许健
- 作品数：8 被引量：46H指数：5
- 供职机构：中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室更多>>
- 发文基金：甘肃省科技支撑计划国家肉羊产业技术体系建设项目国家科技基础性工作专项更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 我国17株绵羊肺炎支原体分子分型及其菌体蛋白免疫印迹被引量：9
- 2011年
- 【目的】分别从基因和蛋白水平研究我国部分地区绵羊肺炎支原体(Mycoplasma ovipneumoniae)分离株的分子特征,并了解其免疫原性蛋白的差异。【方法】对分离自8个地区的17株绵羊肺炎支原体进行扩增片段长度多态性(Amplified Fragment Length Polymorphism,AFLP)和十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(Sodium Dodecyl Sulphate-Polyacrylamide Gel Electrophoresis,SDS-PAGE)分析,采用NTsys-2.10e软件对AFLP和SDS-PAGE结果进行聚类,并用绵羊肺炎支原体模式株Y98高免血清对部分分离株进行免疫印迹分析。【结果】当相似系数分别为0.78和0.85时,绵羊肺炎支原体分离株可根据8个来源地区分成8个AFLP群和8个SDS-PAGE群;用8株分离株进行免疫印迹共出现6条蛋白条带,分子质量分别为105 kDa、83 kDa、65 kDa、42 kDa、40 kDa或26 kDa,其中83 kDa和40 kDa蛋白为8个菌株保守的免疫原性蛋白。【结论】我国部分地区绵羊肺炎支原体分离株之间存在遗传差异,不同分离株的主要免疫原性蛋白也存在一定差异,但83 kDa和40 kDa蛋白为其保守的免疫原性蛋白。本研究首次对我国部分地区绵羊肺炎支原体分离株进行了分子分型与免疫印迹分析,结果将为绵羊肺炎支原体病的新型诊断技术开发和疫苗研制奠定理论基础。
- 许健储岳峰高鹏程赵萍贺英剡根强逯忠新
- 关键词：绵羊肺炎支原体AFLPSDS-PAGE免疫印迹
- 新疆巴音布鲁克羊腐蹄病的细菌分离及鉴定被引量：2
- 2023年
- 【目的】为了解新疆巴音布鲁克羊坏死杆菌致病性,【方法】2020-2022年采集和静县患病羊腐烂蹄肢部等病理组织样品60份进行病原菌分离鉴定,采用人工感染试验和细菌鉴定仪、高效液相质谱仪分别对其进行致病性检测和细菌鉴定。【结果】巴音布鲁克羊腐蹄病共分离到坏死杆菌、金黄色葡萄球菌和大肠杆菌等3株致病菌,为混合感染。3株菌均可引起小鼠死亡,对小鼠的致死率为46.67%。【结论】新疆和静县巴音布鲁克羊羊群中腐蹄病流行较为普遍,做好圈舍卫生消毒工作,对控制腐蹄病有效。
- 丁剑古丽娜尔张继红许健于伟伟史慧君肖开提
- 关键词：巴音布鲁克羊腐蹄病细菌分离细菌鉴定
- 绵羊肺炎支原体最适培养基的筛选被引量：1
- 2011年
- 为筛选一种适宜绵羊肺炎支原体(Mycoplasma ovipneumoniae,Mo)生长的培养基,利用活菌计数方法对MoGH3-3株在改良KM2培养基、TSB-1培养基、改良Thiaucourt氏培养基和10%马血清改良KM2培养基中不同培养阶段的生长滴度即颜色变化单位(ccu)进行了测定。结果表明,在培养24,48,72和96 h,MoGH3-3株在TSB-1培养基中的平均生长滴度高于其他3种培养基。在培养的72 h和96 h,在TSB-1培养基中平均最大生长滴度达到了109 ccu/mL,在改良KM2培养基和改良Thiaucourt氏培养基中只有108 ccu/mL,而在10%马血清改良KM2培养基中仅为106 ccu/mL。这为绵羊肺炎支原体培养特性研究和疫苗生产工艺研究提供了参考数据。
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- 关键词：绵羊肺炎支原体培养基
- 绵羊肺炎支原体GH3-3株在改良KM2培养基中的增殖情况被引量：5
- 2011年
- 绵羊肺炎支原体GH3-3MoGH3-3株是我国绵羊支原体肺炎灭活疫苗制苗菌株。为研究MoGH3-3株在改良KM2培养基中的生长及繁殖特性,利用活菌计数方法对其在不同培养阶段的生长滴度(颜色变化单位)进行测定,并绘制生长曲线。结果表明,传代稳定的MoGH3-3株在改良KM2培养基中培养12h开始进入对数生长期,培养72h进入稳定期,培养120h时进入衰亡期。本研究可为绵羊肺炎支原体培养特性研究和疫苗生产工艺研究提供参考数据。
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- 关键词：绵羊肺炎支原体增殖
- 10种消毒剂对非洲猪瘟病毒的灭活效果被引量：3
- 2022年
- 为探究常见消毒剂对非洲猪瘟病毒(ASFV)的灭活效果,本试验于体外检测了10种市售消毒剂对生长在猪肺泡巨噬细胞中ASFV的灭活效果。进而用3种消毒剂对曾经暴发非洲猪瘟(ASF)的废弃猪场进行环境消毒,并用荧光定量PCR方法验证其可靠性。结果显示,在各消毒剂对细胞的安全浓度下,次氯酸不具有灭活ASFV的作用;过硫酸氢钾复合物作1∶200稀释后,作用0.5 h能完全灭活ASFV;二氯异氰脲酸钠粉和苯扎溴铵稀释800倍后,能在0.5 h内有效灭活ASFV;其他消毒剂在其安全稀释度的浓度下,0.5 h内能完全灭活ASFV。本试验可为养殖场防控ASFV的感染提供消毒剂筛选的参考依据。
- 程晶许健刘文晓江波李永清
- 关键词：非洲猪瘟病毒消毒剂肺泡巨噬细胞灭活效果
- 绵羊肺炎支原体免疫蛋白质组学的初步研究被引量：10
- 2012年
- 利用双向电泳及免疫印迹方法对绵羊肺炎支原体MoGH3-3分离株的抗原蛋白进行筛选,并采用基质辅助激光解吸离子化飞行时间质谱对其进行初步鉴定。结果,共筛选到MoGH3-3株3个主要抗原蛋白点,其中2个被鉴定为延伸因子(elongation factor Tu,EF-Tu),1个为丙酮酸脱氢酶E1-a亚单位(pyruvate dehydrogenase E1-alpha subunit,PDHA)。结果表明,EF-Tu及PDHA是绵羊肺炎支原体主要的抗原蛋白,这为下一步绵羊支原体肺炎基因工程疫苗的研制提供了靶标。
- 许健储岳峰高鹏程赵萍贺英剡根强逯忠新
- 关键词：绵羊肺炎支原体免疫印迹蛋白质组学
- 中国部分地区绵羊肺炎支原体的基因多态性分析被引量：12
- 2011年
- 为了解绵羊肺炎支原体(Mycoplasma ovipneumoniae,Mo)在我国部分地区的流行病学特征,采用随机扩增多态性DNA(RAPD)及限制性片段长度多态性(RFLP)方法对26株Mo基因多态性进行了研究,并利用NTsys-2.10e软件对获得的多态性图谱进行了聚类分析。结果在相似系数为0.70时,26株Mo可分成6个RAPD群或6个RFLP群;相似系数为0.90时,分成18个RAPD群或18个RFLP群;相似系数为1.00时,分成25个RAPD群或26个RFLP群。结果表明,我国Mo存在高度的基因多态性,这种多态性与地域差异相关,与宿主来源也具有一定的相关性。研究结果为了解我国Mo的分子流行病学特征打下了基础,也为建立有效的Mo诊断方法和疫苗研制提供了参考依据。
- 许健储岳峰赵萍高鹏程贺英剡根强逯忠新
- 关键词：绵羊肺炎支原体随机扩增多态性DNA限制性片段长度多态性基因多态性流行病学
