戴建新 作品数:82 被引量:222 H指数:8 供职机构: 第二军医大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家高技术研究发展计划 国家重点基础研究发展计划 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
热休克后表达受抑基因的差别显示及克隆 1997年 热休克反应是生物体对高于其正常生长温度环境而作出的一系列分子应答反应。热休克基因及其表达的正调控机制现已得到广泛而深入的研究。 戴建新 王易伦 刘宇健 陆惠萍 孙树汉关键词:热休克基因 分子遗传学 热休克反应 计算机辅助分析 全长CDNA克隆 BMP-2 mRNA在实验性黄韧带骨化组织中的表达及其意义 被引量:7 2001年 目的 :从分子水平研究BMP 2在黄韧带骨化过程中的作用机理。方法 :以rhBMP 2诱导的黄韧带骨化 (实验组 ,O组 )为研究对象 ,分别于诱导物植入后 2、4、6周取实验节段黄韧带 ,提取总RNA ,采用Dotblot和Northernblot方法检测其BMP 2mRNA的表达程度 ,设立PBS溶液 /明胶海绵植入为实验对照组 (EC组 ) ,未手术动物为阴性对照组(N组 ) ,pSBMP 2质粒为阳性对照组 (P组 )。结果 :Dotblot和Northernbloe放射自显影图像显示 :rhBMP 2植入 2周时 ,黄韧带内BMP 2mRNA表达程度最高 ,然后逐渐下降 ,到 6周时明显减弱 ,与病理组织学研究中所见的韧带组织中成纤维细胞软骨化生的活跃程度呈正相关。实验对照组和阴性对照组均未见BMP 2mRNA表达。图像灰度扫描示 :0 2组、0 4组和 0 6组BMP 2mRNA的表达程度分别为 0 .6 15± 0 .14 84、 0 .443± 0 .0 982、 0 .2 32± 0 .0 749。结论 :rhBMP 2诱导的骨化过程中黄韧带组织内存在不同程度BMP 2mRNA的表达 ,其表达水平与成纤维细胞软骨化生的活跃程度呈正相关 ;内源性BMP -2可能参与黄韧带骨化的启动和持续发展。 陈雄生 贾连顺 倪斌 戴建新关键词:黄韧带 骨化 骨形态发生蛋白-2 MRNA表达 抗登革4型病毒中和表位特异性抗体及其在治疗登革4型病毒感染中的应用 本发明属于生物技术领域,更具体地,本发明登革4型病毒ED3的新的中和表位LTLH,与上述中和表位特异性结合的抗登革4型病毒ED3的单克隆抗体1G6及其在制备治疗登革4型病毒感染药物中的应用。 郭亚军 戴建新 邓永强 秦成峰 李博华 王华菁文献传递 差别显示mRNA法的改良 被引量:2 1995年 本文介绍了一种筛选和克隆差异表达基因的新方法——差别显示mRNA法。并在模板、引物、反应体系、反应条件等方面,对该方法作了深入的探索和改进,与原方法相比,改良法具有高效、可靠性高、经济等优点。实验表明,该方法能有效地筛选到一对细胞或组织在不同状态下表达差异的基因。为新基因的发现和克隆提供了新的手段。 戴建新 王易伦 郭嘉 刘宇健 隆德如关键词:基因 信使RNA PCR 猪囊尾蚴抗原-B基因cDNA编码区的克隆 被引量:18 2000年 [目的 ]扩增和克隆猪带绦虫囊尾蚴 Ag B基因的 c DNA编码区。 [方法 ]提取猪囊尾蚴总 RNA中 ,利用 RT- PCR技术扩增出 Ag B基因 c DNA编码区 ,然后将其克隆到载体 p UC118中进行序列分析。 [结果 ]PCR反应产物为单一条带 ,大小为 2 .6 kb。测序结果与澳大利亚株猪囊尾蚴 Ag B序列有 99.8%的同源性 ,二者的氨基酸序列有 99.3%的同源性。 [结论 ]成功地克隆了猪囊尾蚴 Ag B基因 c DNA编码区。 王庆敏 戴建新 张平武 孙树汉关键词:基因克隆 人血小板生成素cDNA的克隆及在COS-7细胞中的表达 1998年 目的:克隆人血小板生成素(hTPO)cDNA,并研究其在COS-7细胞中的表达。方法:通过RT-PCR法获得hTPOcDNA,测序后克隆到真核表达载体pED上,以DEAE-dextran法转染COS-7细胞,巨核细胞集落形成培养法测表达产物活性。结果和结论:获得的hTPOcDNA和文献报道的序列一致。转染细胞RNA斑点杂交结果显示TPOcDNA获得转录,转染后48和72h的细胞上清均可测到TPO活性。pED是一个表达较高的真核表达载体。 童涌 戴建新 陈蕊雯 周永春 孙树汉 陆德如关键词:人血小板生成素 基因表达 CDNA COS-7细胞 抑癌基因CIP1/WAF1及其产物的研究现状 被引量:4 1995年 抑癌基因的研究近年来已超过了致癌基因的研究而成为当今肿瘤探索的一个主流并已取得了突破性的进展。随着对p53基因及其产物作用机制研究的进一步深入,人们又发现p53只是诱导了CIPl/WAFl基因的转录间接地起到抑制细胞生长的作用,本文就CIPl/WAFl基因及其产物的一般性状及生物学功能的研究现状作一叙述。 周辉 戴建新关键词:抑癌基因 P21 基因表达 电穿孔法转化大肠杆菌的影响因素 被引量:7 1999年 质粒DNA转化大肠杆菌是分子生物学中最为常用的技术方法。经典的氯化钙法1μgDNA可获得105~106个转化子,但不能满足转化效率要求极高的实验需要(如构建质粒文库等)。近年发展的高效化学法转化甚至可将转化效率提高1000倍[1,2]。但是,制备这类... 戴建新 周凤鹃 孙树汉关键词:大肠杆菌 质粒 DNA 电穿孔法 抗金黄色葡萄球菌肠毒素B保护性中和单克隆抗体的筛选及鉴定 2010年 金黄色葡萄球菌肠毒素B(SEB)属于热毒素超抗原家族。它通过激活T细胞,使T细胞大量增殖并释放大量炎症细胞因子,从而导致中毒性休克综合征及死亡。为了筛选获得抗SEB的中和保护性单克隆抗体,我们首先克隆了SEB基因,表达纯化获得GST-SEB融合蛋白;将之免疫BALB/c小鼠后,利用杂交瘤技术结合ELISA检测,筛选获得10株抗SEB单克隆抗体杂交瘤细胞株;ELISA和Western blot鉴定其分泌的抗体能与SEB特异结合;抗体亚型检测均为IgG1/k;体外实验证实,10株抗体中有6株(1A5、4A3、3E2、3C1、1D1、2G9)能够有效阻断SEB诱导的人外周血单核细胞(PBMC)的激活,具有中和保护作用。本研究为进一步获得抗SEB的人源化单克隆中和性抗体奠定了基础。 康延申 王华菁 杨海鸥 谈文龙 张波 魏于全 戴建新关键词:单克隆抗体 金黄色葡萄球菌肠毒素B 金黄色葡萄球菌肠毒素B的功能表位、与其特异性结合的单克隆抗体及其应用 本发明属于生物技术领域,更具体地,本发明公开金黄色葡萄球菌肠毒B的功能表位<Sup>195</Sup>SFWYDMMP<Sup>202</Sup>、<Sup>12</Sup>HKSSKFTGL<Sup>20</Sup>、... 郭亚军 戴建新 王华菁文献传递