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猪链球菌2型分离株对野生斑马鱼的致病性被引量：7: 2008年; 以野生斑马鱼为模式动物,对6株mrp+epf+sly+猪链球菌2型(SS2)分离株进行致病性比较。斑马鱼经腹腔接种不同稀释度的SS2分离株,连续观察5d,Kaplan-Meier生存曲线分析并统计半数致死量(LD50)。结果显示,6个分离株对斑马鱼的LD50在105cfu^106cfu之间,临床株与非临床株的毒力差异不显著(P>0.05)。从攻毒后死亡的鱼腹腔和脑可分离到SS2,并伴有腹腔出血及肝、肠、脑部炎性病变。表明SS2可感染斑马鱼,为进一步研究SS2的体内感染机制及毒力因子功能等奠定了基础。; 陈阳吴迪陈雪燕赵焕灿扈鸿霞Cheick A Diakite方维焕; 关键词：2型猪链球菌斑马鱼半数致死量

我国PPP项目资产证券化风险研究——以“大成西黄河大桥收益权ABS”为例: 近年来,为了加快基础设施建设,国家及地方政府积极推进PPP(政府和社会资本合作)模式的发展。然而由于PPP项目往往具有投资周期较长、投资金额巨大、收益较低等特点,对于社会资本的吸引力较弱。PPP项目虽然流动性差,但是其一...; 陈雪燕; 关键词：PPP 资产证券化; 文献传递

单核细胞增多性李斯特菌LMO1847基因在不同应激条件下的表达被引量：1: 2007年; 根据GenBank登陆的单增李斯特菌标准株EGD序列设计引物,PCR扩增LM01847基因片段后插入表达载体pET-30 a,构建重组原核表达载体,并在E. coliBL21中成功表达。纯化目的蛋白制备多抗,ELISA结果显示:该蛋白多抗与单增李斯特菌全菌、全菌多抗与该蛋白均可发生反应。证明该蛋白在天然状态下存在于单增李斯特菌表面,且具有良好的免疫反应性。该蛋白在45℃、高盐、酸性环境中表达水平基本稳定,但在低pH值条件下反应活性消失;高盐或低温条件下,表达量随盐浓度的升高或温度的下降而降低。除4℃以外,该蛋白均能保持良好的免疫反应活性。本研究为建立针对该蛋白的李斯特菌免疫微球凝集、免疫磁珠分离等检测方法奠定基础。; 田国明李肖梁陈建舜陈雪燕方维焕; 关键词：环境应激免疫反应性

减毒沙门氏菌作为原核表达宿主菌和真核表达载体的研究(英文)被引量：5: 2006年; 本研究以增强型绿色荧光蛋白(eGFP)为报告基因,探讨了减毒沙门氏菌作为原核表达宿主菌和真核表达载体的可行性.通过多功能分光光度仪测定细菌的OD600和eGFP在大肠杆菌和减毒沙门氏菌中的表达量,结果表明:eGFP在沙门氏菌中的表达量依赖于IPTG的浓度,最佳浓度为0.5 mmol?L-1,增加浓度至0.75 mmol?L-1不能增加eGFP的表达量;而该现象在大肠杆菌中不明显.当IPTG浓度等于或大于0.5 mmol?L-1时,沙门氏菌中eGFP的表达量显著高于大肠杆菌.若以相对荧光度(1个OD600单位的荧光值,即eGFP相对表达量)表示,两种宿主菌的最佳诱导时间均为3 h.Hela细胞侵袭力试验表明该减毒沙门氏菌仍具有侵袭力,同时以脂质体转染为对照,将携带重组质粒pcDNA3-eGFP的减毒沙门氏菌转染Hela细胞,48 h后可观察到绿色荧光,表明了该菌可作为载体将重组质粒携带到细胞内,并使外源基因得到表达.此外,利用基于微孔板的多功能分光光度仪可直接检测荧光强度和OD值,能快速、准确地进行多样本检测,可用于GFP在不同宿主菌或相同宿主菌在不同试验条件下,甚至不同表达载体在相同宿主菌中表达等方面的研究.; 迪卡陈雪燕帅江冰陈宁方维焕; 关键词：减毒鼠伤寒沙门氏菌重组质粒增强型绿色荧光蛋白

猪圆环病毒2型(PCV2)核衣壳蛋白免疫原性的鉴定和应用及其多抗在PCV2感染诊断中的应用(英文): 2008年; 猪圆环病毒2型ORF2编码与病毒毒力相关的结构蛋白——核衣壳蛋白(Cap),该蛋白可以用于PCV2感染的血清学调查,但不同区域的PCV2分离株的ORF2特别是其抗原表位序列存在一定的突变。本研究将PCV2浙江分离株ORF2的主要抗原表位以及PCV1ORF2进行了原核表达,将分别纯化的融合蛋白Cap2s和Cap1s免疫SPF兔后制备多抗,并进一步分析了纯化蛋白的免疫原性和多抗的特性。Western blot结果表明无论Cap2s和Cap1s均能与两个多抗发生交叉反应,而PCV2或PCV1阳性猪血清只能分别特异性地识别Cap2s和Cap1s。IFA结果则证明两个多抗对于天然Cap蛋白无交叉反应性。利用Cap2s作为包被抗原对13个猪场的259份血清样品的PCV2抗体进行ELISA检测,平均阳性率为80.69%(209/259),而各猪场的阳性率差异较大(48.28%～100%)。以上结果表明Cap2s可作为一个型特异性抗原用于浙江省本地猪场猪群血清中PCV2抗体的监控,而其多抗也可用于免疫组化对PCV2感染进行有效诊断。; 帅江冰李肖梁陈宁陈雪燕方维焕; 关键词：核衣壳蛋白免疫原性间接免疫荧光血清阳性率

重组质粒在减毒沙门氏菌中的稳定性及其对细菌侵袭力的影响被引量：10: 2005年; 将含有外源基因的重组真核表达质粒pcDNA3-F和pCI-F转化减毒鼠伤寒门氏菌,探讨质粒类型和插入片段对重组质粒在细菌内的稳定性和细菌侵袭力的影响。结果表明,外源质粒可降低减毒沙门氏菌在体外的增殖能力和侵袭力,也影响细菌在鸡体内的存活力;就质粒类型而言,pCI的影响大于pcDNA3,而以携带外源基因的重组质粒影响较为显著;外源基因插入也影响质粒在宿主菌内的稳定性。提示利用减毒鼠伤寒沙门氏菌为载体传递DNA疫苗研究时,要考虑质粒类型与其在宿主菌内稳定性的关系、携带外源基因重组质粒对载体菌侵袭力和存活力的影响等问题。; 陈雪燕JOHN M.Dikki江玲丽帅江冰方维焕; 关键词：减毒沙门氏菌侵袭力稳定性

卷曲乳酸杆菌ZJ001 S-层蛋白基因结构及其表达产物的粘附和锚定功能研究: 乳酸杆菌是人和动物消化道和生殖道中的正常微生物菌群之一,可通过生物拮抗、改善菌群生态平衡和提高机体免疫功能等方面在动物生产中发挥其益生素作用。S-层蛋白(S-layer protein)是许多细菌表面的主要蛋白成分,分子...; 陈雪燕; 关键词：S-层蛋白疫苗载体动物生产多克隆抗体; 文献传递

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陈雪燕