血管内皮生长因子（VEGF）表达的分子机制。方法采用Westernblot法检测AGS胃癌细胞分别在50μg／L IL-6加0、5、10、25、50μmol／LEGCG作用下，VEGF、总Stat3（tStat3）和活化Stat3（pStat3）的表达情况：检测Stat3信号通路抑制剂对IL-6诱导的VEGF蛋白表达水平的影响。酶联免疫吸附法检测肿瘤细胞培养液中VEGF蛋白水平。RT-PCR法检测胃癌细胞VEGFmRNA表达水平。制备细胞核提取液，WestemMot法检测肿瘤细胞核内pStat3表达；同时采用染色体免疫沉淀方法检测Stat3与DNA的结合活性。结果IL-6可以诱导AGS胃癌细胞VEGF表达．与未添加组比较，添加IL．6组胃癌细胞VEGF蛋白表达、分泌和mRNA表达分别增加了2．4、2．8和3．1倍（均P〈O．01）：EGCG剂量依赖性地抑制IL-6诱导的胃癌细胞VEGF蛋白表达、分泌和VEGFmRNA表达（P〈0．05）。EGCG和Stat3信号通路抑制剂AG490可以显著抑制IL-6诱导的VEGF表达（P〈0．01）：EGCG处理的胃癌细胞中IL-6诱导的pStat3表达剂量依赖性地减少（P〈O．05），但EGCG不影响IL-6诱导的tStat3表达（P〉0．05）；同时，EGCG可以直接抑制胃癌细胞自身和IL-6诱导的Stat3核转位和Stat3-DNA结合活性（P〈0．05）。结论EGCG通过抑制Stat3活性．从而下调胃癌细胞VEGF表达。
- 朱宝和何裕隆詹文华蔡世荣王昭张常华陈华云
- 关键词：表没食子儿茶素没食子酸酯血管生成血管内皮生长因子转录活化因子
