吕刚
- 作品数：117 被引量：202H指数：7
- 供职机构：海南医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金海南省自然科学基金海南省高等学校科学研究项目更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学环境科学与工程轻工技术与工程更多>>
- 曼氏血吸虫己糖激酶(SmHK)蛋白质结构与功能的生物信息学预测被引量：2
- 2010年
- 目的应用生物信息学技术预测曼氏血吸虫己糖激酶(SmHK)的结构和功能,为进一步功能研究提供信息。方法从GenBank获取SmHK及其他物种HK全长cDNA序列及氨基酸序列,应用NCBI、Expasy等在线生物信息学网站及VectorNTI软件包,对所获氨基酸序列的保守功能域及基序、蛋白质理化参数、亚细胞定位、亲水性、B细胞线性表位、二级结构及拓扑结构、三级结构建模分析及预测。结果SmHK编码451氨基酸残基,理论分子量为50446.01Da,具有完整HK-1及HK-2保守功能域,与结构和功能有关的位点高度保守,与宿主(人、鼠)的同源性为30%,与人等脊椎动物有较近的进化关系;有多个潜在的抗原表位、多个磷酸化位点及1个跨膜结构。三级结构分子建模显示该蛋白两基团间有一裂隙,葡萄糖、ATP结合位点及ATP催化区位于该裂隙中或周围,跨膜区与其两端的碱性氨基酸形成一阴离子通道。结论SmHK与结构和功能相关的位点高度保守,与宿主有较近的进化关系,推测该蛋白可能通过跨膜区锚定在线粒体外膜上,主要功能位点位于蛋白裂隙中或周围,多个磷酸化位点说明其参与多种细胞功能的调节,在调节能量代谢中起重要作用,是潜在的疫苗候选分子和药物作用靶标。
- 吕刚赵世勇李静晶范志刚芦亚君
- 关键词：血吸虫己糖激酶生物信息学
- 基于混合式教学的《病原生物学》课程思政探索与实践被引量：3
- 2021年
- 如何有效实现高校思政课与专业课的融合,是当前我国高等教育的热点话题。混合式教学作为一种新的教学模式,已逐渐成为高校教学的新常态。基于混合式教学开展课程思政,既是专业课程教学的内在动力需求,也是实现全程全方位育人的必要举措。该文致力于将《病原生物学》课程思政和混合式教学相结合,协调处理好教学内容的"减法"与课程思政和教学效果的"加法"的关系,使《病原生物学》课程与思想政治理论课形成"协同效应",这对于提高教学质量、加强教学改革、真正实现"全课程育人"具有重要学术价值,同时,为相关学科的课程思政改革提供借鉴。
- 牛莉娜饶朗毓伍丽娴吕刚彭芸花
- 关键词：《病原生物学》混合式教学
- 啮齿动物芽囊原虫的流行病学研究进展被引量：1
- 2023年
- 芽囊原虫是一种常见的人兽共患肠道寄生虫,呈世界性分布且动物宿主广泛,多数研究认为该虫具有机会致病性,低免疫人群感染可能会引起腹泻等症状。啮齿动物是地球上最大的且与人类生活密切相关的哺乳动物种群,具有种类多、分布广和适应性强的特点,是芽囊原虫重要的宿主,是多种人兽共患病原体的传播媒介,具有重要的公共卫生学意义。本文对全球啮齿动物芽囊原虫的流行病学情况进行综述,旨在为芽囊原虫病防控提供参考。
- 李佳琦任广旭赖秀仪王媛吕刚
- 关键词：芽囊原虫啮齿动物人兽共患
- 日本血吸虫乳酸脱氢酶原核表达、纯化及鉴定被引量：3
- 2007年
- 目的原核表达日本血吸虫乳酸脱氢酶(SjLDH),对表达产物进行纯化及生物活性鉴定。方法将SjLDH编码序列克隆入pET-28a原核表达载体并转染大肠埃希菌,异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达后亲和层析法对表达产物进行纯化,并用聚丙烯酰胺变性凝胶电泳(SDS-PAGE)、蛋白印迹(Western blot)、酶联免疫吸附实验(ELISA)、酶活性染色及活性测定进行鉴定。结果成功构建pET28a-SjLDH重组质粒并在大肠埃希菌中获得可溶性表达,亲和层析纯化表达产物。SDS-PAGE及Western Blot结果显示,表达及纯化产物分子量约36kDa,与SjLDH理论分子量相符。ELISA结果表明,重组蛋白具有良好的免疫活性,酶活性染色表明重组蛋白具有乳酸脱氢酶活性,活性单位为379U/mg。结论成功进行SjLDH的原核表达并获得纯化的重组蛋白,重组蛋白具有良好的免疫原性及酶活性,为研究SjLDH的功能奠定了基础。
- 吕刚胡旭初黄灿李艳文徐劲吴忠道余新炳
- 关键词：日本血吸虫乳酸脱氢酶原核表达纯化重组蛋白
- 环境科学课程教学实践改革研究被引量：2
- 2014年
- 环境学概论是高校环境类相关专业的专业基础课,课程理论性强、信息量大。合理组织教学内容,探索有效的教学方法是搞好教学的关键。本文对环境科学概论课程的教学改革与实践进行了初步的研究,通过调整教学内容、改进教学方法、开展课程实践来提高该课程的教学效果。多种教学方法和丰富的实践活动的引入对环境学概论的授课成效具有重要作用。
- 蹇丽钱士匀吕刚李慧君李娜唐天乐
- 关键词：环境学概论教学内容教学方法
- 细粒棘球绦虫果糖二磷酸醛缩酶的生物信息学分析及其表达与活性检测被引量：4
- 2014年
- 目的利用生物信息学方法分析细粒棘球绦虫果糖二磷酸醛缩酶(EgFBPA)的结构和功能特征,并利用基因工程技术进行克隆、表达、纯化,获得活性蛋白。方法利用多种生物信息学软件分析EgFBPA的拓扑结构、生物学以及免疫功能特征;用限制性内切酶EcoRⅠ和HandⅢ对重组质粒FBPA/P-blue酶切FBPA目的基因片段,亚克隆入表达载体pET30a,筛选重组克隆并测序,将测序正确的重组质粒转化入BL21(DE3)感受态细菌,用异丙基-β-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达重组蛋白;用Ni-NTA柱纯化重组蛋白,并建立酶反应体系,通过NADH(烟酰胺腺嘌呤二核苷酸)的变化测定重组蛋白EgFBPA的酶催化活性。结果 EgFBPA基因全长1 092bp,编码363个氨基酸,软件分析其等电点(pI)为8.34,分子质量单位为39.8035ku。亚细胞定位分析该蛋白为无信号肽的细胞质蛋白,属于稳定蛋白;结构域和保守功能域的预测,FBPAI的激活位点为VYLEGTLLKPN(222aa-232aa),并含有TIMβ/α筒状结构(6aa-346aa),二级结构以α-螺旋和环状结构居多,无跨膜区,有10种类型的活性位点。经PCR、双酶切和测序证实pET30a(+)-EgFBPA构建成功。SDS-PAGE检测重组质粒表达产物分子质量与预期相符,且具有可溶性;Bradford法测定蛋白浓度为(0.50±0.02)mg/ml。酶活性检测Ni-NTA柱纯化后的FBPA具有良好的酶促活性,且存在量效关系。结论生物信息学预测EgFBPA可能是潜在的药物靶点。重组质粒Pet30a(+)-FBPA在大肠埃希菌BL21中成功表达,表达产物具有酶促活性,为进一步研究其生物学功能及药物靶点奠定了基础。
- 王绚吴巨龙吕刚苏娟辛奇鲁俊张思王猛孙萃平逯召莲何黎黎景涛
- 关键词：细粒棘球绦虫蛋白纯化分子克隆生物信息学
- 一种萘酰亚胺修饰的罗丹明B衍生物及其制备和应用
- 本发明涉及荧光法对金属离子的检测，具体讲是一种萘酰亚胺修饰的罗丹明B衍生物1基于荧光共振能量转移(Fluorescence Resonance Energy Transfer,FRET）机理对铜离子(II)的识别。该衍生...
- 张军于春伟钱士匀吕刚
- 文献传递
- 胶体金层析法检测恶性疟原虫HRPII抗原的应用研究被引量：3
- 2000年
- 目的 :建立一种简易快速 ,适于基层或流行病学调查的自测式胶体金免疫层析法 (GICA)用于检测恶性疟原虫中 H RPII抗原 ,判定是否现症感染。方法 :用 GICA测试条检测全血及滤纸血样中的 H RPII抗原。结果 :40例恶性疟全血及滤纸血 H RPII抗原阳性检出率均为 1 0 0 ,与镜检结果相符合 ;2 5例间日疟均为阴性。结论 :GICA检测血中恶性疟原虫 H RPII抗原特异性强、灵敏度高、简便快速 ,无需特殊仪器设备 ,滤纸血的应用使样本的采集、保存和运输更为便利 ,适合大规模流行病学调查和基层使用 ,有广泛应用价值。
- 吕刚谢协驹余新柄陆家海林琼莲莫燕娜
- 关键词：恶性疟原虫胶体金层析法
- 形态类实验课课堂手机质控平台校外推广前景分析
- 2018年
- 目的确定形态类实验课课堂手机质控平台校外推广前景。方法 2017年9月通过问卷星网站自制电子问卷,通过微信群、微信朋友圈、QQ群和QQ空间等发放问卷,对本校之外的医学专业教师进行前期问卷调研。结果来自20个省市直辖市的教师中,65.96%的教师认为此平台完善,教师对此平台的评价与其性别、教龄、专业、职称和所在地区均无关系(P>0.05);87.23%的教师愿意使用此平台或类似平台,教师采用此平台或类似平台的意愿与其性别、教龄、专业、职称、所在地区和对平台的评价均无关(P>0.05)。结论尽管平台有待完善,但是其校外推广可能具有较好的前景。
- 范志刚伍丽娴李丽花牛莉娜饶朗毓陈锦龙崔秀吉吕刚
- 关键词：实验课手机质控
- 日本血吸虫翻译控制肿瘤蛋白基因的杆状病毒表达载体构建和在昆虫细胞中的表达被引量：2
- 2005年
- 目的构建日本血吸虫的翻译控制肿瘤蛋白(SjTCTP)基因的杆状病毒重组供体质粒pFASTA-TCTP,用该重组转移质粒转化含有杆状病毒表达载体以构建BacmidGFP-TCTP,感染昆虫细胞进行表达。方法将已克隆的SjTCTP基因与线性化的pFASTA进行连接为pFASTA-TCTP,使pFASTA-TCTP与DH10BAC感受菌进行转座重组,利用抗性及蓝白斑筛选重组BacmidGFP-TCTP克隆,提取BacmidGFP-TCTP转染昆虫细胞Sf9获得有感染力的病毒,利用病毒感染Sf9细胞进行蛋白表达,通过荧光镜观察、RT-PCR、SDS-PAGE和Western-Blotting检测表达情况。结果获得了重组SjTCTP的杆状病毒,细胞能表达出与SjTCTP单抗结合的、分子量为23kDa左右的融合有组氨酸标签的目的蛋白。结论SjTCTP能在昆虫细胞中获得良好表达,为其的分子生物学活性研究奠定了基础。
- 王海胡少敏黄艳吕刚吴忠道余新炳
- 关键词：日本血吸虫SF9细胞
